本文關(guān)鍵詞：水通道蛋白4及黏蛋白5AC在哮喘小鼠支氣管肺組織的表達(dá)及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：觀察水通道蛋白4(AQP4)和黏蛋白5AC(MUC5AC)在哮喘小鼠支氣管肺組織的表達(dá)，以及地塞米松對其表達(dá)的影響，探討AQP4和MUC5AC在哮喘發(fā)病機制中的作用。方法：將24只5周齡清潔級C57BL/6小鼠隨機分為正常對照組、哮喘組和地塞米松治療組(DEX組)，每組8只。哮喘模型組：第0d及14d腹腔注射新鮮配制的卵蛋白(OVA)與氫氧化鋁混懸溶液0.2ml(1g/LOVA+10g/L氫氧化鋁)致敏，第2l、22和23d予以1g/LOVA溶液50μL滴鼻吸入激發(fā)。DEX組：致敏及激發(fā)同哮喘組，但在每次滴鼻激發(fā)前30min予地塞米松1.0mg/kg腹腔注射。正常對照組：給予相同體積的生理鹽水以同樣的方法腹腔注射及滴鼻。于末次激發(fā)24h后處死小鼠，取肺組織行蘇木精-伊紅(HE)染色觀察肺組織形態(tài)學(xué)的改變，阿辛藍(lán)-過碘酸-雪夫染色法(AB-PAS)觀察氣道杯狀細(xì)胞增生和黏液分泌情況，采用病理評分法評價各組小鼠支氣管肺組織的病理改變；免疫組織化學(xué)染色法檢測支氣管肺組織中AQP4和MUC5AC蛋白的表達(dá)；實時熒光定量PCR法檢測AQP4和MUC5ACmRNA的表達(dá)，以SYBR-greenⅠ作熒光指示劑，檢測AQP4和MUC5AC及管家基因β-actinmRNA的量，采用雙ΔΔCt法計算各組目的基因的相對表達(dá)量。統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS13.0軟件，各組計量資料的數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間差異顯著性檢驗采用單因素方差分析，兩組間比較采用SNK法檢驗，兩變量間的相關(guān)性采用直線相關(guān)分析，P0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果：⑴HE染色：哮喘組小鼠支氣管、細(xì)支氣管黏膜下和血管周圍有大量炎癥細(xì)胞浸潤，黏膜下水腫，管腔狹窄，管腔內(nèi)可見黏液栓，氣道上皮細(xì)胞脫落，氣道平滑肌增厚；DEX組上述病理改變較哮喘組明顯減輕；對照組未見上述病理改變。肺組織病理學(xué)評分哮喘組(4.2±0.676)明顯高于對照組(0.6±0.507)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)，DEX組評分(2.4±0.737)低于哮喘組，但仍高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。⑵AB-PAS染色：哮喘組小鼠氣道有大量杯狀細(xì)胞增生，染色胞漿呈藍(lán)色和紫紅色，管腔內(nèi)可見大量黏液分泌；DEX組較哮喘組明顯減輕，對照組黏液分泌不明顯。病理評分哮喘組(3.4±0.672)明顯高于對照組(0.7±0.723)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；DEX組評分(2.1±0.545)低于哮喘組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。⑶免疫組化染色：AQP4主要表達(dá)于大小氣道上皮細(xì)胞基底部和血管周圍，Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞，哮喘組AQP4表達(dá)明顯低于對照組，DEX組較哮喘組表達(dá)增強，但仍低于對照組。MUC5AC主要表達(dá)于氣道黏膜下基底層，哮喘組表達(dá)呈強陽性，地塞米松組表達(dá)較哮喘組減弱，但仍高于對照組。⑷實時熒光定量PCR：哮喘組AQP4mRNA相對表達(dá)量(1.1923±0.1933)明顯低于對照組(4.4220±2.1953)及DEX組(2.4132±1.0997)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；與對照組比較，DEX組AQP4mRNA表達(dá)量仍減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。哮喘組MUC5ACmRNA相對表達(dá)量(9.1876±3.0894)明顯高于對照組(1.0945±0.1920)及DEX組(2.7621±1.8449)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)，，DEX組MUC5ACmRNA表達(dá)量仍較對照組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。⑸相關(guān)性分析：哮喘組和DEX組AQP4與MUC5ACmRNA表達(dá)量呈顯著負(fù)相關(guān)(r＝-0.758，-0.591，P均0.05)。結(jié)論：⑴成功建立了C57BL/6小鼠哮喘模型；⑵OVA致敏/激發(fā)的哮喘小鼠存在氣道炎癥和黏液高分泌；⑶OVA致敏/激發(fā)的哮喘小鼠支氣管肺組織AQP4表達(dá)降低，MUC5AC表達(dá)增高，二者呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，可能參與了哮喘小鼠氣道炎癥和黏液高分泌的病理生理過程。⑷地塞米松能上調(diào)AQP4的表達(dá)和下調(diào)MUC5AC的表達(dá)，可能是其抑制哮喘小鼠氣道炎癥和氣道黏液高分泌的機制之一。
【關(guān)鍵詞】：支氣管哮喘 水通道蛋白4 黏蛋白 黏液高分泌
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-25
• 結(jié)果25-33
• 討論33-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 英漢縮略詞對照表45-46
• 致謝46-47
• 文獻(xiàn)綜述一 水通道蛋白4在呼吸系統(tǒng)疾病的研究進(jìn)展47-59
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 文獻(xiàn)綜述二 氣道黏液高分泌的研究進(jìn)展59-68
• 參考文獻(xiàn)65-68

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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  本文關(guān)鍵詞：水通道蛋白4及黏蛋白5AC在哮喘小鼠支氣管肺組織的表達(dá)及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：289564