本文關(guān)鍵詞：組蛋白去乙酰化酶1、8在肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化中的表達(dá)及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【背景與目的】隨著近年來(lái)人們平均壽命的延長(zhǎng)以及治療腫瘤過(guò)程中放化療的應(yīng)用，肺間質(zhì)彌漫性纖維化的發(fā)病率逐年上升。臨床上傳統(tǒng)的治療藥物對(duì)于阻抑纖維化的進(jìn)展雖有一定療效，但副作用大，應(yīng)用受限。與其他器官纖維化一樣，肺纖維化（Pulmonary fibrosis，PF）涉及到細(xì)胞、細(xì)胞因子、上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-Mesenchymal Transition，EMT）等的共同參與，其中EMT參與了調(diào)控器官纖維化的發(fā)生和其它生理病理過(guò)程，而組蛋白去乙�；福℉istone deacetylase，HDACs）也在這些相關(guān)的過(guò)程中起著重要作用。HDACs是平衡染色質(zhì)重塑中組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶（Histone acetyltransferase，HAT）乙�；顒�(dòng)的酶類，如果兩種酶之間的平衡在特定條件下被破壞，就會(huì)導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄的失調(diào)及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)改變，從而引起基因表達(dá)異常，這種異常在纖維化以及癌癥的發(fā)生和發(fā)展中都起著重要作用。HDACs共分為四類，，其中HDAC1、8屬于Ⅰ類HDAC。近年來(lái)的研究表明，HDAC1在TGF-β1誘導(dǎo)的肝細(xì)胞EMT過(guò)程中發(fā)揮重要作用，而且組蛋白去乙�；敢种苿℉istone deacetylase inhibitor，HDACi）-TrichostatinA（TSA）可以有效抑制Ⅰ類及Ⅱ類HDAC，在四氯化碳誘導(dǎo)的慢性肝損傷中預(yù)防纖維化，改善心肌纖維化，還可以抑制腎小管上皮細(xì)胞EMT及減輕皮膚癌放療后的纖維化。但是HDACs是否參與了肺泡上皮細(xì)胞EMT進(jìn)程目前尚不清楚，所以本研究通過(guò)在體外培養(yǎng)大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞中加入TGF-β1，觀察HDAC1、8和E-cad、α-SMA的表達(dá)情況，然后加入TSA，觀察其對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞EMT的影響，探討HDAC1、8在肺泡上皮細(xì)胞EMT過(guò)程中的作用及其機(jī)制。 【材料與方法】將TGF-β1加入到體外培養(yǎng)的大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞系（RLE-6TN）中，并于不同時(shí)間收取細(xì)胞，采用Real-time RT-PCR及Western Blot檢測(cè)HDAC1、HDAC8、上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物（E-cad）及間質(zhì)細(xì)胞特異性標(biāo)志物（α-SMA）的表達(dá)情況。然后將TGF-β1加入經(jīng)過(guò)TSA預(yù)處理的細(xì)胞中，于不同時(shí)間收取細(xì)胞，采用Real-time RT-PCR及Western Blot檢測(cè)E-cad、α-SMA及HDAC1、8的表達(dá)情況。 【結(jié)果】與對(duì)照組相比，加入TGF-β1后，E-cad mRNA的表達(dá)下調(diào)，α-SMA及HDAC8的mRNA均于12h表達(dá)上調(diào)，6h、24h表達(dá)下調(diào)， HDAC1mRNA的表達(dá)于6h下調(diào)，24h上調(diào)；E-cad蛋白表達(dá)下調(diào)，α-SMA、HDAC1及HDAC8蛋白表達(dá)上調(diào)。與單用TGF-β1組相比，加入TSA后，E-cad mRNA的表達(dá)上調(diào)，α-SMAmRNA的表達(dá)于6h、12h上調(diào)，24h下調(diào)，HDAC1mRNA表達(dá)下調(diào)，HDAC8mRNA表達(dá)上調(diào)；E-cad蛋白表達(dá)上調(diào)，α-SMA、HDAC1及HDAC8蛋白的表達(dá)均下調(diào)。 【結(jié)論】1. HDAC1參與了TGF-β1誘導(dǎo)的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)變過(guò)程；2.TGF-β1體外誘導(dǎo)的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞EMT，可以通過(guò)應(yīng)用TSA抑制其獲得α-SMA表型、失去E-cad表型，從而部分逆轉(zhuǎn)TGF-β1誘導(dǎo)的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞EMT。
【關(guān)鍵詞】：肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞 EMT HDAC1 TGF-β1 TSA
【學(xué)位授予單位】：大理學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R563.9
【目錄】：

• 英文縮略語(yǔ)注釋4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-18
• 一. 材料11-13
• 1. 主要試劑11-12
• 2. 引物12
• 3. 主要儀器和設(shè)備12
• 4. 所用細(xì)胞株12-13
• 二. 方法13-18
• 1. 大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞系 RLE-6TN 的培養(yǎng)與鑒定13
• 2. TGF-β1 對(duì) HDAC1.8 及 EMT 相關(guān)標(biāo)記物的表達(dá)情況13-16
• 3. TSA 對(duì) TGF-β1 誘導(dǎo)的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞 EMT 的影響16-18
• 4. 定量和統(tǒng)計(jì)學(xué)處理18
• 結(jié)果18-27
• 1. 大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞系 RLE-6TN 的培養(yǎng)與鑒定18
• 2. TGF-β1 對(duì) HDAC1.8 及 EMT 相關(guān)標(biāo)記物的表達(dá)情況18-23
• 3. TSA 對(duì) TGF-β1 誘導(dǎo)的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞 EMT 的影響23-27
• 討論27-29
• 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-34
• 附錄34-35
• 文獻(xiàn)綜述35-44
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 致謝44

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 徐國(guó)萍;高不郎;姜巍;許祖德;;TGF-β1與EGF對(duì)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞表型及功能的影響[J];大理學(xué)院學(xué)報(bào);2011年06期

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3 張敏,吳壯,徐軍;損傷氣道上皮組織轉(zhuǎn)化在氣道重塑中的作用[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2004年11期

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  本文關(guān)鍵詞：組蛋白去乙酰化酶1、8在肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化中的表達(dá)及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：269258