本文關(guān)鍵詞：Hrd1在香煙煙霧誘導(dǎo)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《南華大學(xué)》 2012年

Hrd1在香煙煙霧誘導(dǎo)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用

姜迪譞  

【摘要】：目的：觀察原代培養(yǎng)的大鼠II型肺泡上皮細(xì)胞（AECII）暴露于香煙煙霧提取物（CSE）不同時間凋亡率的變化，以及AECII中Hrd1、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）相關(guān)因子、ERS誘導(dǎo)性凋亡相關(guān)因子的表達(dá)變化；觀察Hrd1基因沉默/過表達(dá)對上述變化的影響；探索Hrd1在COPD關(guān)于肺結(jié)構(gòu)細(xì)胞凋亡的發(fā)病機制中所起的作用。 方法：原代及傳代培養(yǎng)大鼠AECII；制備CSE；用攜帶Hrd1干擾序列/編碼序列的慢病毒侵染AECII沉默/過表達(dá)Hrd1基因；在10%CSE刺激AECII的0h、3h、6h、12h、24h、48h時間點：Hoechst染色檢測干預(yù)前后細(xì)胞凋亡率、Realtime-PCR、Western blot技術(shù)檢測干預(yù)前后Hrd1、PERK、P-PERK、eIF2α、P-eIF2α、IRE1、P-IRE1、ATF6、caspase12、JNK、P-JNK、CHOP的表達(dá)； 結(jié)果： 1.傳至第3代培養(yǎng)的細(xì)胞，其形態(tài)、生長特征及生理學(xué)特性與原代培養(yǎng)細(xì)胞無明顯差異。 2. Hoechst染色顯示：暴露于10%CSE的大鼠AECII其凋亡率隨著刺激時間的延長不斷升高；敲除Hrd1基因組細(xì)胞各時間點凋亡率較野生型明顯增加；過表達(dá)Hrd1基因組細(xì)胞凋亡率較野生型明顯降低。 3.Westen blot結(jié)果顯示：10%CSE作用不同時間PERK、eIF2α以及IRE1總蛋白的表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.5），野生型細(xì)胞P-PERK的表達(dá)從3h組開始升高，12h達(dá)到高峰，后逐漸降低但仍高于對照組水平，P-eIF2α隨著CSE暴露時間的延長呈遞增趨勢；沉默Hrd1基因后，P-PERK的表達(dá)從3h組有所升高，6h開始即表達(dá)稍降并隨著CSE作用時間的延長顯著降低，而P-eIF2α蛋白的表達(dá)則隨著作用時間的延長呈持續(xù)下降趨勢；過表達(dá)Hrd1基因后，P-PERK蛋白的表達(dá)隨著作用時間的延長不斷減少，而P-eIF2α的表達(dá)從3h組稍有升高，12h組最高，隨后根據(jù)CSE作用時間的延長顯著降低。野生組P-IRE1的表達(dá)隨著CSE暴露時間的延長呈遞增趨勢；沉默組P-IRE1的表達(dá)從3h開始逐漸升高，12h達(dá)高峰，24h、48h表達(dá)均下降；過表達(dá)組P-IRE1的表達(dá)隨著作用時間的延長不斷增加。野生組ATF6α的表達(dá)隨著CSE暴露時間的延長呈遞增趨勢；沉默組ATF6α蛋白的表達(dá)則隨著作用時間的延長呈持續(xù)下降趨勢；過表達(dá)組ATF6α的表達(dá)從3h開始逐漸降低，6h最低，12h開始表達(dá)增加并在24h、48組持續(xù)增加。 4. Westen blot結(jié)果顯示：10%CSE作用不同時間總JNK蛋白的表達(dá)與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.5），P-JNK的表達(dá)隨著CSE暴露時間的延長呈遞增趨勢，caspase12的表達(dá)從3h組開始升高，12h達(dá)到高峰，隨后逐漸降低但仍高于對照組水平。CHOP蛋白的表達(dá)在野生組隨著CSE暴露時間的延長不斷增加，在沉默組從3h組開始升高，12h達(dá)最高峰，之后隨著CSE作用時間的延長逐漸下降但表達(dá)始終高于對照組，在過表達(dá)組隨著CSE作用時間的延長持續(xù)升高。 結(jié)論： 1.在適宜的培養(yǎng)條件下，離體培養(yǎng)的第3代AECⅡ能夠維持相對穩(wěn)定的分化表型，可以用于探索在體AECII的凋亡機制。 2. CSE能夠誘導(dǎo)AECII發(fā)生ERS并通過ERS介導(dǎo)細(xì)胞凋亡，PEAK/IRE1/ATF6三條跨膜信號通路均參與了CSE誘導(dǎo)的ERS，，Caspase12/JNK/CHOP三條ERS凋亡信號通路均參與介導(dǎo)CSE誘導(dǎo)的AECII凋亡。 3. Hrd1對CSE誘導(dǎo)的AECII凋亡具有保護(hù)作用。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R563.9
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻(xiàn)

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡潔,蔡真;細(xì)胞器相關(guān)凋亡途徑研究進(jìn)展[J];中國腫瘤生物治療雜志;2005年02期

2 王曉文;吳彥瑞;靳雁斌;馬鑫;吳燕;范文紅;范明;;外源表達(dá)人CPNE5誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2007年06期

3 宋曉冬;劉文波;張瑾錦;王秀文;王斌;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激機制在蝦青素作用下的CBRH-7919細(xì)胞中的調(diào)控[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2009年06期

4 韓暄;牛朝詩;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與運動障礙性疾病[J];中國微侵襲神經(jīng)外科雜志;2011年07期

5 高愛國，董林旺，王雪青，劉乃奎，唐朝樞，劉茂生;敗血癥休克大鼠肝臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶磷酸化及去磷酸化的改變[J];生理學(xué)報;1996年03期

6 姜山,謝青;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與細(xì)胞凋亡[J];國外醫(yī)學(xué).流行病學(xué).傳染病學(xué)分冊;2004年06期

7 王茜婷;張衛(wèi)光;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2008年18期

8 馬濤;薛承銳;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)未折疊蛋白反應(yīng)與凋亡信號機制研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2008年23期

9 陳鵬;楊成明;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)與心血管系統(tǒng)疾病[J];心血管病學(xué)進(jìn)展;2009年02期

10 付燕燕;段靜雨;宋遠(yuǎn)見;;氧化苦參堿對大鼠局灶性腦缺血再灌注后caspase-12表達(dá)的影響[J];山東醫(yī)藥;2009年47期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 薛欣;李玉梅;張立石;;TNFα信號通路與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的相關(guān)性研究[A];第十屆全國抗炎免疫藥理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2010年

2 姚樹桐;�；�;楊娜娜;康莉;田華;張穎;宋國華;秦樹存;;CD36介導(dǎo)氧化低密度脂蛋白對巨噬細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的誘導(dǎo)作用[A];中國病理生理學(xué)會第九屆全國代表大會及學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2010年

3 李寶宗;葉林柏;吳正輝;佘應(yīng)龍;郜金榮;;乙肝病毒X蛋白在肝細(xì)胞系中激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力反應(yīng)[A];湖北省暨武漢市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會第八屆第十七次學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2007年

4 王旭;王綠婭;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與高膽固醇血癥[A];第四屆全國血脂分析與臨床學(xué)術(shù)研討會暨第九屆全國脂蛋白學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

5 曾薇;羅志鋒;齊偉;郭艷紅;龐琦;張均;王宗前;牟嬌;馮兵;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在尿毒癥血清致內(nèi)皮細(xì)胞增殖和炎癥激活中的作用[A];第十一屆全國中西醫(yī)結(jié)合腎臟病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

6 何善述;;細(xì)胞凋亡的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑[A];湖北省暨武漢生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會第八屆會員代表大會和第十五次學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2004年

7 謝加力;李俊;黃成;黃艷;章圣朋;林珍;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與TRAIL在HSC-T6細(xì)胞凋亡中的相互關(guān)系探討[A];中國藥理學(xué)會第十一次全國學(xué)術(shù)會議�？痆C];2011年

8 褚少游;湯雪明;;大鼠粒細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的電鏡細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)[A];第四次全國電子顯微學(xué)會議論文摘要集[C];1986年

9 段淑榮;王君;王海濤;董力芹;王德生;張黎明;;人腦缺血后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)伴侶蛋白GRP78和Caspase-9的表達(dá)變化[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

10 范小芳;龔永生;毛孫忠;黃萍;胡良岡;吳東紅;陳醒言;;慢性低氧性肺動脈高壓大鼠肺組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激性凋亡的變化[A];浙江省生理科學(xué)會2008年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 錢錚;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2007年

2 王雪飛;[N];健康報;2008年

3 劉海英;[N];科技日報;2009年

4 楊茜;[N];中國醫(yī)藥報;2006年

5 杜華斌;[N];科技日報;2008年

6 蒲昭和;[N];中國醫(yī)藥報;2001年

7 白葉;[N];中國醫(yī)藥報;2008年

8 余海若;[N];大眾科技報;2004年

9 魯白;[N];科技日報;2000年

10 李 戎 閆智勇 李文軍 張?zhí)於?[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 熊宇芳;LOX-1介導(dǎo)ox-LDL導(dǎo)致eNOS去磷酸化的新機制：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的作用[D];華中科技大學(xué);2010年

2 高小玲;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在雙氫青蒿素誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡中的作用研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

3 張愛梁;依達(dá)拉奉對脊髓缺血再灌注損傷保護(hù)作用的機制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

4 王鳳;擬南芥內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的Profilin2蛋白結(jié)合蛋白的分離與純化[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

5 曹獻(xiàn)英;納米羥基磷灰石誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞死亡的作用靶點及機理研究[D];武漢理工大學(xué);2005年

6 夏玉鳳;pf40基因產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位以及其功能研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

7 李長菲;一種新型凋亡相關(guān)蛋白EAPF的克隆及功能研究[D];浙江大學(xué);2005年

8 李杰;天花粉蛋白誘導(dǎo)人白血病細(xì)胞株K562和HL-60凋亡的信號機制的研究[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2007年

9 陳瑤;特異性下調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶GRP94對人大腸癌細(xì)胞生物學(xué)特性影響的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2003年

10 葉中德;RFP13誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的調(diào)控[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 秦亮;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通過AKT-TSC-mTOR信號通路調(diào)控自噬[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

2 侯麗麗;Bim在黑色素瘤細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)中的異常調(diào)控及作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

3 奚丹;小分子化合物S1誘導(dǎo)B16細(xì)胞凋亡機制的研究[D];吉林大學(xué);2011年

4 姜迪譞;Hrd1在香煙煙霧誘導(dǎo)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用[D];南華大學(xué);2012年

5 崔錚;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)因子Hrd1在糖尿病鼠視網(wǎng)膜的表達(dá)變化[D];華中科技大學(xué);2011年

6 張宇;硫化氫對高肺血流性肺動脈高壓大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的調(diào)節(jié)作用[D];吉林大學(xué);2011年

7 楊海燕;體外循環(huán)下低pH液復(fù)灌對兔缺血再灌注心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與細(xì)胞凋亡的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

8 張薔;ATF6在家族性肌萎縮側(cè)索硬化模型中的表達(dá)變化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

9 孟鳳琴;ATF6在家族性肌萎縮側(cè)索硬化模型hSOD1~(G93A)轉(zhuǎn)基因小鼠脊髓中的表達(dá)變化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

10 朱漢華;冠狀動脈微栓塞致心肌細(xì)胞凋亡及其內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑激活的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2008年

  本文關(guān)鍵詞：Hrd1在香煙煙霧誘導(dǎo)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。