發(fā)布時(shí)間：2017-10-08 03:37

  本文關(guān)鍵詞：基于流式細(xì)胞術(shù)評(píng)估人精子功能的初步研究

  更多相關(guān)文章： 流式細(xì)胞術(shù) 熒光顯微鏡 質(zhì)膜完整 DNA碎片指數(shù) 線粒體活性 頂體完整

【摘要】：目的：通過(guò)對(duì)比流式細(xì)胞儀和熒光顯微鏡兩種檢測(cè)熒光染色的方法,探討流式細(xì)胞儀檢測(cè)人精子質(zhì)膜完整、DNA碎片指數(shù)、線粒體活性和頂體完整的可行性,并探討流式細(xì)胞儀PI/RH123聯(lián)合染色法檢測(cè)精子質(zhì)膜完整和線粒體活性的可行性。方法：選擇2015年9月-11月在廣西醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院生殖醫(yī)療中心門(mén)診就診的不孕夫婦,男方精液常規(guī)分析結(jié)果在WHO第5版正常范圍內(nèi)的精液標(biāo)本共120份,按染色方法隨機(jī)分成A、B兩組,A組：?jiǎn)稳窘M(60份),使用碘化丙啶(PI)染色檢測(cè)精子質(zhì)膜完整、吖啶橙(A0)染色檢測(cè)DNA碎片指數(shù)、羅丹明123(RH123)染色檢測(cè)線粒體活性和異硫氰酸熒光素標(biāo)記的花生凝集素(FITC-PNA)染色檢測(cè)頂體完整。染色后將標(biāo)本隨機(jī)分為A1組和A2組各30份,分別使用流式細(xì)胞儀(FCM)和熒光顯微鏡(MIC)檢測(cè),比較兩組檢測(cè)結(jié)果,評(píng)估流式細(xì)胞儀單染的可行性；B組：PI/RH123雙染組,使用PI單染檢測(cè)精子的質(zhì)膜完整、RH123單染檢測(cè)線粒體活性作為對(duì)照,使用PI/RH123聯(lián)合雙染檢測(cè)精子質(zhì)膜完整與線粒體活性。染色后將標(biāo)本隨機(jī)分為B1組和B2組各30份,分別使用流式細(xì)胞儀(FCM)和熒光顯微鏡(MIC)檢測(cè),比較兩組檢測(cè)結(jié)果,評(píng)估流式細(xì)胞儀PI/RH123雙染的可行性。結(jié)果：1.A1組FCM單染和A2組MIC單染的結(jié)果比較：A1組和A2組檢測(cè)精子質(zhì)膜完整率分別為76.2±9.70%、73.88±8.40%,DNA碎片指數(shù)(DFI)分別為9.89±1O.37%和10.02±7.56%,線粒體活性分別為66.67±19.88%、69.20±9.04%,頂體完整率為80.88±23.56%、83.69±6.70%,A1組和A2組結(jié)果比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；2.B組PI/RH123雙染組的單染和雙染結(jié)果比較：PI、PI/RH123檢測(cè)質(zhì)膜完整的結(jié)果比較,B1組分別為70.08±10.25、69.86±9.80,B2組分別為68.74±9.18、67.84±12.02,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；RH123. PI/RH123檢測(cè)線粒體活性的結(jié)果比較,B1組分別為55.69±12.82、49.39±13.13,B2組分別為57.14±10.47、55.04±9.25,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；3.B1組FCM雙染和B2組MIC雙染的結(jié)果比較：PI/RH123染色結(jié)果PI-/RH123+、PI-/RH123-、PI'/RH123-, B1組分別為49.39±13.13、20.47±10.47、24.67±15.00,B2組分別為49.15±9.62、18.69±13.27、26.27±12.74,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；4.精子質(zhì)膜完整與精子總活力、前向運(yùn)動(dòng)均呈正相關(guān)性,DFI與前向運(yùn)動(dòng)呈負(fù)相關(guān)性,線粒體活性與前向運(yùn)動(dòng)呈正相關(guān)性,p均0.05；5.精子質(zhì)膜完整與線粒體活性正相關(guān)(p0.05),與DFI、頂體完整無(wú)明顯相關(guān)性(P0.05)；DFI與線粒體活性負(fù)相關(guān)(p0.05),與頂體完整無(wú)明顯相關(guān)性(P0.05)。結(jié)論：1.流式細(xì)胞儀單種染色檢測(cè)精子質(zhì)膜完整、DNA碎片指數(shù)、線粒體活性、頂體完整具有可行性,檢測(cè)效率高；2.利用流式細(xì)胞儀PI/RH123聯(lián)合染色同時(shí)檢測(cè)精子質(zhì)膜完整與線粒體活性具有可行性,檢測(cè)效率高。
【關(guān)鍵詞】：流式細(xì)胞術(shù) 熒光顯微鏡 質(zhì)膜完整 DNA碎片指數(shù) 線粒體活性 頂體完整
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R714.8
【目錄】：

• 個(gè)人簡(jiǎn)歷3-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 1、前言10-14
• 2、資料與方法14-21
• 3、結(jié)果21-26
• 4、討論26-33
• 5、結(jié)論33-34
• 6、參考文獻(xiàn)34-38
• 綜述38-50
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 附錄：英文縮略詞50-51
• 致謝51

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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