本文關(guān)鍵詞：甜菜堿對孕前灌酒雌鼠早期植入前胚胎H3K9乙�；降挠绊�

  更多相關(guān)文章： 酒精攝入 甜菜堿 雌鼠 植入前胚胎 H3K9乙�；�

【摘要】：胚胎發(fā)育受環(huán)境影響表現(xiàn)在妊娠過程中的任何環(huán)節(jié),包括配子形成、胚胎發(fā)育、胎兒成熟等各種時(shí)期。女性長期過度飲酒,其后代會(huì)出現(xiàn)發(fā)育遲緩,身體畸形及精神行為異常等病癥的幾率大大增加。本實(shí)驗(yàn)采用體內(nèi)沖胚法及體外胚胎培養(yǎng)技術(shù)獲取各組卵母細(xì)胞及各期植入前胚胎,并使用亮甲酚藍(lán)染色法及免疫熒光技術(shù)對各組卵母細(xì)胞活性和早期植入前胚胎H3K9乙酰化水平進(jìn)行研究。同時(shí)也對各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝臟及血清中的丙二醛(MDA)含量進(jìn)行測定,以期為研究“胎兒酒精綜合癥"(FASD)的發(fā)病機(jī)理及人類優(yōu)生優(yōu)育提供一定的借鑒和參考。實(shí)驗(yàn)分組如下：對照組,攝入等劑量生理鹽水；灌酒組Ⅰ,攝入20%酒精；甜菜堿組Ⅰ,攝入20%酒精+甜菜堿；灌酒組Ⅱ,攝入40%酒精；甜菜堿組Ⅱ,攝入40%酒精+甜菜堿。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.甜菜堿組血清中的MDA含量低于灌酒組,高于對照組,且灌酒組ⅡMDA含量高于灌酒組Ⅰ,均差異顯著(P0.05)；2.用26umol/1的亮甲酚藍(lán)對雌鼠未成熟卵母細(xì)胞染色后,結(jié)果顯示,與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組小鼠未成熟卵母細(xì)胞G6PD活性降低,同時(shí)灌酒組下降幅度略高于甜菜堿組,差異不顯著；3.各組MII期卵母細(xì)胞均未檢測到H3K9乙�；g接免疫熒光：體內(nèi)灌酒組Ⅰ在桑葚胚期H3K9乙�；礁哂趯φ战M,囊胚期結(jié)果則相反；體外灌酒組Ⅰ各期胚胎H3K9乙�；脚c對照組相比無明顯差異,且兩組各胚胎期H3K9乙酰化水平變化趨勢基本相同；灌酒組Ⅱ植入前胚胎H3K9乙�；脚c灌酒組Ⅰ相比,變化較大；甜菜堿對20%灌酒雌鼠早期植入前胚胎H3K9乙�；礁深A(yù)程度較大,其體內(nèi)、外大多數(shù)胚胎期的H3K9乙�；骄档土�。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：1.丙二醛是脂質(zhì)過氧化的中間產(chǎn)物,該指標(biāo)能反映外源因子對機(jī)體的氧化損傷程度。灌酒組肝臟及血清中MDA含量上升,說明雌鼠長期過量飲酒可能會(huì)導(dǎo)致機(jī)體氧化還原系統(tǒng)失衡,肝臟及血清系統(tǒng)均受到了不同程度的氧化損傷；甜菜堿組小鼠肝臟和血清中MDA含量降低,說明甜菜堿緩解了酒精在機(jī)體內(nèi)造成的的氧化應(yīng)激,具有明顯的抗氧化功能,但血清中甜菜堿組MDA含量均顯著低于對照組；2.孕前雌鼠酒精攝入后其未成熟卵母細(xì)胞的G6PD活性降低了,且酒精濃度越大,活性越低,這可能與女性過度飲酒對生殖細(xì)胞產(chǎn)生了不利影響有關(guān)；甜菜堿可提高孕前酒精攝入雌鼠未成熟卵母細(xì)胞G6PD的活性；3.酒精對雌鼠早期植入前胚胎H3K9乙�；降挠绊懹袆┝恳蕾囆�,酒精濃度越高,影響越大。甜菜堿可在一定程度上緩解酒精對雌鼠早期植入前胚胎H3K9乙�；降挠绊�；該研究或可為揭示雌鼠酒精攝入對胚胎發(fā)育的影響提供一些參考數(shù)據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：酒精攝入 甜菜堿 雌鼠 植入前胚胎 H3K9乙�；�
【學(xué)位授予單位】：安徽大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R714.2
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 文獻(xiàn)綜述9-17
• 1 酒精的毒理及其與哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育的關(guān)系9-11
• 1.1 酒精的毒理9-10
• 1.2 酒精代謝與胚胎發(fā)育10-11
• 2 甜菜堿的生物學(xué)功能及其與酒精代謝的關(guān)系11-13
• 2.1 甜菜堿的生物學(xué)功能11-12
• 2.2 甜菜堿與酒精代謝12-13
• 3 表觀遺傳修飾及其作用機(jī)制13-14
• 4 組蛋白乙�；c胚胎發(fā)育的關(guān)系14-15
• 4.1 組蛋白乙�；淖饔脵C(jī)制14-15
• 4.2 組蛋白乙�；c胚胎發(fā)育15
• 5 本課題組研究現(xiàn)狀15-17
• 第二章 甜菜堿對孕前灌酒雌鼠肝臟及血清MDA含量的影響17-25
• 引言17-18
• 1 實(shí)驗(yàn)材料與方法18-22
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料18-19
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物18
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)藥品及耗材18-19
• 1.2 試劑配制19
• 1.2.1 0.01%考馬斯亮藍(lán),4.7%乙醇,8.5%磷酸溶液的配制19
• 1.2.2 1mg/ml BSA溶液的配制19
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法19-22
• 1.3.1 動(dòng)物分組及模型制作19-20
• 1.3.2 雌鼠10%肝臟組織勻漿和血清的制備20
• 1.3.3 考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白質(zhì)含量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線20-21
• 1.3.4 MDA(丙二醛)試劑盒的操作步驟21-22
• 2 結(jié)果與結(jié)論22-24
• 2.1 甜菜堿對孕前不同濃度酒精攝入雌鼠體重的影響22-23
• 2.2 各處理組雌鼠肝臟組織勻漿及血清中MDA含量的測定結(jié)果23-24
• 3 小結(jié)24-25
• 第三章 甜菜堿對孕前灌酒雌鼠卵母細(xì)胞活性的影響25-34
• 引言25-26
• 1 實(shí)驗(yàn)材料與方法26-30
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料26-28
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物26
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)藥品及耗材26-28
• 1.1.3 儀器設(shè)備28
• 1.2 試劑配制28-29
• 1.2.1 雌鼠超排激素的配制28
• 1.2.2 體外操作液hCZB的配制28-29
• 1.2.3 26umol/L BCB染色液的配制29
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法29-30
• 1.3.1 動(dòng)物模型及分組29
• 1.3.2 雌鼠未成熟卵母細(xì)胞的收集29-30
• 1.3.3 未成熟卵母細(xì)胞的BCB染色步驟30
• 2 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析30
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-32
• 3.1 雌鼠對照組未成熟卵與MII期卵母細(xì)胞BCB染色結(jié)果30-31
• 3.2 雌鼠各組未成熟卵母細(xì)胞BCB染色結(jié)果31-32
• 4 小結(jié)32-34
• 第四章 甜菜堿對孕前灌酒雌鼠植入前胚胎H3K9乙�；降挠绊�34-51
• 引言34-35
• 1 實(shí)驗(yàn)材料與方法35-41
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料35-37
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物35
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)藥品及耗材35-37
• 1.1.3 儀器設(shè)備37
• 1.2 試劑配制37-39
• 1.2.1 雌鼠超排激素的配制37
• 1.2.2 胚胎操作液hCZB的配制37
• 1.2.3 植入前胚胎體外培養(yǎng)液G~-(CZB)/G~+的配制37-38
• 1.2.4 磷酸緩沖液PBS的配制38
• 1.2.5 免疫組化試劑配制38-39
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法39-41
• 1.3.1 動(dòng)物分組及模型制作39
• 1.3.2 實(shí)驗(yàn)組及對照組MII期卵母細(xì)胞的收集39-40
• 1.3.3 體內(nèi)受精胚胎及體外培養(yǎng)各時(shí)期胚胎的收集40
• 1.3.4 間接免疫熒光檢測H3K9乙�；牟襟E40-41
• 2 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析41
• 3 結(jié)果與分析41-48
• 3.1 雌鼠MII期卵母細(xì)胞H3K9乙�；�41-42
• 3.2 灌酒雌鼠體內(nèi)各時(shí)期植入前胚胎H3K9乙�；降陌攵糠治�42-43
• 3.3 體內(nèi)甜菜堿組及灌酒組各時(shí)期植入前胚胎H3K9乙�；降陌攵糠治�43-44
• 3.4 體內(nèi)甜菜堿組及酒精組各時(shí)期植入前胚胎H3K9乙�；庖邿晒鈭D44-45
• 3.5 灌酒雌鼠體外各時(shí)期植入前胚胎H3K9乙�；降陌攵糠治�45-46
• 3.6 體外甜菜堿組及酒精組各時(shí)期植入前胚胎H3K9乙�；降陌攵糠治�46-47
• 3.7 體外甜菜堿組及酒精組各時(shí)期植入前胚胎H3K9乙�；庖邿晒鈭D47-48
• 4 小結(jié)48-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-60
• 附錄60-62
• 致謝62-63
• 碩士期間發(fā)表論文63-64
• 碩士期間參與科研情況64

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：936481