本文關(guān)鍵詞：胸腺注射供者可溶性抗原在玻璃化凍存人卵巢組織異種移植兔模型中的應(yīng)用探索

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【摘要】：背景：近幾年,罹患腫瘤的女性患者數(shù)量不斷提高,且發(fā)病年齡有年輕化的趨勢。不斷進(jìn)步的治療手段也使得越來越多的年輕腫瘤女性要求保存生育功能。目前,凍存人卵巢組織異種移植已經(jīng)成為保存癌癥女性生育功能的研究熱點(diǎn)。大多數(shù)研究中,是以裸鼠作為卵巢組織異種移植的受體,獲得一定的成果,但是裸鼠與人類的親緣關(guān)系較遠(yuǎn),移植物生長空間有限,且飼養(yǎng)成本高。使用家兔作為移植受體可以豐富現(xiàn)有移植模型,為有需要的女性提供更多選擇余地。以家兔作為受體,想要長期保存卵巢組織,免疫排異反應(yīng)是需要克服的問題。20世紀(jì)80年代以來,國內(nèi)外眾多學(xué)者對(duì)胸腺內(nèi)接種異種抗原誘導(dǎo)移植免疫耐受進(jìn)行了大量的系統(tǒng)研究,該方法首先通過藥物或照射清除受體內(nèi)成熟T細(xì)胞,再通過胸腺內(nèi)注射異種抗原,使得胸腺新形成的T淋巴細(xì)胞經(jīng)過陰性選擇,對(duì)異種抗原產(chǎn)生免疫耐受,因而達(dá)到抗免疫排異反應(yīng)的作用。該方法在嚙齒類動(dòng)物上獲得較為成熟的應(yīng)用。但關(guān)于家兔胸腺注射是否可誘導(dǎo)免疫耐受尚無相關(guān)研究報(bào)道。目的：探索胸腺注射供者可溶性抗原在玻璃化凍存人卵巢組織異種移植兔模型中對(duì)免疫排異反應(yīng)的調(diào)控作用。方法：將新鮮的卵巢組織通過玻璃化凍存的方法進(jìn)行低溫保存至少4周,復(fù)蘇后于3小時(shí)內(nèi)進(jìn)行移植。選擇10只4-6周雌性新西蘭大白兔作為人卵巢組織異種移植的受體,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(n=5)與對(duì)照組(n=5),經(jīng)去勢手術(shù)處理后1周,高能X線全身照射(3Gy)。于照射1周后進(jìn)行胸腺注射供者抗原,處理組每側(cè)胸腺注射0.1ml供者可溶性抗原。對(duì)照組注射0.1ml生理鹽水。注射1周后進(jìn)行玻璃化凍存-復(fù)蘇后的人卵巢組織兔背肌內(nèi)移植。于照射前,照射后1周(胸腺注射前),注射后1周(移植前),移植后1周、3周、5周、7周留取家兔外周血血清檢測家兔雌二醇及IFN-γ和IL-10水平,取新鮮抗凝全血檢測兔外周血中CD4及CD8淋巴細(xì)胞的比例；所有移植物于移植后8周全部回收。8周后記錄卵巢組織回收率及觀察肉眼形態(tài)；回收后移植物HE染色觀察組織形態(tài)及纖維化壞死率。結(jié)果：1、使用卵巢組織玻璃化凍存的方法能較好的保存卵巢組織；2、照射以后,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組IL-10水平顯著升高,實(shí)驗(yàn)組于移植后3周降至照射前水平,對(duì)照組于移植前即將至照射前水平。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組相比IFN-γ無顯著性差異；實(shí)驗(yàn)組CD4+/CD8+比例與移植后3周開始上升,對(duì)照組則于移植后1周開始上升。3、移植后8周回收卵巢組織,實(shí)驗(yàn)組卵巢組織回收率高于對(duì)照組,兩組卵巢組織中均可見大量炎癥細(xì)胞浸潤。實(shí)驗(yàn)組雌激素水平于移植后1周和移植后3周與移植前相比明顯升高,對(duì)照組于移植后1周高于移植前,移植后3周與移植前相比無顯著性差異。結(jié)論：胸腺注射供者可溶性抗原在玻璃化凍存人卵巢組織異種移植兔模型中應(yīng)用,可能延緩免疫排異反應(yīng)發(fā)生的時(shí)間。但本實(shí)驗(yàn)未能獲得長期免疫耐受。
【關(guān)鍵詞】：卵巢組織 玻璃化凍存 異種移植 胸腺注射 可溶性抗原 家兔
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R-332;R714
【目錄】：

• 致謝4-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 中英文縮略詞12-14
• 1 引言14-18
• 2 實(shí)驗(yàn)材料與方法18-29
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-39
• 4 討論39-44
• 5 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 綜述一49-62
• S每嘉南，
  
  本文編號(hào)：880678
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