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土木香內(nèi)酯對(duì)人卵巢癌Skov-3和A2780細(xì)胞的抑制作用

發(fā)布時(shí)間:2017-09-12 16:25

  本文關(guān)鍵詞:土木香內(nèi)酯對(duì)人卵巢癌Skov-3和A2780細(xì)胞的抑制作用


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【摘要】:目的:檢測(cè)AL對(duì)人卵巢癌細(xì)胞A2780、Skov3細(xì)胞增殖、周期、凋亡以及細(xì)胞因子IL-6、IL-8、VEGF分泌的影響,和AL聯(lián)合PTX誘導(dǎo)人卵巢癌細(xì)胞A2780、 Skov3細(xì)胞時(shí)其增殖及細(xì)胞因子分泌的變化,探究AL可能的作用機(jī)理,以及是否能作為PTX化療耐藥的增敏藥物,亦或是用作不能耐受化療患者的輔助治療方法。方法:1.采用ELISA法檢測(cè)AL、PTX單獨(dú)及聯(lián)合誘導(dǎo)A2780、Skov3后細(xì)胞上清液中IL-6、IL-8、VEGF的含量。2.采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)梯度濃度的AL誘導(dǎo)人卵巢癌細(xì)胞24小時(shí)后周期的分布情況,以及固定濃度的AL誘導(dǎo)細(xì)胞15小時(shí)、30小時(shí)后細(xì)胞的凋亡率。3.采用MTT比對(duì)法檢測(cè)AL誘導(dǎo)后人卵巢癌細(xì)胞存活率以及PTX聯(lián)合AL誘導(dǎo)后卵巢癌細(xì)胞的存活率。結(jié)果:1.AL可以減少PTX誘導(dǎo)的Skov3細(xì)胞對(duì)IL-6的分泌而對(duì)A2780細(xì)胞沒(méi)有影響;AL可以減少PTX誘導(dǎo)的Skov3細(xì)胞對(duì)IL-8的分泌而對(duì)A2780細(xì)胞沒(méi)有影響;AL可以減少PTX誘導(dǎo)的A2780和Skov3細(xì)胞對(duì)VEGF的分泌。2.AL的誘導(dǎo)使A2780和Skov3細(xì)胞的G1期細(xì)胞減少,G2/M期細(xì)胞增多。這種周期阻滯作用隨著藥物濃度的增加而加強(qiáng)。3.AL的誘導(dǎo)使A2780和Skov3細(xì)胞的凋亡率增加,這種促凋亡作用隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而加強(qiáng)。4.AL對(duì)人卵巢癌細(xì)胞藥物作用濃度區(qū)間為1μmol/L至100μmol/L。對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用與AL的藥物濃度呈依賴(lài)關(guān)系。隨著AL濃度的升高,細(xì)胞的存活率降低。AL對(duì)PTX誘導(dǎo)的A2780細(xì)胞有增敏作用而對(duì)Skov3細(xì)胞沒(méi)有增敏作用。結(jié)論:1.AL對(duì)PTX誘導(dǎo)的A2780和Skov3細(xì)胞分泌的促炎因子有降調(diào)節(jié)作用。2.AL對(duì)人卵巢癌A2780和Skov3細(xì)胞有明顯的G2/M期阻滯作用,這種周期阻滯作用與紫杉醇類(lèi)似。3.AL對(duì)人卵巢癌A2780和Skov3細(xì)胞有促進(jìn)凋亡的作用。4.AL對(duì)人卵巢癌A2780和Skov3細(xì)胞有生長(zhǎng)抑制作用,對(duì)PTX誘導(dǎo)的A2780細(xì)胞有增敏作用而對(duì)Skov3細(xì)胞沒(méi)有增敏作用。
【關(guān)鍵詞】:卵巢癌 紫杉醇 土木香 土木香內(nèi)酯
【學(xué)位授予單位】:成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R737.31
【目錄】:
  • 中文摘要2-4
  • ABSTRACT4-7
  • 中英文縮寫(xiě)詞匯對(duì)照表7-8
  • 0.1 前言8-14
  • 2.1 材料14-17
  • 2.1.1 細(xì)胞來(lái)源14
  • 2.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑14
  • 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器14-15
  • 2.1.4 主要溶液及其配制方法15-17
  • 2.2 技術(shù)方法路線(xiàn)17-31
  • 2.2.1 實(shí)驗(yàn)流程圖17-19
  • 2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)19
  • 2.2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇19
  • 2.2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)19
  • 2.2.2.3 細(xì)胞傳代19
  • 2.2.3 藥物配制19-20
  • 2.2.4 ELISA檢測(cè)藥物作用后細(xì)胞因子分泌的變化20-22
  • 2.2.4.1 ELISA檢測(cè)藥物作用后IL-6分泌的變化21
  • 2.2.4.2 ELISA檢測(cè)藥物作用后IL-8分泌的變化21
  • 2.2.4.3 ELISA檢測(cè)藥物作用后VEGF分泌的變化21-22
  • 2.2.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)藥物作用后細(xì)胞周期的變化22-24
  • 2.2.5.1 不同濃度的紫杉醇對(duì)人卵巢癌細(xì)胞周期的影響22-23
  • 2.2.5.2 不同濃度的土木香內(nèi)酯對(duì)人卵巢癌細(xì)胞周期的影響23-24
  • 2.2.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)藥物作用后細(xì)胞凋亡的情況24-27
  • 2.2.6.1 固定濃度的紫杉醇作用于人卵巢癌細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率變化24-26
  • 2.2.6.2 固定濃度的土木香內(nèi)酯作用于人卵巢癌細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率變化26-27
  • 2.2.7 MTT比色法27-31
  • 2.2.7.1 對(duì)數(shù)篩選土木香內(nèi)酯對(duì)人卵巢癌細(xì)胞藥物作用濃度區(qū)間27-28
  • 2.2.7.2 梯度濃度的土木香內(nèi)酯對(duì)人卵巢癌細(xì)胞增殖的影響28-29
  • 2.2.7.3 梯度濃度的紫杉醇對(duì)人卵巢癌細(xì)胞增殖的影響29-30
  • 2.2.7.4 固定藥物濃度的土木香內(nèi)酯聯(lián)合不同濃度的紫杉醇對(duì)人卵巢癌細(xì)胞增殖的影響30-31
  • 2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析31
  • 2.3 結(jié)果31-44
  • 2.4 討論44-49
  • 2.5 結(jié)論49-50
  • 2.6 問(wèn)題與展望50-51
  • 致謝51-52
  • 參考文獻(xiàn)52-62
  • 綜述62-65
  • 參考文獻(xiàn)64-65
  • 附件65-66

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