發(fā)布時間：2017-09-04 13:11

  本文關(guān)鍵詞：TALENs介導(dǎo)的Nanog基因表達下調(diào)對宮頸癌HeLa細胞惡性行為的影響

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【摘要】：目的研究Nanog表達下調(diào)對宮頸癌HeLa細胞惡性行為的影響。方法通過基因編輯工具轉(zhuǎn)錄激活樣效應(yīng)器核酸酶(TALENs)介導(dǎo)Nanog下調(diào)表達,基因測序分析Nanog的突變情況;挑取單個細胞培養(yǎng)以篩選出Nanog明顯下調(diào)表達的單克隆HeLa細胞;RT-PCR檢測mRNA表達水平;Western blot檢測蛋白表達水平;HeLa細胞的集落形成能力、侵襲性及耐藥性分別通過集落形成實驗、Transwell侵襲實驗及藥物敏感性實驗檢測。結(jié)果 TALENs成功介導(dǎo)Nanog基因突變并導(dǎo)致其下調(diào)表達,Nanog突變的單克隆HeLa細胞Nanog mRNA和蛋白表達水平較野生型HeLa細胞均下調(diào)表達(P0.05)。Nanog突變單克隆HeLa細胞相對于野生型HeLa細胞表現(xiàn)出明顯減弱的侵襲、集落形成及化療藥物抵抗能力(P0.05)。結(jié)論 Nanog突變減弱HeLa細胞的惡性行為,下調(diào)或沉默Nanog表達有望成為一種新型的治療宮頸癌策略。
【作者單位】： 武漢大學(xué)中南醫(yī)院基因診斷中心;湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院胚胎干細胞研究湖北重點實驗室;湖北醫(yī)藥學(xué)院生化教研室;
【關(guān)鍵詞】： TALENs Nanog HeLa細胞 宮頸癌
【分類號】：R737.33
【正文快照】： 宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一。近年來,隨著早期篩查方法的改進及治療方案的更新,宮頸癌的發(fā)病率及死亡率有一定程度的下降,但在因癌癥死亡的發(fā)展中國家女性中,宮頸癌仍是排名第二的死亡原因[1-3]。研究表明持續(xù)的人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌發(fā)生的起始原因[4]。然而,相，

本文編號：791715