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2014年石家莊地區(qū)圍產(chǎn)期婦女B族鏈球菌的耐藥性及其耐藥基因的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-01 05:14

  本文關(guān)鍵詞:2014年石家莊地區(qū)圍產(chǎn)期婦女B族鏈球菌的耐藥性及其耐藥基因的研究


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【摘要】:目的:1掌握石家莊地區(qū)圍產(chǎn)期婦女B族鏈球菌的耐藥性和流行情況,指導(dǎo)臨床合理用藥。2采用PCR方法對(duì)B族鏈球菌耐藥基因進(jìn)行擴(kuò)增以確定其基因型別,掌握石家莊地區(qū)圍產(chǎn)期婦女B族鏈球菌的分子流行病學(xué)特點(diǎn)。方法:1菌株來(lái)源收集石家莊市第四醫(yī)院2014年1月至2014年12月從妊娠35~37周婦女的陰道分泌物中分離出的不重復(fù)B族鏈球菌菌株。用梅里埃ATB細(xì)菌鑒定儀并結(jié)合CAMP抑制試驗(yàn)進(jìn)行B族鏈球菌菌株鑒定。2鑒定及藥敏試驗(yàn)用梅里埃ATB細(xì)菌鑒定儀并結(jié)合CAMP抑制試驗(yàn)進(jìn)行B族鏈球菌菌株鑒定。藥物敏感試驗(yàn)應(yīng)用K-B紙片法進(jìn)行。以CLSI M100-S23文件(2013版)為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行藥敏結(jié)果判斷。3檢測(cè)細(xì)菌的耐藥基因選取與B族鏈球菌紅霉素耐藥相關(guān)6種耐藥基因。采用PCR技術(shù)進(jìn)行基因擴(kuò)增。在瓊脂糖凝膠中對(duì)擴(kuò)增的基因進(jìn)行電泳分離,置于紫外凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行觀察結(jié)果,以maker為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷,產(chǎn)物大小與目的基因相同為陽(yáng)性,進(jìn)行照相保存其影象。4 DNA測(cè)序分析從耐藥基因陽(yáng)性的mre A、mef A、erm A、erm B和mef E基因中隨機(jī)選取2~4株P(guān)CR產(chǎn)物進(jìn)行DNA測(cè)序,并將測(cè)得的DNA序列與Gen Bank數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),確定其基因亞型以及有無(wú)核苷酸序列的改變。結(jié)果:1 B族鏈球菌的檢出率石家莊市第四醫(yī)院2014年1月至2014年12月,對(duì)妊娠35~37周婦女陰道分泌物共計(jì)3504份標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng),分離出B族鏈球菌96株,檢出率為2.74%。2 B族鏈球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果對(duì)分離出的96株B族鏈球菌進(jìn)行了臨床常用的14種抗菌藥物耐藥性測(cè)定,結(jié)果顯示:(1)頭孢曲松(Ceftriaxone/CRO)、哌拉西林(Piperacillin/PIP)、哌拉西林/他唑巴坦(Piperacillin-Tazobactam/TZP)、頭孢哌酮/舒巴坦(Cefperazone-Sulbactam/SCF)、頭孢孟多(Cefamandole/MA)、頭孢硫脒(Cefathiamidine/CHM)全部敏感。(2)阿莫西林/克拉維酸(Amoxycillin-Clavulanie acid/AMC)、氨芐西林/舒巴坦(Ampicillin-Sulbactam/SAM)、頭孢唑林(Cefazolin/CZ)、頭孢呋辛(Cefuroxime/CXM)、青霉素(Penicillin/P)出現(xiàn)部分耐藥,耐藥率分別為3.13%、2.08%、2.08%、1.04%、1.04%。(3)紅霉素(Erythromycin/E)、克林霉素(Clindamycin/CC)、阿奇霉素(Azithromycin/AZM)均出現(xiàn)了較高的耐藥率,分別為(75/96)78.13%、(72/96)75.00%、(76/96)79.17%。3 B族鏈球菌耐藥基因結(jié)果對(duì)紅霉素耐藥的75株B族鏈球菌進(jìn)行基因檢測(cè),檢測(cè)出耐藥基因mre A、mef A、erm A、erm B和mef E的陽(yáng)性率分別為94.67%,44.00%,2.67%,73.33%,40.00%;沒有檢出erm C耐藥基因。其中不攜帶耐藥基因的有1株(1.33%),攜帶1種耐藥基因的有7株(9.33%),攜帶2種耐藥基因的有35株(46.67%),攜帶3種耐藥基因的有15株(20.00%),攜帶4種耐藥基因的有16株(21.33%),攜帶5種耐藥基因的有1株(1.33%)。4基因測(cè)序的結(jié)果對(duì)五組陽(yáng)性率較高的mre A、mef A、erm A、erm B和mef E基因隨機(jī)選取2~4株進(jìn)行核苷酸序列,經(jīng)與Gene Bank的參考基因序列對(duì)比顯示同源性為100%,沒有發(fā)生基因突變。結(jié)論:1 2014年石家莊地區(qū)圍產(chǎn)期婦女陰道分泌物B族鏈球菌檢出率為2.74%,存在較高的紅霉素、克林霉素和阿奇霉素的耐藥現(xiàn)象。2檢出的B族鏈球菌耐藥基因陽(yáng)性率從高到低依次為mre A、erm B、mef A、mef E和erm A型。3 mre A、mef A、erm A、erm B和mef E五種耐藥基因與Gene Bank的參考株核苷酸序列同源性為100%,沒有發(fā)生基因突變。4醫(yī)院應(yīng)加強(qiáng)B族鏈球菌的耐藥性及耐藥基因的監(jiān)測(cè),指導(dǎo)臨床更加科學(xué)、有效的使用抗菌藥物。
【關(guān)鍵詞】:圍產(chǎn)期婦女 B族鏈球菌 紅霉素 克林霉素 阿奇霉素 耐藥基因
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R446.5;R714.7
【目錄】:
  • 中文摘要4-7
  • 英文摘要7-10
  • 英文縮寫10-11
  • 前言11-12
  • 材料與方法12-17
  • 結(jié)果17-19
  • 附圖19-26
  • 附表26-28
  • 討論28-31
  • 結(jié)論31
  • 參考文獻(xiàn)31-35
  • 綜述 B族鏈球菌感染及耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展35-43
  • 參考文獻(xiàn)39-43
  • 致謝43-44
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷44

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 李曉云;東北地區(qū)豬鏈球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥機(jī)制研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

2 趙佳苗;大環(huán)內(nèi)酯類阿奇霉素及其關(guān)鍵中間體的合成工藝研究[D];浙江工業(yè)大學(xué);2009年

3 楊靜;通過PCR列陣技術(shù)檢測(cè)新生兒B族鏈球菌感染[D];蘭州大學(xué);2013年

4 楊旭峰;無(wú)乳鏈球菌和化膿性鏈球菌對(duì)氟喹諾酮類抗生素的耐藥性及耐藥機(jī)制的研究[D];浙江大學(xué);2013年

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本文編號(hào):770146

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