本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子增強(qiáng)激活子結(jié)合蛋白-4對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞惡性增殖的影響

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【摘要】：目的利用體外細(xì)胞模型,研究轉(zhuǎn)錄因子增強(qiáng)激活子結(jié)合蛋白-4(TFAP4)對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞惡性增殖的影響及探討其可能的作用機(jī)制。方法利用小干擾RNA技術(shù)沉默子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞(HEC-1-A和RL95-2)內(nèi)源性增強(qiáng)激活子結(jié)合蛋白-4(AP-4)的表達(dá)后,通過平板克隆及軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞單克隆形成及非錨定生長(zhǎng)能力的變化。利用碘化吡啶染色流式細(xì)胞術(shù)分析腫瘤細(xì)胞周期的變化,并利用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)CDKN1A的轉(zhuǎn)錄水平。利用生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)CDKN1A的啟動(dòng)子區(qū)域內(nèi)是否存在AP-4及鋅指蛋白Pokemon的結(jié)合位點(diǎn),進(jìn)一步利用染色體免疫共沉淀技術(shù)驗(yàn)證AP-4及Pokemon是否共同結(jié)合到CDKN1A的啟動(dòng)子區(qū)域。每次實(shí)驗(yàn)設(shè)3個(gè)復(fù)孔,每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次以上,兩組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn),多組間數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析,檢驗(yàn)水平α=0.05。結(jié)果沉默內(nèi)源性AP-4的表達(dá)后,兩種子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞(HEC-1-A和RL95-2)的克隆形成能力降為0.38倍至0.55倍,軟瓊脂克隆形成能力降為0.21倍至0.27倍。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),沉默內(nèi)源性AP-4的表達(dá)能誘導(dǎo)兩種子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞發(fā)生G0/G1期阻滯并增加CDKN1A的轉(zhuǎn)錄水平為7.34倍至9.22倍。公共數(shù)據(jù)庫(kù)分析顯示,CDKN1A的啟動(dòng)子區(qū)域內(nèi)存在AP-4及Pokemon相鄰的結(jié)合位點(diǎn),沉默內(nèi)源性AP-4后能同時(shí)降低AP-4及Pokemon與CDKN1A的啟動(dòng)子區(qū)域的結(jié)合,其中AP-4的富集率降至0.07倍至0.21倍,Pokemon的富集率降至0.04倍至0.18倍。結(jié)論沉默內(nèi)源性AP-4能在體外模型中,抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的惡性增殖,其機(jī)制可能與破壞了AP-4/Pokemon轉(zhuǎn)錄復(fù)合物對(duì)CDKN1A的轉(zhuǎn)錄抑制,從而阻抑了腫瘤細(xì)胞的周期運(yùn)行。
【作者單位】： 中山市小欖人民醫(yī)院病理科;中山市小欖人民醫(yī)院普外科;中山市小欖人民醫(yī)院藥劑科;江門市中心醫(yī)院病理科;廣東醫(yī)科大學(xué)廣東省醫(yī)學(xué)分子診斷重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;廣東醫(yī)科大學(xué)東莞科研中心;
【關(guān)鍵詞】： 轉(zhuǎn)錄因子AP- 子宮內(nèi)膜腫瘤 鋅指蛋白Pokemon 惡性增殖
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81272434,81500007) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014A020212298) 中山市科技局基金項(xiàng)目(2015B1022)
【分類號(hào)】：R737.33
【正文快照】： 子宮內(nèi)膜癌(endometrial carcinoma)是女性生殖道三大惡性腫瘤之一,2012年的全球發(fā)病率為10.1例/10萬人,病死率為1.9例/10萬人;其中發(fā)達(dá)國(guó)家發(fā)病率(14.7例/10萬人)及病死率(2.3例/10萬人)均高于發(fā)展中國(guó)家的發(fā)病率(5.5例/10萬人)及病死率(1.5例/10萬人)[1];且近十年內(nèi)歐美等發(fā)

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 ;同一靶點(diǎn)對(duì)不同Cyclooxygenase-2蛋白表達(dá)水平肺癌細(xì)胞惡性增殖的影響(英文)[J];Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2010年03期

2 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 古麗娟;徐根波;許曉華;虞瑛姿;梁云;張曉紅;趙小英;徐榮臻;;Shp-2在p210bcr/abl介導(dǎo)的白血病細(xì)胞惡性增殖中作用的研究[A];2005年華東六省一市血液病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省血液病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 上海中醫(yī)藥大學(xué) 方肇勤 梁超 任紅艷;肝癌常用治法復(fù)方抑制肝癌細(xì)胞惡性增殖的機(jī)制[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2012年

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本文編號(hào)：752205