本文關鍵詞：胎盤特異性蛋白-1對滋養(yǎng)細胞的影響

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【摘要】：背景：滋養(yǎng)細胞在胚胎發(fā)育和著床、誘導妊娠免疫耐受、維持正常妊娠以及胎兒生長、發(fā)育和成熟等胚胎、胎兒各個生命階段發(fā)揮至關重要的生理作用,其功能異常影響胚胎發(fā)育和著床、胎盤發(fā)育與功能以及胎兒生長,因此,與妊娠失敗、自然流產、子癇前期(preeclampsia)等妊娠并發(fā)癥的發(fā)病密切有關。滋養(yǎng)細胞功能以及胎盤發(fā)育和功能受滋養(yǎng)細胞基因精細而復雜的調控,其中管家基因和胎盤特異性基因的作用尤為重要。胎盤特異性蛋白-1(placenta-specific protein 1, PLAC1)特異性表達于胎盤。妊娠8周起,在孕婦外周血中可檢測到循環(huán)PLAC1 mRNA,并且在妊娠22-40周胎盤PLAC1表達水平沒有顯著變化；在妊娠終止時,PLAC1 mRNA卻快速廓清。另外和正常妊娠者相比,先兆流產孕婦外周血游離PLAC1 mRNA顯著降低,而子癇前期患者外周血PLAC1 mRNA顯著增高,同時敲除PLAC1的小鼠會引起胎兒畸形、巨大胎盤和胎兒生長受限。我們在先前研究中也同樣發(fā)現(xiàn)子癇前期患者胎盤PLAC1的表達明顯高于正常妊娠者,這些都提示PLAC1對維持胎盤、胎兒正常發(fā)育是必需的。目的：明確PLAC1是否參與調控滋養(yǎng)細胞的生物學功能,通過調控滋養(yǎng)細胞PLAC1表達,明確PLAC1對滋養(yǎng)細胞增殖、遷移、侵襲等重要細胞功能的調控效應,探索PLAC1在胚胎發(fā)育、胎盤發(fā)育與功能以及胎兒生長中可能的作用。方法：1. SWAN-71細胞、JAR細胞培養(yǎng)、傳代后,運用Western blot檢測滋養(yǎng)細胞SWAN-71和JAR中PLAC1蛋白的表達。2.滋養(yǎng)細胞SWAN-71和JAR培養(yǎng)和傳代后,siRNA干擾PLAC1基因,利用CCK-8方法檢測細胞的增殖能力,Transwell檢測細胞侵襲力,劃痕試驗檢測細胞遷移能力。結果：1. Western blot顯示SWAN-71和JAR細胞表達PLACl。2. siRNA靶向干擾后,SWAN-71細胞JAR細胞表達PLAC1均顯著性下降。3. siRNA靶向干擾顯著抑制了SWAN-71細胞和JAR細胞的增殖、侵襲和遷移(P均0.001)。結論：PLAC1表達于滋養(yǎng)細胞,抑制PLAC1表達可抑制滋養(yǎng)細胞增殖、遷移和侵襲,提示PLAC1參與調控滋養(yǎng)細胞的生物學功能。
【關鍵詞】：PLAC1 SWAN-71細胞 JAR細胞 細胞生物學活性
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R714
【目錄】：

• 致謝5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 縮略詞表11-14
• 1 引言14-16
• 2 材料和方法16-30
• 2.1 研究對象16
• 2.2 細胞培養(yǎng)16-18
• 2.3 靶向性siRNA干擾PLAC1表達18-20
• 2.4 Western blot檢測蛋白表達20-26
• 2.5 CCK-8法檢測細胞增殖26-27
• 2.6 細胞劃痕實驗27-28
• 2.7 細胞侵襲實驗28-29
• 2.8 統(tǒng)計學處理29-30
• 3 結果30-37
• 3.1 人滋養(yǎng)細胞表達PLAC130-31
• 3.2 PLAC1對滋養(yǎng)細胞增殖的影響31-33
• 3.3 PLAC1對滋養(yǎng)細胞遷移的影響33-35
• 3.4 PLAC1對滋養(yǎng)細胞侵襲力的影響35-37
• 4 討論37-40
• 5 結論40-41
• 參考文獻41-47
• 綜述47-61
• 參考文獻54-61
• 作者簡歷及在學期間所取得的科研成果61

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本文編號：744066