本文關(guān)鍵詞：土槿乙酸對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞凋亡、轉(zhuǎn)移的影響及其機制

  更多相關(guān)文章： 子宮內(nèi)膜癌 Ishikawa細胞 土槿乙酸 凋亡 轉(zhuǎn)移 機制

【摘要】：子宮內(nèi)膜癌是一種常見的生殖道惡性疾病,嚴重威脅女性的身體健康。子宮內(nèi)膜癌約占女性生殖道惡性腫瘤的20%～30%,其發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈明顯上升趨勢。約有28%的子宮內(nèi)膜癌患者在確診時已經(jīng)發(fā)生局部或遠距離轉(zhuǎn)移。傳統(tǒng)化療藥物毒副反應(yīng)較大,對正常細胞也有很強的殺傷作用,尤其是晚期以及復(fù)發(fā)性的的子宮內(nèi)膜癌患者的治療十分棘手。因此,臨床上亟需尋找一種毒副作用小,且可抑制腫瘤遠端轉(zhuǎn)移的治療藥物。土荊皮是松科植物金錢松(Pseudolarix kaempferi Gord)的干燥根皮或近根樹皮,其性溫、味辛、歸肺、脾經(jīng),氣微,味苦而澀,有毒,具有殺蟲止癢的功效,常用于治療癬癥。土槿乙酸(Pseudolaric acid B, PAB)是從土荊皮中提取的主要成分之一,為二萜酸化合物,分子式為C23H28O8,具有較強的細胞毒作用。實驗方法：1.土槿乙酸誘導(dǎo)人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞凋亡的研究。采用常規(guī)方法培養(yǎng)Ishikawa細胞,觀察給藥后的Ishikawa細胞形態(tài)學(xué)變化；采用MTT實驗檢測不同濃度和不同給藥時間土槿乙酸對Ishikawa細胞增殖的影響并計算IC50值；流式細胞分析術(shù)檢測不同濃度和不同作用時間土槿乙酸對Ishikawa細胞的周期、凋亡情況的影響。2.土槿乙酸抑制人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞轉(zhuǎn)移的研究。采用平板克隆方法檢測不同濃度的土槿乙酸對Ishikawa細胞形成克隆能力的影響；劃痕愈合方法檢測不同濃度不同時間土槿乙酸作用于Ishikawa細胞后對細胞劃痕愈合能力的影響；Transwell培養(yǎng)方法檢測不同濃度土槿乙酸對Ishikawa細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。3.土槿乙酸誘導(dǎo)人子宮內(nèi)膜細胞Ishikawa凋亡及抑制其轉(zhuǎn)移的分子機制。采用Western-Blotting方法在蛋白水平檢測不同濃度土槿乙酸作用不同作用時間后,Ishikawa細胞增值信號通路關(guān)鍵蛋白ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白VEGF、MMP9及E-cad等表達情況的變化。實驗結(jié)果：1.不同濃度、不同作用時間PAB處理人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞后對細胞增殖有顯著影響,PAB對Ishikawa細胞的IC50值為19.332μM; PAB能夠體外誘導(dǎo)Ishikawa細胞發(fā)生細胞周期G2/M期阻滯從而促進細胞凋亡。2.不同濃度的PAB作用于Ishikawa細胞后,劃痕實驗結(jié)果顯示PAB能夠明顯抑制細胞遷移；Transwell培養(yǎng)侵襲實驗結(jié)果顯示,PAB顯著降低Ishikawa細胞穿膜的個數(shù)；平板克隆結(jié)果顯示PAB作用于Ishikawa細胞后,顯著降低克隆形成率。3.不同濃度的PAB作用于Ishikawa細胞后,蛋白水平上p-ERKl/2與總ERK1/2的比值降低,VEGF、MMP9蛋白表達下調(diào),E-cad蛋白表達上調(diào)。結(jié)論：1.土槿乙酸可以誘導(dǎo)人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞凋亡。2.土槿乙酸可以抑制人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞轉(zhuǎn)移。3.土槿乙酸通過影響細胞增殖信號通路的關(guān)鍵分子MAPK及轉(zhuǎn)移相關(guān)基因蛋白MMP9、E-cad、VEGF的表達發(fā)揮作用。
【關(guān)鍵詞】：子宮內(nèi)膜癌 Ishikawa細胞 土槿乙酸 凋亡 轉(zhuǎn)移 機制
【學(xué)位授予單位】：遼寧大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-14
• 引言14-19
• 0.1 子宮內(nèi)膜癌14-17
• 0.1.1 子宮內(nèi)膜癌流行現(xiàn)狀14-15
• 0.1.2 子宮內(nèi)膜癌病理現(xiàn)狀15
• 0.1.3 子宮內(nèi)膜癌治療進展15-17
• 0.2 土槿乙酸簡介17-18
• 0.3 本課題的設(shè)計思想及研究內(nèi)容18-19
• 第1章 土槿乙酸誘導(dǎo)人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞凋亡的研究19-34
• 1.1 材料與儀器19-21
• 1.1.1 實驗材料19
• 1.1.2 實驗試劑19-20
• 1.1.3 實驗儀器20-21
• 1.2 實驗方法21-25
• 1.2.1 細胞培養(yǎng)21-22
• 1.2.2 MTT比色法檢測不同濃度及不同作用時間土槿乙酸對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞增殖的影響22-23
• 1.2.3 FCM檢測不同濃度及不同作用時間土槿乙酸對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞周期的影響23-24
• 1.2.4 FCM檢測不同濃度及不同作用時間土槿乙酸對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞凋亡的影響24-25
• 1.3 實驗結(jié)果25-31
• 1.3.1 土槿乙酸對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞形態(tài)的影響25
• 1.3.2 MTT法檢測土槿乙酸對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞增殖的影響25-27
• 1.3.3 FCM檢測不同濃度及不同作用時間土槿乙酸對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞凋亡的影響27-29
• 1.3.4 FCM檢測不同濃度及不同作用時間土槿乙酸對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞周期的影響29-31
• 1.4 討論31-32
• 1.5 小結(jié)32-34
• 第2章 土槿乙酸抑制人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞轉(zhuǎn)移的研究34-48
• 2.1 材料與儀器34-35
• 2.1.1 實驗材料34
• 2.1.2 實驗試劑34-35
• 2.1.3 實驗儀器35
• 2.2 實驗方法35-38
• 2.2.1 細胞培養(yǎng)35
• 2.2.2 粘附實驗檢測不同濃度土槿乙酸作用后對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞粘附能力的影響35-36
• 2.2.3 劃痕實驗檢測不同濃度土槿乙酸作用后對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞遷移能力的影響36-37
• 2.2.4 Transwell方法檢測不同作用濃度土槿乙酸作用后對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞侵襲能力的影響37
• 2.2.5 平板克隆方法檢測不同作用濃度土槿乙酸作用后對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞克隆形成能力的影響37-38
• 2.3 實驗結(jié)果38-46
• 2.3.1 粘附實驗檢測土槿乙酸對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞粘附能力的影響38-39
• 2.3.2 劃痕實驗檢測不同濃度土槿乙酸作用后對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞遷移能力的影響39-42
• 2.3.3 Transwell方法檢測不同作用濃度土槿乙酸作用后對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞侵襲能力的影響42-44
• 2.3.4 平板克隆方法檢測不同作用濃度土槿乙酸作用后對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞克隆形成能力的影響44-46
• 2.4 討論46-47
• 2.5 小結(jié)47-48
• 第3章 土槿乙酸誘導(dǎo)人子宮內(nèi)膜細胞Ishikawa凋亡及抑制其轉(zhuǎn)移的分子機制48-60
• 3.1 材料與方法48-50
• 3.1.1 實驗材料48-49
• 3.1.2 實驗試劑49
• 3.1.3 實驗儀器49-50
• 3.2 實驗方法50-53
• 3.2.1 細胞培養(yǎng)50
• 3.2.2 Western blot檢測土槿乙酸作用后人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞中蛋白表達的變化50-53
• 3.3 實驗結(jié)果53-56
• 3.3.1 Western blot法檢測土槿乙酸作用后人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞中相關(guān)蛋白表達的變化53-56
• 3.4 討論56-58
• 3.4.1 PAB誘導(dǎo)人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞凋亡信號通路的研究信號56-57
• 3.4.2 PAB抑制人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞轉(zhuǎn)移信號通路的研究信號57-58
• 3.5 小結(jié)58-60
• 第4章 結(jié)論與展望60-62
• 4.1 結(jié)論60-61
• 4.2 進一步工作的方向61-62
• 致謝62-63
• 參考文獻63-69
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及參加科研情況69

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王丹;辛彥;肖玉平;;土槿乙酸抗腫瘤作用研究進展[J];腫瘤防治研究;2013年03期

2 郭建新;劉育;辛立民;陳虹;徐鑫;;土槿乙酸的氫化還原及活性中心的初步探討[J];天津藥學(xué);2006年04期

3 陳虹;史麗麗;王火;徐鑫;白淑芳;陳虹;;土槿乙酸衍生物的合成及其抗腫瘤活性[J];天津藥學(xué);2006年06期

4 劉育;徐鑫;陳虹;柯穎;白淑芳;;土槿乙酸衍生物的合成及其抗腫瘤活性研究[J];武警醫(yī)學(xué);2007年09期

5 董小青;葛新;陳虹;李靈芝;;土槿乙酸衍生物抗真菌活性研究[J];武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2008年05期

6 葛新;劉麗英;王輝;陳虹;董小青;;土槿乙酸體外抗(抑)菌作用的研究[J];中國消毒學(xué)雜志;2011年05期

7 姜大娥;張曉雷;葛新;;土槿乙酸對葡萄球菌生物膜形成的抑制作用[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2012年05期

8 孟愛國;劉春艷;;土槿乙酸對不同人腫瘤細胞系的抑制作用及機制[J];山東醫(yī)藥;2010年47期

9 孟愛國;劉春燕;石峻;殷華;趙建;;土槿乙酸對肝癌細胞生長的影響及其機制研究[J];中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2007年09期

10 姜孟臣,陳虹,張敏,陳莉,徐鑫,李靈芝;土槿乙酸對人HT1080細胞系增殖抑制的體外研究[J];天津藥學(xué);2002年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 王丹;辛彥;肖玉平;;土槿乙酸誘導(dǎo)人胃癌BGC-823細胞凋亡及抑制轉(zhuǎn)移機制的研究[A];第9屆全國胃癌學(xué)術(shù)會議暨第二屆陽光長城腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2014年

2 閆志敏;華紅;徐巖英;;抗念珠菌中藥成分的篩選及機理初步研究[A];第七屆全國口腔黏膜病暨第五屆口腔中西醫(yī)結(jié)合大會論文匯編[C];2008年

3 劉斌;陳虹;魏路清;王火;;土槿乙酸(PLAB)的抗腫瘤作用及其作用機制研究[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孟愛國;土槿乙酸抗腫瘤作用機制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李宵;土槿乙酸改善ApoE基因敲除小鼠動脈粥樣硬化的實驗研究：循環(huán)及斑塊內(nèi)單核吞噬細胞的變化及其潛在機制[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué)(原名：甘肅中醫(yī)學(xué)院);2015年

2 田艷秋;土槿乙酸對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞凋亡、轉(zhuǎn)移的影響及其機制[D];遼寧大學(xué);2016年

3 劉斌;土槿乙酸的抗腫瘤作用及其作用機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

4 徐鑫;土槿乙酸衍生物的合成[D];沈陽藥科大學(xué);2003年

5 梅昕;土槿乙酸對小鼠變應(yīng)性接觸性皮炎的作用及其機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

6 史莉莉;土槿乙酸衍生物的設(shè)計合成及誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡和抗真菌活性構(gòu)效關(guān)系研究[D];沈陽藥科大學(xué);2004年

7 劉育;土槿乙酸衍生物和MS-275及其衍生物的合成及其抗腫瘤活性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2006年

8 熊斌;土槿乙酸衍生物PAB-D1的抗腫瘤作用及其作用機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

9 王輝;土槿乙酸衍生物PB-LY的抗腫瘤作用及其作用機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2007年

10 祝平;土槿乙酸對人肝癌細胞中VEGF和HIF-1α表達的影響[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2014年

，

本文編號：651408