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miR-155對卵巢癌SKOV3細(xì)胞株增殖和凋亡的影響

發(fā)布時間:2017-07-30 03:18

  本文關(guān)鍵詞:miR-155對卵巢癌SKOV3細(xì)胞株增殖和凋亡的影響


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【摘要】:目的:腫瘤嚴(yán)重威脅著人類的生命健康,卵巢癌是目前為止發(fā)現(xiàn)的女性生殖系統(tǒng)腫瘤最常見的惡性腫瘤之一[1],嚴(yán)重威脅著女性的健康和生命,然而由于卵巢癌發(fā)病隱匿,發(fā)現(xiàn)時多為晚期,同時由于沒有特異的檢測指標(biāo),為治療及判斷預(yù)后造成了難題。近幾年來miRNA在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用已成為研究熱點(diǎn),越來越多的研究表明miRNA與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過程密切相關(guān),參與調(diào)控腫瘤細(xì)胞的凋亡、增殖、遷移等生物學(xué)行為,發(fā)揮著類似癌基因或抑癌基因的作用[2-4],本研究采用細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、流式細(xì)胞學(xué)、實(shí)時熒光定量PCR、Western blot等方法檢測miR-155和caspase3在卵巢癌SKOV3細(xì)胞株中的表達(dá)情況,探討miR-155在卵巢癌細(xì)胞株SKOV3中的表達(dá)情況及其對caspase3表達(dá)水平的調(diào)節(jié)作用,為卵巢癌基因治療提供理論基礎(chǔ),同時為卵巢癌的早期診斷和后續(xù)基因治療提供新的視角。方法:1培養(yǎng)卵巢癌SKOV3細(xì)胞株。2實(shí)驗(yàn)分組:實(shí)驗(yàn)組即應(yīng)用Hieff Trans脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染miR-155的過表達(dá)質(zhì)粒;陰性對照組即應(yīng)用Hieff Trans脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染無miR-155的質(zhì)粒;脂質(zhì)體試劑對照組即轉(zhuǎn)染Hieff Trans脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑組;空白對照組即不轉(zhuǎn)染組。3應(yīng)用MTT法檢測各組卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖情況。4應(yīng)用Annexin APC/7ADD雙染法檢測各組卵巢癌SKOV3細(xì)胞凋亡情況。5采用實(shí)時熒光定量PCR法檢測各組卵巢癌SKOV3細(xì)胞中miR-155的表達(dá)情況。6 Western blot法檢測各組卵巢癌SKOV3細(xì)胞中caspase3蛋白表達(dá)的情況。7用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)方式表示,多組間均數(shù)比較采用方差分析、兩組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn),若方差不齊采用秩和檢驗(yàn),P0.05為該數(shù)據(jù)由統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1 MTT法檢測各組細(xì)胞增殖情況:0、24、48小時,實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組、空白對照組、脂質(zhì)體對照組相比細(xì)胞增殖速度相似,統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異;72小時,實(shí)驗(yàn)組與其它三組相比細(xì)胞增殖速度明顯減慢,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著差異。2 Annexin APC/7ADD雙染法檢各組細(xì)胞凋亡情況:細(xì)胞轉(zhuǎn)染72小時后,實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組、脂質(zhì)體對照組及空白對照組相比細(xì)胞早期凋亡率明顯升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P0.05);晚期凋亡率各組間無顯著差異(P0.05)。3實(shí)時熒光定量PCR法檢測各組細(xì)胞miR-155表達(dá)情況:實(shí)驗(yàn)組miR-155的表達(dá)量與其它各對照組相比明顯升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P0.05)。4 Western blot法檢測各組細(xì)胞caspase3蛋白表達(dá)情況:實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組、空白對照組及脂質(zhì)體對照組相比caspase3蛋白表達(dá)明顯升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:1 miR-155可抑制卵巢癌細(xì)胞增殖。2說明miR-155能促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的凋亡。3在卵巢癌細(xì)胞中miR-155對caspase3有上調(diào)作用。4在卵巢癌SKOV3細(xì)胞株中有miR-155表達(dá),一定程度上可抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖,并通過上調(diào)caspase3促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的凋亡,從而調(diào)控卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】:卵巢癌 SKOV3細(xì)胞株 miR-155 caspase3 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡 RT-PCR Western bolt
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R737.31
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • 英文摘要6-9
  • 前言9-11
  • 材料與方法11-21
  • 結(jié)果21-23
  • 附圖23-26
  • 附表26-28
  • 討論28-31
  • 結(jié)論31-32
  • 參考文獻(xiàn)32-35
  • 綜述 miR-155 在婦科惡性腫瘤中的研究進(jìn)展35-42
  • 參考文獻(xiàn)39-42
  • 致謝42-43
  • 個人簡歷43

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 王曉龍;陳新濤;曲戈;馬海波;馬軍;李印;秦建軍;;miR-155在食管鱗癌中的表達(dá)及臨床意義[J];中國胸心血管外科臨床雜志;2015年01期

2 高玲;袁明;鄒清靖;汪雯雯;栗妍;王世宣;;miR-155對子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展;2014年01期

3 車玉傳;蘇運(yùn)欽;溫旺榮;;miR-155-5p在宮頸癌血清中的表達(dá)及其對宮頸癌細(xì)胞的影響[J];中國病理生理雜志;2013年12期

4 應(yīng)倩;夏慶民;鄭榮壽;張思維;陳萬青;;中國2009年宮頸癌發(fā)病與死亡分析[J];中國腫瘤;2013年08期

5 Jingjing Liu;Qixin Mao;Yan Liu;Xiaomeng Hao;Sheng Zhang;Jin Zhang;;Analysis of miR-205 and miR-155 expression in the blood of breast cancer patients[J];Chinese Journal of Cancer Research;2013年01期

6 李萬春;涂頻;周曉軍;;MicroRNA與卵巢癌[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2012年12期

7 葛甜甜;梁勇;付蓉;王國錦;阮二寶;瞿文;王曉明;劉鴻;吳玉紅;宋嘉;王化泉;邢莉民;關(guān)晶;李麗娟;邵宗鴻;;淋巴瘤患者血漿中miR-21、miR-155、miR-210的表達(dá)及臨床意義[J];中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2012年02期

8 劉伏香;譚志琴;龍丹;戈立東;;miR-155在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J];中國癌癥雜志;2011年09期

9 劉沖;石群立;;卵巢癌免疫標(biāo)記物研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2010年09期



本文編號:592305

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