本文關(guān)鍵詞：miR-155對卵巢癌SKOV3細(xì)胞株增殖和凋亡的影響

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【摘要】：目的:腫瘤嚴(yán)重威脅著人類的生命健康,卵巢癌是目前為止發(fā)現(xiàn)的女性生殖系統(tǒng)腫瘤最常見的惡性腫瘤之一[1],嚴(yán)重威脅著女性的健康和生命,然而由于卵巢癌發(fā)病隱匿,發(fā)現(xiàn)時多為晚期,同時由于沒有特異的檢測指標(biāo),為治療及判斷預(yù)后造成了難題。近幾年來miRNA在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用已成為研究熱點(diǎn),越來越多的研究表明miRNA與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過程密切相關(guān),參與調(diào)控腫瘤細(xì)胞的凋亡、增殖、遷移等生物學(xué)行為,發(fā)揮著類似癌基因或抑癌基因的作用[2-4],本研究采用細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、流式細(xì)胞學(xué)、實(shí)時熒光定量PCR、Western blot等方法檢測miR-155和caspase3在卵巢癌SKOV3細(xì)胞株中的表達(dá)情況,探討miR-155在卵巢癌細(xì)胞株SKOV3中的表達(dá)情況及其對caspase3表達(dá)水平的調(diào)節(jié)作用,為卵巢癌基因治療提供理論基礎(chǔ),同時為卵巢癌的早期診斷和后續(xù)基因治療提供新的視角。方法:1培養(yǎng)卵巢癌SKOV3細(xì)胞株。2實(shí)驗(yàn)分組:實(shí)驗(yàn)組即應(yīng)用Hieff Trans脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染miR-155的過表達(dá)質(zhì)粒;陰性對照組即應(yīng)用Hieff Trans脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染無miR-155的質(zhì)粒;脂質(zhì)體試劑對照組即轉(zhuǎn)染Hieff Trans脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑組;空白對照組即不轉(zhuǎn)染組。3應(yīng)用MTT法檢測各組卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖情況。4應(yīng)用Annexin APC/7ADD雙染法檢測各組卵巢癌SKOV3細(xì)胞凋亡情況。5采用實(shí)時熒光定量PCR法檢測各組卵巢癌SKOV3細(xì)胞中miR-155的表達(dá)情況。6 Western blot法檢測各組卵巢癌SKOV3細(xì)胞中caspase3蛋白表達(dá)的情況。7用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)方式表示,多組間均數(shù)比較采用方差分析、兩組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn),若方差不齊采用秩和檢驗(yàn),P0.05為該數(shù)據(jù)由統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1 MTT法檢測各組細(xì)胞增殖情況:0、24、48小時,實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組、空白對照組、脂質(zhì)體對照組相比細(xì)胞增殖速度相似,統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異;72小時,實(shí)驗(yàn)組與其它三組相比細(xì)胞增殖速度明顯減慢,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著差異。2 Annexin APC/7ADD雙染法檢各組細(xì)胞凋亡情況:細(xì)胞轉(zhuǎn)染72小時后,實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組、脂質(zhì)體對照組及空白對照組相比細(xì)胞早期凋亡率明顯升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P0.05);晚期凋亡率各組間無顯著差異(P0.05)。3實(shí)時熒光定量PCR法檢測各組細(xì)胞miR-155表達(dá)情況:實(shí)驗(yàn)組miR-155的表達(dá)量與其它各對照組相比明顯升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P0.05)。4 Western blot法檢測各組細(xì)胞caspase3蛋白表達(dá)情況:實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組、空白對照組及脂質(zhì)體對照組相比caspase3蛋白表達(dá)明顯升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:1 miR-155可抑制卵巢癌細(xì)胞增殖。2說明miR-155能促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的凋亡。3在卵巢癌細(xì)胞中miR-155對caspase3有上調(diào)作用。4在卵巢癌SKOV3細(xì)胞株中有miR-155表達(dá),一定程度上可抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖,并通過上調(diào)caspase3促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的凋亡,從而調(diào)控卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：卵巢癌 SKOV3細(xì)胞株 miR-155 caspase3 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡 RT-PCR Western bolt
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-21
• 結(jié)果21-23
• 附圖23-26
• 附表26-28
• 討論28-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-35
• 綜述 miR-155 在婦科惡性腫瘤中的研究進(jìn)展35-42
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 致謝42-43
• 個人簡歷43

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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本文編號：592305