本文關(guān)鍵詞：Let-7i抑制人卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲

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【摘要】：目的 :探討let-7i對人卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和順鉑(cisplatin,DDP)耐藥性的影響及可能的作用機(jī)制。方法:應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測人永生化卵巢細(xì)胞IOSE、卵巢癌SKOV3細(xì)胞和卵巢癌DDP耐藥細(xì)胞SKOV3/DDP中l(wèi)et-7i的表達(dá)。將let-7i過表達(dá)質(zhì)粒(let-7i)、抑制let-7i表達(dá)質(zhì)粒(anti-let-7i)和陰性對照(negative control,NC)質(zhì)粒(let-7i-NC)分別轉(zhuǎn)染SKOV3細(xì)胞后,應(yīng)用Ed U(5-ethynyl-2’-deoxyuridine)實驗、劃痕愈合實驗和Transwell侵襲實驗分別檢測細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力。用不同濃度的DDP處理轉(zhuǎn)染了let-7i質(zhì)粒的SKOV3/DDP細(xì)胞后,MTT法檢查SKOV3/DDP細(xì)胞對DDP敏感性的變化。應(yīng)用Target Scan、mi Randa和Pic Tar靶基因預(yù)測軟件以及DAVI(D Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery)數(shù)據(jù)庫對let-7i進(jìn)行生物信息學(xué)分析,實時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測let-7i和anti-let-7i轉(zhuǎn)染組SKOV3細(xì)胞中l(wèi)et-7i潛在靶基因Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)m RNA和蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果 :SKOV3細(xì)胞中l(wèi)et-7i的表達(dá)水平低于IOSE細(xì)胞(P0.01),而SKOV3/DDP細(xì)胞中l(wèi)et-7i的表達(dá)水平低于SKOV3細(xì)胞(P0.01)。Let-7i轉(zhuǎn)染組SKOV3細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力下降(P0.05、P0.01和P0.05),而anti-let-7i轉(zhuǎn)染組SKOV3細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的改變不顯著(P值均0.05)。轉(zhuǎn)染let-7i質(zhì)粒后,SKOV3/DDP細(xì)胞對DDP的敏感性增強(qiáng)(P0.05)。生物信息學(xué)分析表明,let-7i的靶基因主要富集于絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信號通路、轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)信號通路和黏著斑通路等。Let-7i轉(zhuǎn)染組SKOV3細(xì)胞中TLR4 m RNA和蛋白的表達(dá)水平下調(diào)(P值均0.05)。結(jié)論 :卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP細(xì)胞中l(wèi)et-7i低表達(dá)。Let-7i過表達(dá)可抑制SKOV3細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力,增強(qiáng)SKOV3/DDP細(xì)胞對DDP的敏感性。TLR4可能是let-7i的靶基因之一。
【作者單位】： 武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物系;
【關(guān)鍵詞】： 卵巢腫瘤 細(xì)胞增殖 腫瘤浸潤 抗藥性 腫瘤 Let-i
【分類號】：R737.31
【正文快照】： 方法:應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測人永生化卵巢細(xì)胞IOSE、卵巢癌SKOV3細(xì)胞和卵巢癌DDP耐藥細(xì)胞SKOV3/DDP中l(wèi)et-7i的表達(dá)。將let-7i過表達(dá)質(zhì)粒(let-7i)、抑制let-7i表達(dá)質(zhì)粒(anti-let-7i)和陰性對照(negative control,NC)質(zhì)粒(let-7i-NC)分別轉(zhuǎn)染SKOV3細(xì)胞后,應(yīng)用Ed U(5-ethynyl-2

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