過表達ITLN-1能抑制人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡
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【摘要】:目的 :觀察過表達腸凝集素1(intelectin 1,ITLN-1)對子人宮內(nèi)膜腺癌Ishikawa細(xì)胞凋亡和增殖的影響。方法:采用脂質(zhì)體法將重組質(zhì)粒pCMV6-ITLN-1轉(zhuǎn)入Ishikawa細(xì)胞(ITLN-1過表達組),同時設(shè)未做任何處理的細(xì)胞作為空白對照組和轉(zhuǎn)入空載體pCMV6-N1的空載體組。48 h后,應(yīng)用實時熒光定量PCR法檢測ITLN-1、p53、環(huán)氧合酶2(cyclooxygenase-2,Cox-2)和第10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因(phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)mRNA的表達水平;蛋白質(zhì)印跡法檢測ITLN-1、p53、Cox-2、Bcl-2及cleaved-caspase 3蛋白的表達水平。采用MTS法檢測細(xì)胞的增殖活性;FCM法檢測細(xì)胞的凋亡率,倒置相差顯微鏡下觀察凋亡細(xì)胞形態(tài)的變化。結(jié)果:ITLN-1、p53和PTEN mRNA的表達水平均較空白對照組和空載體組明顯上調(diào)(P0.01、P0.05和P0.01),而Cox-2 mRNA的表達水平則明顯下調(diào)(P0.01)。p53和cleaved-caspase 3蛋白的表達水平均明顯上調(diào)(P值均0.01),Bcl-2和Cox-2蛋白的表達水平均明顯下調(diào)(P值均0.01)。與2個對照組相比,24和48 h時ITLN-1過表達組Ishikawa細(xì)胞的生長受到明顯抑制(P0.05和P0.01),細(xì)胞凋亡率明顯提高(P0.01),倒置相差顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)呈凋亡改變。結(jié)論 :ITLN-1表達上調(diào)能抑制Ishikawa細(xì)胞的增殖,并誘導(dǎo)其凋亡,這可能與上調(diào)Ishikawa細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白的表達有關(guān)。
【作者單位】: 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院婦科;
【關(guān)鍵詞】: 子宮內(nèi)膜腫瘤 凝集素類 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡
【基金】:河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點課題計劃資助項目(編號:20130233)~~
【分類號】:R737.33
【正文快照】: 腸凝集素1(intelectin 1,ITLN-1)是一種新近發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子,定位于人染色體1q22-23上,是一種在大網(wǎng)膜脂肪組織上特異表達的脂肪因子[1-2],其具有調(diào)控血糖代謝、參與炎性反應(yīng)抗感染和保護心血管系統(tǒng)等作用[3-8]。最近的研究顯示,ITLN-1在胃癌、結(jié)腸癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤和前列腺癌
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,本文編號:538940
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