本文關(guān)鍵詞：Galectin-1在滋養(yǎng)層干細(xì)胞增殖和分化中的表達(dá)與相關(guān)調(diào)控分子的研究

  更多相關(guān)文章： 半乳糖凝集素-1 滋養(yǎng)層干細(xì)胞 早期胚胎丟失 胚胎植入 甲基化

【摘要】：研究背景：妊娠過程中胚胎的植入、胎盤的形成和妊娠維持依賴于有序的滋養(yǎng)細(xì)胞增殖與分化。除胚胎遺傳缺陷等本身因素外,有研究表明胚胎著床失敗和早期妊娠丟失(EPL)等現(xiàn)象與滋養(yǎng)細(xì)胞增殖與分化不良有關(guān),導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞分化不良的機(jī)制至今未明。我們實(shí)驗(yàn)室前期的蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)與正常對照組相比EPL患者半乳糖凝集素-1(Galectin-1,Gal-1)滋養(yǎng)細(xì)胞中表達(dá)顯著降低,這可能提示Gal-1在早期胎盤發(fā)育過程中發(fā)揮了重要作用。滋養(yǎng)層干細(xì)胞系(TSC)與體內(nèi)的滋養(yǎng)層細(xì)胞譜系的基因表達(dá)的模式相似,因此可通過TSC的培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化模擬體內(nèi)的細(xì)胞滋養(yǎng)層形成胎盤的過程,以研究滋養(yǎng)細(xì)胞在妊娠維持中相關(guān)機(jī)制。 研究目的：運(yùn)用小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞增殖與分化模型,觀察Gal-1在滋養(yǎng)細(xì)胞增殖-分化進(jìn)程中的表達(dá)及相關(guān)重要分子的關(guān)系,研究Gal-1在胚胎著床失敗和EPL中的作用機(jī)制,為尋求相關(guān)治療方法提供理論依據(jù)。 研究方法：培養(yǎng)TSC并誘導(dǎo)其分化。采用qRT-PCR方法在mRNA水平檢測TSC增殖和分化時(shí)產(chǎn)生的各細(xì)胞類型標(biāo)志物。從mRNA水平和蛋白水平檢測Gal-1以及相關(guān)TSC融合分子在TSC增殖和分化過程中不同階段的表達(dá)變化。采用亞硫酸鹽測序的方法檢測Gal-1在TSC增殖分化過程中的啟動(dòng)子的甲基化水平。 研究結(jié)果： 1、Gal-1在TSC分化3-5天mRNA和蛋白水平表達(dá)相對于干細(xì)胞狀態(tài)顯著升高。第四天mRNA表達(dá)最高,為干細(xì)胞狀態(tài)表達(dá)的2.04倍。 2、Gal-1啟動(dòng)子的甲基化頻率隨分化下降,干細(xì)胞狀態(tài)甲基化頻率約1.4%,之后逐漸下降,至第五天達(dá)到最低,隨后上升至1%。 3、TSC分化過程中Gal-1表達(dá)變化與啟動(dòng)子甲基化頻率呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,Gal-1表達(dá)隨分化上升,至第五天達(dá)到峰值,而甲基化頻率隨分化下降,至第五天達(dá)到最低值。 4、Gal-1與細(xì)胞融合關(guān)鍵因子β-catenin表達(dá)呈負(fù)相關(guān),TSC分化第三天和第四天Gal-1表達(dá)顯著增高時(shí)β-catenin表達(dá)顯著降低。 研究結(jié)論： 1、Gal-1在TSC分化過程中表達(dá)顯著升高,Gal-1可能會(huì)影響TSC分化融合。 2、Gal-1在TSC分化過程中的表達(dá)與啟動(dòng)子甲基化有關(guān)。 3、Gal-1在TSC分化過程中可能通過與細(xì)胞融合關(guān)鍵因子β-catenin相互作用,影響TSC的分化和融合。
【關(guān)鍵詞】：半乳糖凝集素-1 滋養(yǎng)層干細(xì)胞 早期胚胎丟失 胚胎植入 甲基化
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R714
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞表9-11
• 1.1背景11-15
• 1.2 材料與方法15-35
• 1.2.1 主要試劑與儀器15-19
• 1.2.2 研究方法19-35
• 1.3 結(jié)果35-50
• 1.3.1 滋養(yǎng)層干細(xì)胞的增殖和分化35
• 1.3.2 TSC增殖和分化標(biāo)志物的檢測35-40
• 1.3.3 TSC增殖分化過程中Gal-1表達(dá)變化40-42
• 1.3.4 TSC增殖分化過程中Gal-1啟動(dòng)子甲基化水平的變化42-45
• 1.3.5 TSC增殖分化過程中與Gal-1可能相關(guān)融合關(guān)鍵分子的變化45-50
• 1.4 討論50-53
• 1.5 結(jié)論53-54
• 參考文獻(xiàn)54-56
• 綜述56-64
• 參考文獻(xiàn)61-64
• 研究生期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文64-65
• 個(gè)人簡歷65

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孔紫靖;胡麗芳;李允光;劉雪梅;鐘剛;;Galectin-1基因在人孕早期絨毛和蛻膜組織中表達(dá)的研究[J];生殖與避孕;2007年01期

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本文編號：519019