本文關(guān)鍵詞：自噬在紫杉醇誘導(dǎo)siha細(xì)胞凋亡中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：宮頸癌在女性惡性腫瘤的發(fā)病率中僅次于乳腺癌，，是女性生殖器官最常見的惡性腫瘤。宮頸癌的臨床治療手段主要以手術(shù)和放療為主，輔以化療。盡管治療手段得到不斷地改進(jìn)，但是晚期患者生存率并沒(méi)有顯著提高，同時(shí)近幾年來(lái)宮頸癌發(fā)病群體低齡化趨勢(shì)越來(lái)越明顯、以手術(shù)和放療為主的治療方法的對(duì)卵巢功能的影響較大及新輔助化療（NACT）的臨床效果比較明顯，現(xiàn)階段宮頸癌的化療越來(lái)越受到關(guān)注。作為宮頸癌一線化療藥物的紫杉醇已經(jīng)證實(shí)在引起多種腫瘤細(xì)胞凋亡的同時(shí)還可以引起腫瘤細(xì)胞的自噬，由于自噬的兩面性，本實(shí)驗(yàn)初步探討自噬在紫杉醇誘導(dǎo)siha細(xì)胞凋亡中的作用和機(jī)制，希望能夠?yàn)閷m頸癌的臨床化療進(jìn)行新的優(yōu)化。 目的：采用人宮頸癌siha細(xì)胞為研究對(duì)象，探討自噬在紫杉醇誘導(dǎo)siha細(xì)胞凋亡中的作用和機(jī)制。為臨床宮頸癌化療方案的優(yōu)化以及新的治療切入點(diǎn)的探索提供合理的理論基礎(chǔ)及依據(jù)。 方法:本實(shí)驗(yàn)采用體外培養(yǎng)人宮頸鱗癌siha細(xì)胞株，進(jìn)行以下研究。 1、通過(guò)MTT比色法檢測(cè)紫杉醇誘導(dǎo)宮頸癌Siha細(xì)胞的死亡情況，并初步探討自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤（3-MA）對(duì)該種死亡的作用。 2、通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)一步檢測(cè)紫杉醇誘導(dǎo)宮頸癌Siha細(xì)胞的凋亡以及3-MA對(duì)該種細(xì)胞死亡的影響。 3、通過(guò)吖啶橙染色(AO染色)證明紫杉醇誘導(dǎo)宮頸癌Siha細(xì)胞死亡的過(guò)程中伴隨著自噬產(chǎn)生。 4、通過(guò)蛋白印跡證明紫杉醇誘導(dǎo)宮頸癌Siha細(xì)胞死亡的過(guò)程中自噬相關(guān)蛋白LC3表達(dá)情況以及3-MA對(duì)其的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果均采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)和分析，并以P＜0.05表示實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 1、MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)：紫杉醇作用siha細(xì)胞24h后與對(duì)照組比較，紫杉醇1μmol/L組、紫杉醇2μmol/L組細(xì)胞生存率明顯降低（p0.05），并且呈濃度依賴性（p0.05），紫杉醇+3-MA組與紫杉醇組比較，細(xì)胞生存率降低,并有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p0.05）。 2、流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了上述MTT結(jié)果。 3、吖啶橙染色的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：熒光顯微鏡下紫杉醇組、紫杉醇+3-MA組與Control組及Control+3-MA組相比，細(xì)胞胞漿中嗜酸性紅色熒光顆粒明顯增多，紫杉醇+3-MA組與紫杉醇組相比胞漿內(nèi)嗜酸性紅色熒光顆粒明顯減少。 4、蛋白印跡結(jié)果顯示：紫杉醇組、紫杉醇+3-MA組與Control組相比自噬蛋白LC3表達(dá)明顯升高，并且呈濃度依賴性（p0.05）。紫杉醇+3-MA組與紫杉醇組相比自噬蛋白LC3表達(dá)明顯降低。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論: 1、紫杉醇可使siha細(xì)胞凋亡，并且產(chǎn)生自噬，這種自噬是保護(hù)性的，是宮頸癌siha細(xì)胞產(chǎn)生耐藥的一種重要因素。 2、抑制自噬能夠增強(qiáng)紫杉醇對(duì)宮頸癌細(xì)胞的殺傷作用,為自噬抑制劑增強(qiáng)宮頸癌化療敏感性提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：自噬 siha細(xì)胞 宮頸癌 紫杉醇
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 前言4-7
• 摘要7-10
• Abstract10-16
• 英文縮寫詞表16-18
• 第1章 引言18-19
• 第2章 綜述19-25
• 2.1 自噬的概念及生物學(xué)意義19-21
• 2.2 自噬與凋亡21-23
• 2.3 自噬與紫杉醇23-24
• 2.4 自噬抑制劑 3-甲基腺嘌呤（3-MA）24
• 2.5 自噬與宮頸癌24-25
• 第3章 材料與方法25-35
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料25-29
• 3.1.1 細(xì)胞株和主要試劑25
• 3.1.2 主要試劑的配制25-27
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備27-29
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法29-35
• 3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)29
• 3.2.2 MTT 法測(cè)細(xì)胞生存率29-30
• 3.2.3 流式細(xì)胞術(shù)（FCM）檢測(cè)細(xì)胞凋亡及 3MA 對(duì)在紫杉醇誘導(dǎo) siha 細(xì)胞凋亡中的作用30-32
• 3.2.4 AO（吖啶橙）染色檢測(cè)紫杉醇誘導(dǎo) siha 細(xì)胞自噬，以及3MA 對(duì)其的影響32-33
• 3.2.5 Western 蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè) LC3 蛋白表達(dá)量33-35
• 3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析35
• 第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-39
• 4.1 MTT 法檢測(cè)細(xì)胞生存率35
• 4.2 流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)一步檢測(cè)紫杉醇誘導(dǎo)宮頸癌 Siha 細(xì)胞的凋亡及 3-MA 對(duì)其的影響35-36
• 4.3 吖啶橙染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果36-38
• 4.4 Western 蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè) LC3 蛋白表達(dá)量38-39
• 第五章 討論39-41
• 第六章 結(jié)論41-42
• 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果42-43
• 致謝43-44
• 參考文獻(xiàn)44-48

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 孫陽(yáng);晉龍;劉佳華;林賽梅;楊茵;眭玉霞;石紅;;細(xì)胞自噬對(duì)紫杉醇誘導(dǎo)宮頸癌CaSki細(xì)胞死亡的影響(英文)[J];中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年06期

  本文關(guān)鍵詞：自噬在紫杉醇誘導(dǎo)siha細(xì)胞凋亡中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：487033