目的通過觀察人子宮內(nèi)膜異位癥在位子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞β-catenin的表達(dá),及利用siRNA靶向沉默β-catenin基因以阻斷Wnt/β-catenin信號通路來觀察其下游靶基因血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表達(dá)的變化,探討Wnt/β-catenin信號通路在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生機(jī)制中的作用。方法采用隨機(jī)、對照設(shè)計,將體外分離、培養(yǎng)的24例子宮內(nèi)膜異位癥患者在位子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞分成3組(n=8):空白組、陰性組(以含陰性熒光siRNA 100pmol和轉(zhuǎn)染試劑5μg的混合物轉(zhuǎn)染)以及siRNA干擾組(以含β-catenin siRNA 100pmol和轉(zhuǎn)染試劑5μg的混合物轉(zhuǎn)染),并以10例非子宮內(nèi)膜異位癥患者子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞作為正常組。利用Real-time PCR和Western blot方法分別檢測子宮內(nèi)膜異位癥在位子宮內(nèi)膜空白組和非子宮內(nèi)膜異位癥正常組β-catenin的表達(dá)。轉(zhuǎn)染24h后,用以上方法分別檢測子宮內(nèi)膜異位癥空...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 臨床資料
    1.2 標(biāo)本處理
    1.3 實驗試劑
    1.4 主要儀器
    1.5 子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
    1.6 子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的鑒定
    1.7 β-catenin siRNA的瞬時轉(zhuǎn)染
    1.8 總RNA的提取和Real-time PCR檢測
    1.9 免疫印跡法(Western blot)
    1.10 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的分離與鑒定
    2.2 內(nèi)異癥在位子宮內(nèi)膜和非內(nèi)異癥子宮內(nèi)膜β-catenin的表達(dá)差異
    2.3 β-catenin siRNA細(xì)胞轉(zhuǎn)染及效率
    2.4 靶向沉默β-catenin基因?qū)?nèi)異癥在位子宮內(nèi)膜β-catenin及VEGF、MMP-9表達(dá)的影響
3 討論



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