目的:探討miR-532抑制Sema4C逆轉(zhuǎn)宮頸癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及增加對順鉑化療敏感性的作用。方法:檢測宮頸癌細(xì)胞Caski經(jīng)過沉默Sema4C表達(dá)后EMT標(biāo)志物表達(dá)水平;利用Transwell遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)檢測沉默Sema4C表達(dá)所引起的宮頸癌細(xì)胞Caski遷移與侵襲能力變化;預(yù)測Sema4C是miR-532直接的靶基因并用雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)檢測熒光素酶活性;Western blotting及qRT-PCR檢測表達(dá)miR-532后EMT標(biāo)志物E-cadherin、Vimentin、Snail的蛋白表達(dá)水平及mRNA表達(dá)水平;利用Transwell遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)檢測Caski細(xì)胞經(jīng)過轉(zhuǎn)染miR-532 mimic后遷移、侵襲能力的變化;CCK8檢測過表達(dá)miR-532及沉默Sema4C對宮頸癌細(xì)胞順鉑化療敏感性的影響。結(jié)果:Sema4C參與調(diào)節(jié)宮頸癌細(xì)胞Caski上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,下調(diào)Sema4C可逆轉(zhuǎn)這一過程;Sema4C是miR-532直接的靶基因;miR-532可逆轉(zhuǎn)宮頸癌細(xì)胞的EMT;過表達(dá)miR-532及沉默Sema4C能顯著提高宮頸癌細(xì)胞對順鉑敏感性。結(jié)論:miR-532通過抑制...

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞樣本
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 qRT-PCR
    1.5 Western blotting
    1.6 熒光素酶報(bào)告基因法檢測
    1.7 Transwell 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
    1.8 Transwell 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
    1.9 CCK8實(shí)驗(yàn)
    1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 沉默 Sema4C 表達(dá)逆轉(zhuǎn)宮頸癌細(xì)胞 Caski 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化
    2.2 Sema4C是miR-532直接的靶基因
    2.3 過表達(dá) miR-532 逆轉(zhuǎn)宮頸癌細(xì)胞的EMT
    2.4 過表達(dá) miR-532及沉默 Sema4C提高宮頸癌細(xì)胞順鉑化療敏感性
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