目的:探討periostin對子宮內(nèi)膜癌腫瘤干細(xì)胞增殖和侵襲的影響,及其可能作用機(jī)制。方法:收集100例手術(shù)切除的子宮內(nèi)膜癌組織及距病灶3cm的癌旁組織,免疫組化、熒光定量PCR技術(shù)檢測子宮內(nèi)膜癌組織及癌旁組織中periostin的表達(dá)。流式細(xì)胞儀分選出子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Ishikawa CD133⁺細(xì)胞并培養(yǎng),免疫熒光檢測Ishikawa腫瘤細(xì)胞球中CD133的表達(dá)情況。Western bolt法檢測CD133⁺ Ishikawa和parental Ishikawa細(xì)胞中periostin的表達(dá)。構(gòu)建針對periostin的shRNA表達(dá)載體轉(zhuǎn)染Ishikawa CD133⁺細(xì)胞和過表達(dá)periostin的載體轉(zhuǎn)染親本parental Ishikawa細(xì)胞。Western bolt法檢測細(xì)胞中periostin蛋白表達(dá)水平,CCK-8和Transwell小室檢測細(xì)胞的增殖和侵襲能力,Western bolt法檢測Wnt信號通路蛋白(β-catenin、c-myc、CyclinD1、GSK3β)的表達(dá)。結(jié)果:periost...

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【文章目錄】：
1 資料與方法
    1.1 病例資料
    1.2 實(shí)驗(yàn)材料
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 免疫組化
        1.3.2 熒光定量PCR檢測periostin表達(dá)
        1.3.3 流式細(xì)胞術(shù)分選并培養(yǎng)
        1.3.4 實(shí)驗(yàn)分組及細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        1.3.5 Western blot法檢測periostin表達(dá)
        1.3.6 CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖能力
        1.3.7 Transwell小室檢測細(xì)胞的侵襲能力
        1.3.8 Western blot法檢測Wnt相關(guān)信號通路的蛋白表達(dá)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié) 果
    2.1 periostin在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其與臨床病理分級的關(guān)系
    2.2 流式細(xì)胞術(shù)分選情況
    2.3 Western blot檢測periostin蛋白表達(dá)
    2.4 細(xì)胞增殖和侵襲
    2.5 Western blot法檢測Wnt通路蛋白表達(dá)
3 討 論



本文編號：3772130