研究背景與目的:宮頸癌（cervical carcinoma）是發(fā)展中國(guó)家最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一�，F(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)神經(jīng)周浸潤(rùn)（perineural invasion,PNI）是導(dǎo)致宮頸癌患者預(yù)后不良和復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的原因之一。E6靶蛋白1（E6 targeting protein 1,E6TP1）是一種抑癌基因,可通過(guò)泛素-蛋白酶體途徑被E6蛋白降解,激活Rap1通路,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移,最終誘導(dǎo)宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展。甘丙肽（Galanin）可激發(fā)腫瘤細(xì)胞中的甘丙肽受體2（GalR2）的上調(diào),生成前列腺素E2（PGE2）,PGE2作為一種有效的運(yùn)動(dòng)因子,可起到激發(fā)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移的作用。在反饋機(jī)制中,腫瘤細(xì)胞釋放的甘丙肽可誘導(dǎo)神經(jīng)突形成,神經(jīng)與腫瘤細(xì)胞之間相互作用,從而促進(jìn)PNI的發(fā)生。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),E6TP1可通過(guò)泛素化蛋白酶體途徑被E6蛋白降解,從而上調(diào)HPV陽(yáng)性的人宮頸癌細(xì)胞株的甘丙肽和甘丙肽受體2的表達(dá)。研究表明:6-姜烯酚（6一shogaol,6S）可將細(xì)胞阻滯在G2/M期,抑制宮頸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)6-姜烯酚作用于人宮頸癌CaSki、C33A細(xì)胞后E6TP1、甘丙肽和... 

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮略詞對(duì)照表
引言
1、實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
    1.2 實(shí)驗(yàn)藥物、主要實(shí)驗(yàn)試劑與藥品
        1.2.1 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑與藥品
    1.3 實(shí)驗(yàn)器材及耗材
        1.3.1 主要實(shí)驗(yàn)器材
        1.3.2 實(shí)驗(yàn)耗材
    1.4 實(shí)驗(yàn)溶液配制
        1.4.1 6-姜烯酚藥物的配制
        1.4.2 0.25%胰酶消化液的配制
        1.4.3 RPMI-1640培養(yǎng)基的配制
        1.4.4 磷酸鹽緩沖液(PBS)(0.1mol/L,PH 7.4)的配制
        1.4.5 PMSF(l0mmol/L)的配制
        1.4.6 高純水的配制
        1.4.7 細(xì)胞蛋白裂解液的配制
        1.4.8 熒光水的配制
        1.4.9 5×TBE電泳液的配制
        1.4.10 引物的稀釋
2、方法與技術(shù)路線
    2.1 實(shí)驗(yàn)流程圖
    2.2 細(xì)胞的復(fù)蘇及培養(yǎng)
    2.3 細(xì)胞的傳代
    2.4 細(xì)胞接種
    2.5 分組及加藥
    2.6 細(xì)胞處理
    2.7 總RNA的提取
    2.8 RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA保存
        2.8.1 普通PRC(以管家基因GAPDH為陽(yáng)性對(duì)照)
        2.8.2 電泳檢測(cè)cDNA質(zhì)量
    2.9 RT-PCR定量
    2.10 數(shù)據(jù)收集
    2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3、結(jié)果
    3.1 RNA的測(cè)定
    3.2 實(shí)時(shí)熒光定量
4、討論
    4.1 宮頸癌及其復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的因素
    4.2 PNI與宮頸癌
    4.3 E6TP1、甘丙肽和甘丙肽受體2與宮頸癌PNI的關(guān)系
    4.4 姜及有效成分6S在治療腫瘤方面的作用
結(jié)論
問(wèn)題與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄一 ：在讀期間公開(kāi)發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、專著及科研成果



本文編號(hào)：3714833