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宮頸癌細(xì)胞株HeLa與正常宮頸細(xì)胞株Ect1/E6E7的微小RNA表達(dá)譜的差異

發(fā)布時間:2022-12-09 03:10
  目的探討宮頸癌細(xì)胞株HeLa與正常宮頸細(xì)胞株Ect1/E6E7中微小RNA(miRNA)分子表達(dá)譜的差異。方法選取HeLa細(xì)胞和Ect1/E6E7細(xì)胞各3個樣本分別作為實(shí)驗(yàn)組和對照組,采用miRNA芯片篩選兩者之間差異表達(dá)的miRNA,樣品間表達(dá)變化標(biāo)準(zhǔn)以上/下調(diào)4倍作為閾值范圍,并運(yùn)用miRWalk軟件預(yù)測差異表達(dá)miRNA可能調(diào)控的靶基因,并對這些靶基因進(jìn)行信號通路的富集分析。結(jié)果在HeLa細(xì)胞中,上調(diào)超過4倍差異表達(dá)miRNA分子7個,下調(diào)超過4倍差異表達(dá)miRNA分子16個(P<0.01)。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)hsa-miR-126-3p的靶基因在腫瘤通路、凋亡通路以及Wnt信號通路上出現(xiàn)聚集;而hsa-miR-25-5p的靶基因腫瘤通路和鈣離子信號通路出現(xiàn)聚集;且hsa-miR-205-5p靶基因在TGF-β信號通路和EGFR信號通路出現(xiàn)聚集。結(jié)論宮頸癌細(xì)胞HeLa與正常宮頸細(xì)胞Ect1/E6E7之間存在差異表達(dá)miRNA分子,他們可能參與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制。 

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1材料
    1.2方法
        1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2總RNA提取與濃度和質(zhì)量檢測
        1.2.3熒光標(biāo)記與ELISA質(zhì)控
        1.2.4 miRNA芯片檢測及信號分析
        1.2.5 qRT-PCR驗(yàn)證差異表達(dá)miRNA
        1.2.6靶基因生物信息學(xué)分析
    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 miRNA芯片樣品總RNA的質(zhì)量鑒定結(jié)果
    2.2 miRNA在He La細(xì)胞和Ect1/E6E7細(xì)胞中的表達(dá)
    2.5 qRT-PCR驗(yàn)證結(jié)果
    2.6 hsa-miR-126-3p、has-miR-25-5p和hsa-miR-205-5p靶基因生物信息學(xué)預(yù)測
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