目的:利用外泌體評估卵巢癌患者對順鉑敏感性。方法:超速離心法從卵巢癌細胞A2780、SKOV3、CAOV3培養(yǎng)上清及卵巢癌患者血清中提取外泌體。MTT法檢測順鉑對卵巢癌細胞株的24h時半數(shù)抑制濃度(IC₅₀),檢測出順鉑敏感細胞及耐藥細胞。MTT法檢測敏感細胞A2780在細胞外泌體與順鉑共培養(yǎng)條件下的增殖。Caspase 3/7活性凋亡檢測A2780細胞在細胞外泌體與順鉑共培養(yǎng)條件下的凋亡。MTT法檢測A2780細胞在卵巢癌患者血清外泌體與順鉑共培養(yǎng)條件下的增殖,并隨訪卵巢癌患者病情進展情況。結(jié)果:通過超速離心法能從卵巢癌細胞系培養(yǎng)上清及卵巢癌患者外周血清中分離出外泌體。MTT分析證實A2780為順鉑敏感細胞,SKOV3、CAOV3為順鉑不敏感細胞。細胞系來源的外泌體能顯著降低A2780對順鉑的敏感性（P＜0.05）,同時削弱順鉑對A2780中Caspase 3/7的活性（P＜0.05）,其中SKOV3和CAOV3外泌體的抑制作用顯著高于A2780�；贏2780細胞+順鉑模型,將30例卵巢癌患者分為順鉑敏感組和不敏感組,其中不敏感組的13例患者的血清外泌體降低A... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 臨床資料
    1.2 材料
    1.3 方法
        1.3.1 細胞培養(yǎng)
        1.3.2 外泌體提取
        1.3.3 外泌體的電鏡觀察
        1.3.4 Western blot檢測
        1.3.5 MTT法檢測細胞增殖
        1.3.6 Caspase 3/7細胞凋亡活性檢測細胞凋亡
    1.4 統(tǒng)計學處理
2 結(jié) 果
    2.1 外泌體透射電鏡下觀察
    2.2 A2780、SKOV3、CAOV3細胞來源及患者血清來源的外泌體標志蛋白分析
    2.3 細胞24h順鉑半數(shù)抑制濃度(IC50)測定
    2.4 細胞系外泌體降低A2780順鉑敏感性
    2.5 細胞外泌體抑制順鉑對A2780細胞的促凋亡作用
    2.6 卵巢癌患者血清外泌體對A2780細胞順鉑敏感性的影響
    2.7 不敏感組患者的復(fù)發(fā)情況
3 討 論



本文編號：3711632