本文關(guān)鍵詞：6-姜烯酚對(duì)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞生長(zhǎng)和促炎因子表達(dá)的抑制作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究6-姜烯酚對(duì)MyD88+人卵巢癌細(xì)胞SKOV-3和MyD88-人卵巢癌細(xì)胞A2780分泌的細(xì)胞因子(IL-6、IL-8、VEGF)及其增殖、凋亡、周期的影響和6-姜烯酚對(duì)紫杉醇誘導(dǎo)的MyD88+人卵巢癌細(xì)胞SKOV-3和MyD88-人卵巢癌細(xì)胞A2780細(xì)胞因子分泌及細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,旨在探討6-姜烯酚對(duì)卵巢癌細(xì)胞促炎因子表達(dá)及細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。方法：1.使用計(jì)算機(jī)軟件模擬6-姜烯酚與髓樣分化蛋白-2(MD-2)的分子對(duì)接情況。2.MTT法篩選6-姜烯酚的濃度區(qū)間,測(cè)定6-姜烯酚、紫杉醇及二者聯(lián)合用藥誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞后細(xì)胞的存活率。3. ELISA法檢測(cè)6-姜烯酚、紫杉醇及二者聯(lián)合用藥誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞分泌IL-6、IL-8和VEGF的濃度。4.流式細(xì)胞儀Annexin V-FITC/PI雙染色法檢測(cè)不同濃度6-姜烯酚、紫杉醇誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞的周期分布變化及固定濃度6-姜烯酚、紫杉醇誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞不同時(shí)間的細(xì)胞凋亡率。結(jié)果：1.通過(guò)計(jì)算機(jī)軟件將6-姜烯酚和MD-2晶體結(jié)構(gòu)相互作用,6-姜烯酚可以和MD-2蛋白相結(jié)合。2. SKOV-3細(xì)胞株能自分泌IL-6、IL-8、VEGF, A2780細(xì)胞能自分泌IL-8、VEGF,幾乎不分泌IL-6,6-姜烯酚可以減少SKOV-3細(xì)胞分泌的IL-6、IL-8、VEGF(P0.05),而對(duì)A2780細(xì)胞分泌的IL-6、IL-8無(wú)影響(P0.05),但可以抑制VEGF的分泌(P0.05)。紫杉醇可以誘導(dǎo)SKOV-3細(xì)胞分泌IL-6、IL-8、VEGF,而對(duì)A2780細(xì)胞分泌的IL-6、IL-8、VEGF無(wú)明顯影響。6-姜烯酚可以減少紫杉醇誘導(dǎo)的SKOV-3細(xì)胞分泌IL-6、IL-8、 VEGF,(P0.05),且可以減少紫杉醇誘導(dǎo)的A2780細(xì)胞分泌VEGF(P0.05),而對(duì)A2780細(xì)胞分泌的IL-6、IL-8無(wú)明顯影響(P0.05)。3.6-姜烯酚、紫杉醇均可以時(shí)間依賴(lài)方式誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞凋亡(P0.05)。6-姜烯酚對(duì)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞增殖周期分布變化的影響均不顯著(P0.05),紫杉醇誘導(dǎo)卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞后,細(xì)胞周期阻滯在G2/M期(P0.05)。4.6姜烯酚和紫杉醇均以劑量依賴(lài)方式抑制人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞存活,6-姜烯酚的ICso分別為(6.48±0.4536)μmol/L和(6.27±0.3762)μmol/L;其IC50濃度相近,無(wú)明顯細(xì)胞選擇性,但對(duì)兩種細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用較顯著。紫杉醇的IC50分別為(0.034±0.0042)μmol/L和(0.028±0.0035)μmol/L。6-姜烯酚(IC10濃度)無(wú)明顯增加紫杉醇對(duì)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用(P0.05)。結(jié)論：1.6-姜烯酚可能通過(guò)抑制Toll樣受體-4與MD-2結(jié)合,阻斷LPS或紫杉醇誘導(dǎo)的促炎因子的分泌,從而抑制人卵巢癌細(xì)胞周?chē)装Y反應(yīng)的發(fā)生。2.6-姜烯酚可通過(guò)誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞凋亡而抑制其增殖。
【關(guān)鍵詞】：6-姜烯酚 卵巢癌 紫杉醇 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF) 白介素-8 白介素-6
【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R737.31
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• ABSTRACT4-7
• 英文縮寫(xiě)詞對(duì)照表7-11
• 引言11-15
• 2.1 材料15-19
• 2.1.0 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞15
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑15-16
• 2.1.1.1 主要藥物15
• 2.1.1.2 主要試劑15-16
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備16-17
• 2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)耗材17
• 2.1.4 主要溶液配制17-19
• 2.1.4.1 RPMI-1640培養(yǎng)基的配制17-18
• 2.1.4.2 磷酸鹽緩沖液(PBS)18
• 2.1.4.3 0.25%的胰蛋白酶消化液18
• 2.1.4.4 MTT液18
• 2.1.4.5 5%的血清終止液18
• 2.1.4.6 細(xì)胞凍存液18-19
• 2.2 方法及技術(shù)路線19-33
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)流程圖19-22
• 2.2.1.1 卵巢癌細(xì)胞存活率及其IC_(50)的測(cè)定19
• 2.2.1.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期19-20
• 2.2.1.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡20
• 2.2.1.4 ELISA法檢測(cè)IL-6、IL-8和VEGF20-22
• 2.2.2 細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代和接種22-23
• 2.2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇及培養(yǎng)22
• 2.2.2.2 細(xì)胞傳代22
• 2.2.2.3 細(xì)胞接種22-23
• 2.2.2.4 細(xì)胞凍存23
• 2.2.3 藥物配制23
• 2.2.3.1 6-姜烯酚23
• 2.2.3.2 紫杉醇23
• 2.2.4 計(jì)算機(jī)模擬分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)23-24
• 2.2.5 ELISA法測(cè)定卵巢癌細(xì)胞分泌IL-6、IL-8和VEGF的濃度24-25
• 2.2.5.1 固定濃度的6-姜烯酚、紫杉醇誘導(dǎo)SKOV-3及A2780細(xì)胞48小時(shí)后IL-8、IL-6、VEGF的測(cè)定24-25
• 2.2.5.2 6-姜烯酚聯(lián)合紫杉醇誘導(dǎo)SKOV-3及A2780細(xì)胞48小時(shí)后IL-8、IL-6、VEGF的測(cè)定25
• 2.2.6 流式細(xì)胞術(shù)25-30
• 2.2.6.1 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期26-28
• 2.2.6.1.1 6-姜烯酚、紫杉醇IC_(10)濃度作用于A2780和SKOV-3細(xì)胞24h后細(xì)胞周期的變化26-27
• 2.2.6.1.2 6-姜烯酚、紫杉醇的IC_(50)濃度作用于A2780和SKOV-3細(xì)胞24 h后細(xì)胞周期的變化27-28
• 2.2.6.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡28-30
• 2.2.6.2.1 固定濃度的6-姜烯酚、紫杉醇作用于A2780和SKOV-3細(xì)胞15h后細(xì)胞凋亡的變化28-29
• 2.2.6.2.2 固定濃度的6-姜烯酚、紫杉醇作用于A2780和SKOV-3細(xì)胞30 h后細(xì)胞凋亡的變化29-30
• 2.2.7 MTT法測(cè)卵巢癌細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況及藥物對(duì)其生長(zhǎng)抑制作用30-33
• 2.2.7.1 6-姜烯酚抑制人卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)的濃度區(qū)間篩選30-31
• 2.2.7.2 不同濃度6-姜烯酚或紫杉醇對(duì)A2780和SKOV-3細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用31-32
• 2.2.7.3 6-姜烯酚聯(lián)合不同濃度紫杉醇對(duì)A2780和SKOV-3細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用32-33
• 2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法33
• 2.3 結(jié)果33-50
• 2.3.1 6-姜烯酚與TLR4表面的髓樣分化蛋白-2(MD-2聚體)結(jié)合的情況33-34
• 2.3.2 6-姜烯酚、紫杉醇對(duì)人卵巢癌細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子的影響34-37
• 2.3.2.1 6-姜烯酚、紫杉醇單獨(dú)及聯(lián)合用藥誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞和A2780細(xì)胞48h后IL-8的測(cè)定34-35
• 2.3.2.2 6-姜烯酚、紫杉醇單獨(dú)及聯(lián)合用藥誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞和A2780細(xì)胞48h后VEGF的測(cè)定35-36
• 2.3.2.3 6-姜烯酚、紫杉醇單獨(dú)及聯(lián)合用藥誘導(dǎo)SKOV-3細(xì)胞和A2780細(xì)胞48小時(shí)后IL-6測(cè)定36-37
• 2.3.3 6-姜烯酚、紫杉醇對(duì)人卵巢癌細(xì)胞周期的影響37-42
• 2.3.3.1 6-姜烯酚對(duì)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞周期的影響37-38
• 2.3.3.2 紫杉醇對(duì)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞周期的影響38
• 2.3.3.3 6-姜烯酚對(duì)人卵巢癌A2780細(xì)胞周期的影響38-39
• 2.3.3.4 紫杉醇對(duì)人卵巢癌A2780細(xì)胞周期的影響39-40
• 2.3.3.5 各實(shí)驗(yàn)組不同濃度藥物誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞和A2780細(xì)胞24 小時(shí)后細(xì)胞周期分布的變化40-42
• 2.3.4 6-姜烯酚、紫杉醇對(duì)人卵巢癌細(xì)胞凋亡的影響42-45
• 2.3.4.1 6-姜烯酚對(duì)人卵巢癌A2780細(xì)胞凋亡的影響42-43
• 2.3.4.2 6-姜烯酚誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞凋亡的作用43
• 2.3.4.3 紫杉醇誘導(dǎo)人卵巢癌A2780細(xì)胞凋亡的作用43-44
• 2.3.4.4 紫杉醇誘導(dǎo)卵巢癌SKOV-3細(xì)胞凋亡的作用44-45
• 2.3.5 6-姜烯酚、紫杉醇對(duì)人卵巢癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用45-50
• 2.3.5.1 6-姜烯酚抑制人卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)的濃度區(qū)間篩選45
• 2.3.5.2 6-姜烯酚對(duì)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用45-46
• 2.3.5.3 紫杉醇對(duì)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用46-47
• 2.3.5.4 6-姜烯酚聯(lián)合紫杉醇對(duì)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用47
• 2.3.5.5 各實(shí)驗(yàn)組藥物誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞72小時(shí)后IC_(50)數(shù)值比較47-48
• 2.3.5.6 6-姜烯酚對(duì)人卵巢癌A2780細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用48
• 2.3.5.7 紫杉醇對(duì)人卵巢癌A2780細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用48-49
• 2.3.5.8 6-姜烯酚聯(lián)合紫杉醇對(duì)人卵巢癌A2780細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用49
• 2.3.5.9 各實(shí)驗(yàn)組藥物誘導(dǎo)人卵巢癌A2780細(xì)胞72小時(shí)后IC_(50)數(shù)值比較49-50
• 2.4 討論50-54
• 2.5 結(jié)論54
• 2.6 問(wèn)題與展望54-56
• 致謝56-57
• 參考文獻(xiàn)57-67
• 綜述67-74
• 參考文獻(xiàn)69-74
• 附件74-75

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 丸子;;早上保暖吃生姜[J];養(yǎng)生大世界(B版);2009年01期

2 魏言;;廚房里的“急救藥”[J];工友;2014年05期

3 ;[J];;年期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 賈曉娟;6-姜烯酚對(duì)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞生長(zhǎng)和促炎因子表達(dá)的抑制作用[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 賈雁高;生姜精油中姜烯成分的分離純化[D];山東大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：6-姜烯酚對(duì)人卵巢癌SKOV-3和A2780細(xì)胞生長(zhǎng)和促炎因子表達(dá)的抑制作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：367988