發(fā)布時間：2022-09-17 15:20

　　研究目的:胰島素抵抗是多囊卵巢綜合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）的一項重要病理生理改變。PCOS患者子宮內膜胰島素抵抗影響子宮內膜功能,但目前對于子宮內膜胰島素抵抗的病因機制研究較少。既往研究認為皮質醇的過度累積與糖尿病及胰島素抵抗的發(fā)生密切相關,而皮質醇在PCOS患者子宮內膜胰島素抵抗中的作用尚不明確。因此,本研究旨在探究皮質醇在多囊卵巢綜合征患者子宮內膜胰島素抵抗中的影響,并進一步探索其對于子宮內膜胰島素抵抗的作用機制。研究方法1.根據鹿特丹診斷標準納入PCOS組患者,并進一步分為PCOS合并胰島素抵抗組（insulin resistance,IR）和PCOS未合并IR組;非PCOS組患者納入單純管性因素不孕,正常BMI未合并胰島素抵抗的患者。2.針對冷凍胚胎移植患者,在充分溝通、知情同意情況下,在取卵后第5天暨hCG日后第7天,對內膜進行輕搔爬,將內膜組織分為4份用于后續(xù)研究,或直接用于細胞提取。3.通過臨床信息統計分析,統計三組患者的基本資料以及種植率。4.采用免疫檢測試劑盒檢測內膜萃取樣本中皮質醇及可的松水平;采用PCR、Western b... 

【文章頁數】：134 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中文部分
    緒論
    材料與方法
        1 主要試驗儀器
        2 主要試劑和溶液
            2.1 常用試劑
            2.2 常用溶液配制方法
        3 研究對象
        4 子宮內膜組織和子宮內膜上皮細胞的收集
            4.1 子宮內膜組織的收集
            4.2 子宮內膜上皮細胞的分離和培養(yǎng)
        5 子宮內膜上皮細胞培養(yǎng)處理
        6 實時熒光定量PCR實驗
        7 蛋白質免疫印跡實驗
        8 免疫組化實驗
        9 免疫熒光實驗
        10 細胞膜蛋白和漿蛋白的分離抽提方法
        11 葡萄糖攝取實驗
        12 皮質醇及可的松的萃取
        13 皮質醇及可的松的檢測實驗
        14 血清類固醇激素、葡萄糖以及胰島素的檢測
        15 胚胎種植率計算
        16 統計學分析
    結果
        1 納入研究對象的一般情況及臨床結局
        2 子宮內膜局部皮質醇及可的松的水平
        3 子宮內膜局部11β-HSD1及11β-HSD2 的表達水平
        4 子宮內膜局部IRS-1、磷酸化IRS-1、Akt、磷酸化Akt、PTEN的表達
        5 11β-HSD2在子宮內膜中的表達定位
        6 子宮內膜上皮細胞純度鑒定
        7 子宮內膜上皮細胞中胰島素激發(fā)的GLUT4 轉位及葡萄糖攝取
        8 皮質醇對子宮內膜上皮細胞糖攝取、Akt磷酸化及GLUT4 轉位的作用
        9 皮質醇通過上調PTEN降低胰島素激發(fā)的Akt磷酸化及GLUT4 轉位
    討論
    結論
    參考文獻
英文部分
    Introduction
    Materials and Methods
        1 The experimental equipment and machines
        2 The main reagents and solutions
            2.1 Commonly used reagents
            2.2 common solution preparation method
        3 Paients recruitment
        4 Endometrial tissue and endometrial epithelial cells collected
            4.1 Endometrial tissue collection
            4.2 Separation of endometrial epithelial cells
        5 Treatment of endometrial epithelial cell
        6 Real-time quantitative PCR experiments
        7 Western blotting
        8 Immunohistochemistry
        9 Immunofluorescence
        10 GLUT4 membrane and cytoplasmic protein extraction
        11 Glucose uptake examination
        12 Cortisol and cortisone extraction
        13 Cortisol and cortisone immunoassay examination
        14 Serum steroid hormone, glucose and insulin examination
        15 Implantation rate calculations
        16 Statistical Analysis
    Results
        1 Demographic features and clinical outcomes
        2 Local cortisol and cortisone levels in the endometrium
        3 Expression of 11β-HSD1 and 11β-HSD2 in Endometrium
        4 Expression of IRS-1, Phosphorylated IRS-1, Akt, Phosphorylated Akt and PTEN in Endometrium
        5 Localization of 11β-HSD2 in Endometrium
        6 Identification of Endometrial Epithelial Cells
        7 Insulin stimulated GLUT4 translocation and glucose uptake in endometrial epithelial cells
        8 Effect of Cortisol on Glucose Uptake, Akt Phosphorylation, and GLUT4 Translocation in Endometrial Epithelial Cells
        9 Cortisol attenuated insulin-induced Akt phosphorylation and GLUT4 translocation via the induction of PTEN
    Discussion
    Conclusion
    Reference
致謝
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【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3679477