SASH1對滋養(yǎng)細胞功能的調(diào)控及其在子癇前期發(fā)病中的作用機制研究
發(fā)布時間：2022-01-19 02:22
目的:檢測SASH1（SAM-and SH3-domain containing1）基因在子癇前期患者胎盤組織及正常胎盤組織中的表達和定位;研究SASH1基因在調(diào)控絨毛外滋養(yǎng)細胞HTR8/SVneo的增殖、遷移和侵襲能力及其在調(diào)控細胞凋亡中的作用;探討SASH1對缺氧環(huán)境中培養(yǎng)的HTR8/SVneo細胞遷移及侵襲功能的調(diào)控作用及其可能機制,為研究子癇前期提供新的思路和治療措施。方法:（1）采用qPCR、western blot及免疫組化法檢測SASH1在胎盤組織中的表達和定位,并對比其在子癇前期患者胎盤組織及正常妊娠胎盤組織中的表達情況;（2）沉默和過表達SASH1基因,干擾絨毛外滋養(yǎng)細胞HTR8/SVneo中SASH1的表達;（3）采用qPCR法檢測沉默和過表達SASH1基因的效率;（4）通過CCK8和Edu增殖實驗、Transwell遷移實驗、Matrigel侵襲實驗以及Annexin V-VGFP細胞凋亡試劑盒,檢測沉默和過表達SASH1基因?qū)TR8/SVneo細胞增殖、遷移、侵襲及凋亡的影響;（5）體外培養(yǎng)絨毛外滋養(yǎng)細胞HTR8/SVneo,觀察常氧和缺氧環(huán)境中沉默SASH1...
【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】：105 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
圖１Ａ：?ＥＶＴｓ遷移穿過子宮實質(zhì)組織；Ｂ：?ＥＶＴｓ侵襲子宮螺旋動脈過程；Ｃ：滋養(yǎng)細胞??侵襲不足致子癇前期示意圖??
±６．６８＊??ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ?２０?２９．００士２．８０?３６．５０士?１．２４?８３．２５±１０．４９?１５９．２０士?１７．８６??ｔ?０．１３７?７．２６３?Ｌ９８３?９Ｊ５３??Ｐ?０．１１９?０．０００?０．０５３?０．０００??＊Ｐ＜０．０５?ｖｓ?ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ；??３．２各組胎盤標(biāo)本ＲＮＡ水平的比較??３．２．１正常對照組及子癇前期組的胎盤組織中均有ＳＡＳＨ１?ｍＲＮＡ的表達，ＳＡＳＨ１??ｍＲＮＡ相對于Ｐ－ａｃｔｉｎ的表達量如圖１－１。??３．２＿２子癇前期組ＳＡＳＨ１的ｍＲＮＡ７Ｋ平高于正常對照組，兩組之間相互比較，有??統(tǒng)計學(xué)差異（Ｐ＜〇．〇５）；如表１－５。??ＳＡＳＨ１?ｍＲＮＡ??０．０７?ｎ??０．０６?，??＝?ｍ?Ｂ??％?０．０５?－?Ｉ?Ｉ??０．０４?Ｉ?｜?Ｉ??｜?０．０３?ｐ?Ｉ?Ｉ?１?｜?Ｉ??＾〇＂ｉｌｌｌＩｌＩＨ?１１１１??＾?＾??圖１－１正常對照組與子癇前期組胎盤組織中ＳＡＳＨ１?ｍＲＮＡ的相對表達量??（圖中Ｎ１－８為正常妊娠組，ＰＥ１－８為子癇前期組）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳＨ?１?ｍＲＮＡ?ｉｎ?ｐｌａｃｅｎｔａｓ?ｏｆ?ｎｏｍａｌ?ｐｒｅｇｎａｎｃｙ?ａｎｄ??ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ??１８??
?第一部分?ＳＡＳＨ１蛋白在子癇前期和正常胎盤組織中的表達???３．４免疫組化結(jié)果??３．４．１光鏡下，ＳＡＳＨ１蛋白在正常對照組和子癇前期各組胎盤組織中均有表達，可??見到ＳＡＳＨ１反應(yīng)陽性產(chǎn)物為棕褐色顆粒狀或點狀，主要表達于胎盤絨毛滋養(yǎng)細胞??的胞漿和胞核中（圖１－３箭頭所示），且ＳＡＳＨ１蛋白在子癇前期組的表達量明顯??高于正常對照組。??Ｌ＇?ＯｆＡ?＊?．?？一?乂?＞?ｊ?ｉ?．、??、＇分??－卞?ｊ?＼、今。，：＇?Ｖ?．?．呈??，？々：乂；、．．、１??子癇前期胎盤組織中ＳＡＳＨ１分布（２００Ｘ）?正常胎盤組織中ＳＡＳＩ－Ｉ１分布（２００Ｘ）??圖１－３正常胎盤及子癇前期胎盤中ＳＡＳＨ１的表達??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳＨ?１?ｉｎ?ｈｕｍａｎ?ｐｌａｃｅｎｔａｓ?ｏｆ?ｎｏｍａｌ?ｐｒｅｇｎａｎｃｙ?ａｎｄ?ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ??３．４．２運用Ｉｍａｇｅ－Ｐｒｏ?Ｐｌｕｓ彩色圖譜分析系統(tǒng)進ｆｊ■半定量分析，結(jié)果顯示，正??常對照組與子癇前期組ＳＡＳＨ１蛋白平均光密度不同，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義??（Ｐ＜０．０５）；與正常對照組相比，子癇前期組ＳＡＳＨ１蛋白的平均光密度增高，說??明ＳＡＳＨ１蛋白在子癇前期胎盤組織中表達增加。如表１－７。??表１－７各組胎盤組織中ＳＡＳＨ１蛋白表達結(jié)果比較（［士?ｓ）??Ｔａｂｌｅ?１－７?ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳＨ?１?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎ?ｐｌａｃｅｎｔａ?（?ｘ?ｄｒ?ｓ）??ｇｒｏｕｐ（ｎ＝２０）?Ａｖｅｒａｇｅ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ??ｎｏｍａｌ?（）？?ｉ?１２７士
本文編號：3596035
【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】：105 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
圖１Ａ：?ＥＶＴｓ遷移穿過子宮實質(zhì)組織；Ｂ：?ＥＶＴｓ侵襲子宮螺旋動脈過程；Ｃ：滋養(yǎng)細胞??侵襲不足致子癇前期示意圖??
±６．６８＊??ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ?２０?２９．００士２．８０?３６．５０士?１．２４?８３．２５±１０．４９?１５９．２０士?１７．８６??ｔ?０．１３７?７．２６３?Ｌ９８３?９Ｊ５３??Ｐ?０．１１９?０．０００?０．０５３?０．０００??＊Ｐ＜０．０５?ｖｓ?ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ；??３．２各組胎盤標(biāo)本ＲＮＡ水平的比較??３．２．１正常對照組及子癇前期組的胎盤組織中均有ＳＡＳＨ１?ｍＲＮＡ的表達，ＳＡＳＨ１??ｍＲＮＡ相對于Ｐ－ａｃｔｉｎ的表達量如圖１－１。??３．２＿２子癇前期組ＳＡＳＨ１的ｍＲＮＡ７Ｋ平高于正常對照組，兩組之間相互比較，有??統(tǒng)計學(xué)差異（Ｐ＜〇．〇５）；如表１－５。??ＳＡＳＨ１?ｍＲＮＡ??０．０７?ｎ??０．０６?，??＝?ｍ?Ｂ??％?０．０５?－?Ｉ?Ｉ??０．０４?Ｉ?｜?Ｉ??｜?０．０３?ｐ?Ｉ?Ｉ?１?｜?Ｉ??＾〇＂ｉｌｌｌＩｌＩＨ?１１１１??＾?＾??圖１－１正常對照組與子癇前期組胎盤組織中ＳＡＳＨ１?ｍＲＮＡ的相對表達量??（圖中Ｎ１－８為正常妊娠組，ＰＥ１－８為子癇前期組）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳＨ?１?ｍＲＮＡ?ｉｎ?ｐｌａｃｅｎｔａｓ?ｏｆ?ｎｏｍａｌ?ｐｒｅｇｎａｎｃｙ?ａｎｄ??ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ??１８??
?第一部分?ＳＡＳＨ１蛋白在子癇前期和正常胎盤組織中的表達???３．４免疫組化結(jié)果??３．４．１光鏡下，ＳＡＳＨ１蛋白在正常對照組和子癇前期各組胎盤組織中均有表達，可??見到ＳＡＳＨ１反應(yīng)陽性產(chǎn)物為棕褐色顆粒狀或點狀，主要表達于胎盤絨毛滋養(yǎng)細胞??的胞漿和胞核中（圖１－３箭頭所示），且ＳＡＳＨ１蛋白在子癇前期組的表達量明顯??高于正常對照組。??Ｌ＇?ＯｆＡ?＊?．?？一?乂?＞?ｊ?ｉ?．、??、＇分??－卞?ｊ?＼、今。，：＇?Ｖ?．?．呈??，？々：乂；、．．、１??子癇前期胎盤組織中ＳＡＳＨ１分布（２００Ｘ）?正常胎盤組織中ＳＡＳＩ－Ｉ１分布（２００Ｘ）??圖１－３正常胎盤及子癇前期胎盤中ＳＡＳＨ１的表達??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳＨ?１?ｉｎ?ｈｕｍａｎ?ｐｌａｃｅｎｔａｓ?ｏｆ?ｎｏｍａｌ?ｐｒｅｇｎａｎｃｙ?ａｎｄ?ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ??３．４．２運用Ｉｍａｇｅ－Ｐｒｏ?Ｐｌｕｓ彩色圖譜分析系統(tǒng)進ｆｊ■半定量分析，結(jié)果顯示，正??常對照組與子癇前期組ＳＡＳＨ１蛋白平均光密度不同，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義??（Ｐ＜０．０５）；與正常對照組相比，子癇前期組ＳＡＳＨ１蛋白的平均光密度增高，說??明ＳＡＳＨ１蛋白在子癇前期胎盤組織中表達增加。如表１－７。??表１－７各組胎盤組織中ＳＡＳＨ１蛋白表達結(jié)果比較（［士?ｓ）??Ｔａｂｌｅ?１－７?ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳＨ?１?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎ?ｐｌａｃｅｎｔａ?（?ｘ?ｄｒ?ｓ）??ｇｒｏｕｐ（ｎ＝２０）?Ａｖｅｒａｇｅ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ??ｎｏｍａｌ?（）？?ｉ?１２７士
本文編號：3596035
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