目的:通過檢測(cè)控制性超促排卵（controlled ovarian hyperstimulation,COH）周期中多囊卵巢綜合征（PCOS）患者卵巢顆粒細(xì)胞高爾基體磷酸化蛋白-3（GOLPH3）與凋亡相關(guān)因子（BCL-2、BAX、Caspase-3）的表達(dá),初步探討PCOS患者GOLPH3的表達(dá)異常對(duì)顆粒細(xì)胞凋亡和卵母細(xì)胞質(zhì)量的影響,為改善PCOS患者助孕妊娠結(jié)局提供理論依據(jù)。方法:選擇2016年5月至2017年5月在福建省婦幼保健院輔助生殖技術(shù)研究室因輸卵管不孕因素首次行體外受精-胚胎移植（IVF-ET）助孕的PCOS患者78例和同期非PCOS患者78例（對(duì)照組）為研究對(duì)象,收集顆粒細(xì)胞。應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)（immunocytochemistry,ICC）和蛋白質(zhì)印跡（Western blotting,WB）方法檢測(cè)顆粒細(xì)胞GOLPH3、BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白的表達(dá),應(yīng)用Real-time RT-PCR技術(shù)檢測(cè)顆粒細(xì)胞GOLPH3、BCL-2、BAX、Caspase-3 mRNA的表達(dá)。運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析數(shù)據(jù),比較兩組GOLPH3和凋亡相關(guān)因子的表達(dá)差異,應(yīng)用Pe... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)兩組顆粒細(xì)胞GOLPH3、BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表達(dá)(×400).(A)人卵巢顆粒細(xì)胞HE染色；(B)PBS陰性對(duì)照組(DAB染色)；(C、D)PCOS組(C)和對(duì)照組(D)

圖 2 Real-time RT-PCR 擴(kuò)增曲線和熔解曲線 A 內(nèi)參基因 GADPH；B GOLPH3 基因；C BCL-2基因；D BAX 基因；E Caspase-3 基因；檢測(cè)結(jié)果顯示，擴(kuò)增體系穩(wěn)定，熔解曲線峰值均較高，無引物二聚體及非特異性產(chǎn)物產(chǎn)生，擴(kuò)增產(chǎn)物特異。表 7 PCOS 組和對(duì)照組顆粒細(xì)胞基因表達(dá)水平比較( x ±s)指標(biāo) PCOS組 對(duì)照組 t Pn 78 78GOLPH3 mRNA 1.08±0.09 1.64±0.02 2.243 0.027BCL-2 mRNA 0.03±0.01 0.11±0.01 2.274 0.026BAX mRNA 0.69±0.04 0.36±0.01 -2.100 0.038Caspase3 mRNA 2.83±0.27 1.64±0.01 -2.244 0.027

對(duì)照組 GOLPH3 基因和凋亡相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)量 PCORNA 表達(dá)均低于對(duì)照組，BAX mRNA、Caspase-3 mRNA 表義(*P＜0.05 vs 對(duì)照組)。tting 法檢測(cè)蛋白表達(dá)水平ern-blotting 法檢測(cè) PCOS 組和對(duì)照組顆粒細(xì)胞 GOLBCL-2、BAX 以及下游的凋亡效應(yīng)蛋白 Caspase-3 組GOLPH3蛋白表達(dá)水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)L-2 表達(dá)水平低于對(duì)照組，促凋亡蛋白 BAX 表達(dá)水統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；PCOS 組的凋亡效應(yīng)蛋白 C有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)(圖 4)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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