目的:通過檢測控制性超促排卵（controlled ovarian hyperstimulation,COH）周期中多囊卵巢綜合征（PCOS）患者卵巢顆粒細胞高爾基體磷酸化蛋白-3（GOLPH3）與凋亡相關(guān)因子（BCL-2、BAX、Caspase-3）的表達,初步探討PCOS患者GOLPH3的表達異常對顆粒細胞凋亡和卵母細胞質(zhì)量的影響,為改善PCOS患者助孕妊娠結(jié)局提供理論依據(jù)。方法:選擇2016年5月至2017年5月在福建省婦幼保健院輔助生殖技術(shù)研究室因輸卵管不孕因素首次行體外受精-胚胎移植（IVF-ET）助孕的PCOS患者78例和同期非PCOS患者78例（對照組）為研究對象,收集顆粒細胞。應(yīng)用免疫細胞化學(xué)（immunocytochemistry,ICC）和蛋白質(zhì)印跡（Western blotting,WB）方法檢測顆粒細胞GOLPH3、BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白的表達,應(yīng)用Real-time RT-PCR技術(shù)檢測顆粒細胞GOLPH3、BCL-2、BAX、Caspase-3 mRNA的表達。運用統(tǒng)計學(xué)方法分析數(shù)據(jù),比較兩組GOLPH3和凋亡相關(guān)因子的表達差異,應(yīng)用Pe... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

免疫細胞化學(xué)檢測兩組顆粒細胞GOLPH3、BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表達(×400).(A)人卵巢顆粒細胞HE染色；(B)PBS陰性對照組(DAB染色)；(C、D)PCOS組(C)和對照組(D)

圖 2 Real-time RT-PCR 擴增曲線和熔解曲線 A 內(nèi)參基因 GADPH；B GOLPH3 基因；C BCL-2基因；D BAX 基因；E Caspase-3 基因；檢測結(jié)果顯示，擴增體系穩(wěn)定，熔解曲線峰值均較高，無引物二聚體及非特異性產(chǎn)物產(chǎn)生，擴增產(chǎn)物特異。表 7 PCOS 組和對照組顆粒細胞基因表達水平比較( x ±s)指標(biāo) PCOS組 對照組 t Pn 78 78GOLPH3 mRNA 1.08±0.09 1.64±0.02 2.243 0.027BCL-2 mRNA 0.03±0.01 0.11±0.01 2.274 0.026BAX mRNA 0.69±0.04 0.36±0.01 -2.100 0.038Caspase3 mRNA 2.83±0.27 1.64±0.01 -2.244 0.027

對照組 GOLPH3 基因和凋亡相關(guān)基因的相對表達量 PCORNA 表達均低于對照組，BAX mRNA、Caspase-3 mRNA 表義(*P＜0.05 vs 對照組)。tting 法檢測蛋白表達水平ern-blotting 法檢測 PCOS 組和對照組顆粒細胞 GOLBCL-2、BAX 以及下游的凋亡效應(yīng)蛋白 Caspase-3 組GOLPH3蛋白表達水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)L-2 表達水平低于對照組，促凋亡蛋白 BAX 表達水統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)；PCOS 組的凋亡效應(yīng)蛋白 C有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)(圖 4)。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]輔助生殖促排卵藥物治療專家共識[J]. 喬杰,馬彩虹,劉嘉茵,馬翔,李尚為,楊業(yè)洲,張波,臘曉琳,王曉紅,朱依敏,陳子江,周從容,徐艷文,張松英,孫赟,章漢旺,艾繼輝,孫瑩璞,胡琳莉,李蓉,盛燕,林戈,武學(xué)清,劉平.  生殖與避孕. 2015(04)
[2]bcl-2表達下調(diào)參與PCOS患者顆粒細胞的凋亡增加[J]. 趙麗琴,李永強,沈浣.  中國婦產(chǎn)科臨床雜志. 2009(06)
[3]體外受精-胚胎移植中多囊卵巢綜合征顆粒細胞凋亡與妊娠結(jié)局關(guān)系的探討[J]. 孫春玲,喬杰,陳英玉,張婷,胡振興.  中國實用婦科與產(chǎn)科雜志. 2007(09)
[4]凋亡調(diào)控蛋白Bcl-2、Bax、P53和PDCD5在多囊卵巢綜合征各級卵泡的表達[J]. 孫春玲,喬杰,高冬霞.  中國婦產(chǎn)科臨床雜志. 2006(02)
[5]濟南市漢族育齡婦女PCOS患病狀況的初步調(diào)查[J]. 陳子江,趙君利,周鳳榮,李媛,趙力新,馬增香.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2005(06)



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