本文關(guān)鍵詞：環(huán)氧化物酶抑制劑NS-398聯(lián)合奧沙利鉑對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞增殖和凋亡的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:宮頸癌是女性發(fā)病率最高的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤,近年來(lái),宮頸癌的發(fā)病率逐年上升,而且呈年輕化趨勢(shì),嚴(yán)重威脅女性健康,是臨床上迫切需要解決的問(wèn)題。目前臨床上宮頸癌的治療仍然以手術(shù)結(jié)合放化療為主,傳統(tǒng)的化療藥物對(duì)機(jī)體的毒副作用較大,嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量,尋找一種療效理想同時(shí)毒副作用小的化療藥物是臨床研究的熱點(diǎn)。近年的研究表明,環(huán)氧化酶-2(COX-2)抑制劑NS-398可以通過(guò)抑制COX-2活性抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),本課題即研究NS-398和奧沙利鉑(L-OHP)以及二者聯(lián)合對(duì)Hela細(xì)胞增殖和凋亡的影響,為臨床治療宮頸癌提供一定的理論依據(jù)。方法:采用CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度的L-OHP和NS-398以及二者聯(lián)合對(duì)Hela細(xì)胞增殖抑制率的影響;光鏡下觀察L-OHP(10mg/L)和NS-398(60μmol/L)以及二者聯(lián)合對(duì)Hela細(xì)胞形態(tài)的影響;流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)Hela細(xì)胞的凋亡率以及細(xì)胞周期,羅丹明染色和免疫熒光雙重染色檢測(cè)L-OHP和NS-398對(duì)Hela細(xì)胞的凋亡情況;DNA Ladder法檢測(cè)Hela細(xì)胞的晚期凋亡情況;采用caspase-3活性試劑盒檢測(cè)L-OHP和NS-398以及二者聯(lián)合應(yīng)用于Hela細(xì)胞后caspase-3活性的改變。結(jié)果:1 CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示L-OHP和NS-398單獨(dú)應(yīng)用于Hela細(xì)胞對(duì)Hela細(xì)胞具有抑制作用(P0.05),且這種抑制作用有一定的劑量依賴(lài)性。二者聯(lián)合作用于Hela細(xì)胞對(duì)Hela細(xì)胞的抑制作用要優(yōu)于單一用藥。2倒置顯微鏡下可見(jiàn)L-OHP(10mg/L)和NS-398(60μmol/L)以及二者聯(lián)合作用于Hela細(xì)胞24h后,Hela細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了不同程度的改變,皺縮變圓,從瓶底脫落漂浮,細(xì)胞破裂,內(nèi)容物溢出等。3羅丹明染色結(jié)果顯示L-OHP(10mg/L)和NS-398(60μmol/L)以及二者聯(lián)合作用后的Hela細(xì)胞24h后,熒光強(qiáng)度均不同程度的增強(qiáng),尤其以二者聯(lián)合作用后的為著。4流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,L-OHP(10mg/L)和NS-398(60μmol/L)以及二者聯(lián)合作用后的Hela細(xì)胞24h后,Hela細(xì)胞的凋亡率分別為:(10.3±0.06)%、(10.5±0.14)%、(15.7±0.13)%,與陰性對(duì)照組(2.4±0.36)%相比,差異顯著(P0.01)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期結(jié)果顯示L-OHP和NS-398能阻滯Hela細(xì)胞的G1期,細(xì)胞進(jìn)入S期受阻。5瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示:L-OHP(10mg/L)和NS-398(60μmol/L)聯(lián)合作用于Hela細(xì)胞48h后可見(jiàn)明顯的梯狀條帶。6 Caspase-3活性檢測(cè)結(jié)果顯示60μmol/L的NS-398和10 mg/L的L-OHP以及二者聯(lián)合作用48h后的Hela細(xì)胞的caspase-3被不同程度的活化,10ml/L的L-OHP作用后的Hela細(xì)胞的caspase-3活性較陰性對(duì)照組升高了1.51倍,60μmol/L的NS-398作用后的Hela細(xì)胞的caspase-3活性升高了1.43倍,二者聯(lián)用后caspase-3活性升高了2.48倍,均具有顯著差異(P0.01)。結(jié)論:1 L-OHP和NS-398對(duì)Hela細(xì)胞具有抑制作用,并且抑制作用具有一定的劑量依賴(lài)性,二者聯(lián)用對(duì)Hela細(xì)胞的抑制作用要強(qiáng)于二者單用。2 L-OHP和NS-398對(duì)Hela細(xì)胞的抑制作用與誘導(dǎo)其凋亡有關(guān)。3 L-OHP和NS-398可以影響Hela細(xì)胞的細(xì)胞周期,使Hela細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯在G1期。4 L-OHP和NS-398誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡與caspase-3活化有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：NS-398 L-OHP Hela細(xì)胞 凋亡
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文縮寫(xiě)9-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-17
• 結(jié)果17-20
• 附圖20-21
• 附表21-22
• 討論22-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-30
• 綜述 NS398 抗腫瘤機(jī)制研究進(jìn)展30-41
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 致謝41-42
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷42

【參考文獻(xiàn)】

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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本文編號(hào)：358505