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氫氣通過抑制PI3K/AKT通路治療小鼠子宮內(nèi)膜異位癥的研究

發(fā)布時間:2022-01-09 02:38
  研究目的:通過子宮內(nèi)膜異位癥小鼠動物模型,證實呼吸氫氣可能對子宮內(nèi)膜異位癥具有一定的治療保護作用,其機制可能是通過抑制PI3K/AKT通路。研究方法:1.建立子宮內(nèi)膜異位癥小鼠動物模型,隨機分組并給與不同濃度的氫氣及氫水治療4周后,觀察病灶大小、稱重,HE染色查看病灶及病灶周圍纖維組織增生情況,病灶組織免疫組化檢測病灶細胞內(nèi)AKT和PCNA增殖。2.建立子宮內(nèi)膜癥小鼠模型,隨機分組并給與67%氫氣、PI3K激動劑bpv(Hopic)、PI3K抑制劑LY294002、Wortmaninn治療4周后取材,病灶大小、稱重,檢測病灶組織中FOXO1,SEMa3A、P-AKT/AKT含量,HE染色查看病灶及病灶周圍纖維組織增生情況,病灶組織免疫組化及雙重熒光染色檢測病灶細胞內(nèi)P-AKT和PCNA表達,Western Bloting檢測PI3K/AKT、FOXO1,SEMa3A濃度及比值3.病灶組織免疫組化染色檢測病灶細胞內(nèi)相關(guān)蛋BAD、GSK3b、JNK表達。結(jié)果:1.不同濃度的氫氣及氫水治療組與EM模型組比較,大體見異位病灶體積較小,病灶稱重后重量均減少,統(tǒng)計學分析差異有顯著性(*P<0... 

【文章來源】:中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

氫氣通過抑制PI3K/AKT通路治療小鼠子宮內(nèi)膜異位癥的研究


不同濃度氫氣及氫水治療后小鼠異位子宮內(nèi)膜大體觀

HE染色,飽和氫,重量,灌胃


正常組EM組EM+3%H2EM+6%H2EM+33%H2EM+67%H2EM+79%H2飽和氫水050100150病灶重量(gm)*******P<0.05,**P<0.01,與 EM 組進行比較建模成功后,觀察發(fā)現(xiàn)經(jīng)不同處理 4 w 后:通入不同濃度的氫氣及灌胃飽和氫水和 EM 模型組比較異位病灶重量均減少,統(tǒng)計學分析差異有顯著性。*P<0.05,**P<0.01,與 EM 組進行比較。(二) 病灶組織 HE 染色觀察對病灶組織進行 HE 染色后得到結(jié)果如下(見圖 3):

免疫組化,光密度


圖 4:免疫組化-P-AKT 染色(400X)對上述免疫組化圖片使用 ImagePro Plus 6.0 (Media Cybernetics,美國)分析:測量得到陽性總面積、陽性總積分光密度(陽性表達總蛋白量),計算平均積分光密度(平均陽性蛋白表達量)表三:免疫組化 P-AKT 染色光密度分析:分組 平均陽性光密度均值(Mean IOD) SD正常組(空白組) 0.10 0.00EM 組 0.11 ±0.04EM+3%H2 0.05 ±0.01EM+6%H2 0.04* ±0.02EM+33%H2 0.03 * ±0.01EM+67%H2 0.01* ±0.01EM+79%H2 0.02* ±0.01EM+氫水組 0.02* ±0.01*P<0.05,與 EM 組進行比較

【參考文獻】:
期刊論文
[1]2015年子宮內(nèi)膜異位癥的診治指南專家解讀[J]. 郎景和,崔恒,戴毅,華克勤,冷金花,王立杰,郁琦,朱蘭,張信美,周應(yīng)芳,張震宇,段華.  中華婦產(chǎn)科雜志. 2017 (12)
[2]子宮內(nèi)膜異位癥治療新觀念[J]. 冷金花,戴毅.  中華婦產(chǎn)科雜志. 2017 (07)
[3]用模擬經(jīng)期內(nèi)膜組織建立子宮內(nèi)膜異位癥小鼠模型及其生殖能力的研究[J]. 王汝倩,張潔,劉璐茜,翟東霞,張丹英,姚睿嬪,吉翔,程雯,俞超芹.  生殖醫(yī)學雜志. 2017(06)



本文編號:3577779

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