基于IL17A/F-p38探討化瘀通絡法改善盆腔血瘀微環(huán)境的作用機制
發(fā)布時間:2022-01-07 00:45
目的:海內(nèi)婦人,無論長幼,凡受慢性盆腔疼痛所困者,十固有一,引婦人心生煩怨,周身不悅,雖現(xiàn)代醫(yī)學已有對癥止痛、激素替代、有創(chuàng)治療三類良法可用,但并無對因治療之法,故仍需權衡,以岐黃之術解除慢性盆腔疼痛對婦人之耗傷。導師提出“血瘀微環(huán)境”導致慢性盆腔疼痛一說,以“丹枝飲”治療慢性盆腔疼痛,以探討“化瘀通絡”治療慢性盆腔疼痛的作用機制。方法:實驗方面,通過使用MTT法尋找中藥丹枝飲與西藥阿司匹林作用于NIH/3T3細胞的最佳濃度,以及通過IL-17A/F作用于NIH/3T3細胞后得到炎性因子MCP-1、MIP-2濃度,尋找IL-17A/F刺激的最佳濃度,探討丹枝飲對p38通路及炎性因子MCP-1、MIP-2的作用,從而驗證丹枝飲對慢性盆腔疼痛的作用機制。臨床方面,以氣滯血瘀型子宮腺肌癥(慢性盆腔疼痛)患者為研究對象,使用丹枝飲口服治療,并與散結鎮(zhèn)痛膠囊對照,觀察丹枝飲對患者中醫(yī)癥候評分、疼痛程度評分、痛經(jīng)癥狀量表評分的影響,明確丹枝飲的臨床療效。結果:實驗方面,中藥丹枝飲和西藥阿司匹林濃度分別為原液1.25%和50ug/ml時,對NIH/3T3細胞毒性小于10%;IL-17A/F的刺激濃度...
【文章來源】:北京中醫(yī)藥大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:123 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
工P-2基因實?
基于IL17AF_p38探討化瘀通絡改善盆腔血瘀微環(huán)境作用機制暨丹枝飲治療氣滯血瘀型子宮腺肌癥(慢性盆腔疼痛)臨床研宄??a)配置?PCR?反應體系。即?2XMaster?Mix?(10ul)?+10uM?PCR?特引物?F?(0.?5ul)??+10uM?PCR特引物R?(0.?Sul),加水至終體積18ul,充分混勻。b)加樣:將18ul配置??的PCR反應體系混合液加到96-RCR板對應孔中,再加入對應的2ul?cDNA樣本。粘上??封口膜,短暫離心混勻,置于冰上待用。c)設置PCR程序:95°C,30秒;40個PCR循??環(huán)(95°C,5秒;60°C,40秒),為了建立PCR產(chǎn)物的熔解曲線,擴增反應結束后,??按(95°C,10秒;60°C,60秒;95°C,?15秒)。設置好程序后,將加樣后96-PCR版??置于PCR分析儀上進行PCR反應。??4.?6樣本結果分析??各樣品的目的基因和內(nèi)參分別進行Realtime?PCR反應,3個復孔。數(shù)據(jù)采用2_AA??CT法進行分析。??圖6?MCP-1基因實時擴增曲線圖及產(chǎn)物溶解曲線圖??Melt?Ourve??.?—
m0?440.55±14.485?428.01±9.793?430.68±3.?142??5?1071.?13±18.048a?689.55±?16.?12廣?967.56±?13.325°??10?386.00±3.685a?976.52±?12.?195b*?516.94±5.?183”??20?470.?32±7.?504a?832.50±?11.?993b*?662.?93±9.?523"*??30?550.67±10.?185a?462.22±?15.293b-?491.02±4.386e。??60?733.97±11.?994°?423.?35±28.292*?1300.?37±?15.?797rt??120?437.?62±5.?978?433.?95±0.?515?436.?81±6.?600??180?451.?52±7.?240?437.?63±8.?249?438.?11±9.?880??注:與模型組Omin比較,aP<0.?05;與中藥組Orain比較,bP<0.?05;與西藥組Omin比較,cP<??0.05。同時間點分別與模型組比較,*P<0.?05。??圖14各組細胞不同時間點P-38磷酸化蛋白水平的表達??0?5?10?20?30?60?120?180??
本文編號:3573466
【文章來源】:北京中醫(yī)藥大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:123 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
工P-2基因實?
基于IL17AF_p38探討化瘀通絡改善盆腔血瘀微環(huán)境作用機制暨丹枝飲治療氣滯血瘀型子宮腺肌癥(慢性盆腔疼痛)臨床研宄??a)配置?PCR?反應體系。即?2XMaster?Mix?(10ul)?+10uM?PCR?特引物?F?(0.?5ul)??+10uM?PCR特引物R?(0.?Sul),加水至終體積18ul,充分混勻。b)加樣:將18ul配置??的PCR反應體系混合液加到96-RCR板對應孔中,再加入對應的2ul?cDNA樣本。粘上??封口膜,短暫離心混勻,置于冰上待用。c)設置PCR程序:95°C,30秒;40個PCR循??環(huán)(95°C,5秒;60°C,40秒),為了建立PCR產(chǎn)物的熔解曲線,擴增反應結束后,??按(95°C,10秒;60°C,60秒;95°C,?15秒)。設置好程序后,將加樣后96-PCR版??置于PCR分析儀上進行PCR反應。??4.?6樣本結果分析??各樣品的目的基因和內(nèi)參分別進行Realtime?PCR反應,3個復孔。數(shù)據(jù)采用2_AA??CT法進行分析。??圖6?MCP-1基因實時擴增曲線圖及產(chǎn)物溶解曲線圖??Melt?Ourve??.?—
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