維生素E對GDM孕鼠氧化應(yīng)激內(nèi)環(huán)境及其胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)功能的影響研究
發(fā)布時間:2017-05-11 13:10
本文關(guān)鍵詞:維生素E對GDM孕鼠氧化應(yīng)激內(nèi)環(huán)境及其胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)功能的影響研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:本研究旨在了解孕鼠在GDM內(nèi)環(huán)境下胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)功能以及胎鼠生長發(fā)育的變化,探討維生素E干預(yù)對GDM孕鼠胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)功能的機(jī)制和影響,以及對胎鼠生長發(fā)育的影響。方法:試驗前動物自由進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)飼料,維持12hr光照和12hr黑暗的晝夜節(jié)律。實驗室溫度:20~25℃,濕度:50±5%。在上述環(huán)境適應(yīng)1 w后,按2:1雌雄合籠,次日早晨7:00檢查陰栓,查到陰栓定為交配成功,并定為GD0。動物禁食12hr,按80 mg/kg在GD6、GD7、GD8連續(xù)3天腹腔內(nèi)注射STZ溶液,空白對照組(Control)小鼠注射等劑量的生理鹽水。尾靜脈采血測血糖,48hr內(nèi)血糖≥11.1mmol/L即為成功模型;選取GDM模型小鼠,隨機(jī)均分成2組:糖尿病對照組(GDM)和維生素E補(bǔ)充劑組(Vit E)。同時隨機(jī)選取空白對照組(Control)小鼠12只。于建模成功后GD10~GD18期間,按以下方案給藥隔天給藥,對照組:生理鹽水,5 mg/kg d i.g.。GDM小鼠模型對照組:生理鹽水,5 mg/kg d i.g.?寡趸瘎┭a(bǔ)充組:維生素E,5 mg/kg d i.g.。在GD18天處死小鼠,收集孕鼠胎盤以及血清。結(jié)果:(1)孕鼠不同組別在不同時期的體重用單因素重復(fù)測量資料的方差分析結(jié)果顯示:校正后時間效應(yīng)的F值=243.188,P值0.001,不同時間段的孕鼠差異有統(tǒng)計學(xué)意義,隨著時間變化孕鼠體重呈增長趨勢,校正后時間與組別交互效應(yīng)的F值=4.290,P值=0.002,不同組別孕鼠有差異;不同組別在不同時期的血糖用單因素重復(fù)測量資料的方差分析結(jié)果顯示:校正后時間效應(yīng)的F值=3.425,P值=0.039,不同時間段的孕鼠血糖差異有統(tǒng)計學(xué)意義,校正后時間與組別交互效應(yīng)的F值=2.815,P值=0.035,不同組別孕鼠血糖有差異。在GD18,GDM組小鼠的血清胰島素水平低于Control組(P0.01),Vit E組胰島素高于GDM組(P0.05)。(2)GDM組的胎鼠體重明顯小于Control組(P0.001),Vit E干預(yù)后體重與GDM組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);GDM組的胎鼠體長明顯小于Control組(P0.001),Vit E干預(yù)后胎鼠體長要大于GDM組(P0.05);GDM組的胎鼠胎盤重量明顯小于Control組(P0.001),Vit E干預(yù)后胎鼠胎盤重量與GDM組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);三組胎盤直徑差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);GDM組的胎鼠血糖明顯小于Control組(P0.001),Vit E干預(yù)后胎鼠血糖與GDM組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3)與Control組比較,GDM組的母鼠血清中的SOD(P0.01)、GSH-px(P0.05)明顯下降,而MDA水平明顯上升(P0.01);Vit E干預(yù)后,與GDM組相比,Vit E組的母鼠血清中的SOD(P0.01)、GSH-px(P0.05)明顯上升,而MDA水平明顯下降(P0.01)。(4)與Control組比較,GDM組的母鼠血清中的IL-6、IL-8明顯上升(P0.01),而TNF-α水平雖然比較高,但與Control組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);Vit E干預(yù)后,與GDM組相比,Vit E組的母鼠血清中的TNF-α、IL-6、IL-8明顯下降(P0.05)。(5)在免疫印跡試驗中,與Control組相比,GDM組PPARγ、FATP1、FATP4蛋白表達(dá)水平下調(diào)了(P0.05),GDM組FABP-pm蛋白表達(dá)水平上調(diào)了(P0.05);Vit E干預(yù)后,與GDM組相比,PPARγ、FATP1、FATP4水平明顯上升(P0.05),FABPpm、CD36水平明顯下降(P0.05);FATP2、FATP3蛋白的表達(dá)水平無明顯變化。(6)在RT-PCR試驗中,與Control組相比,GDM組PPARγ、FATP1、FATP4的m RNA的表達(dá)水平被下調(diào)(P0.01),GDM組FABP-pm m RNA的表達(dá)水平被上調(diào)了;Vit E干預(yù)后,與GDM組相比,PPARγ、FATP1水平明顯上升,CD36水平明顯下降;其他的蛋白m RNA表達(dá)水平無明顯變化。(7)HE染色觀察GDM組胎盤血管排列紊亂,血細(xì)胞減少;免疫組化結(jié)果顯示:與Control組比較,GDM組PPARγ、FATP1、FATP4的平均光密度下降,FABP-pm、CD36的光密度上升;Vit E干預(yù)后,與GDM組相比,PPARγ、FATP1、FATP4的平均光密度上升,FABP-pm、CD36的光密度下降。結(jié)論:維生素E對STZ誘導(dǎo)的小鼠胰島損傷可能會有保護(hù)作用。維生素E可能通過增加SOD活性,增加GSH-px的濃度,降低MDA水平,減少脂質(zhì)過氧化,從而減少胰島素?fù)p傷;通過抑制激活的單核細(xì)胞分泌TNF-α、IL-6/8等細(xì)胞損傷因子,上調(diào)了PPARγ的m RNA,激活PPARγ表達(dá);通過緩解機(jī)體內(nèi)皮功能受損得到改善、DNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)大分子物質(zhì)過氧化程度得到有效抑制,來增強(qiáng)脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá),提高LC-PUFA的轉(zhuǎn)運(yùn)能力。本研究結(jié)果為臨床治療GDM引起的一些不良癥狀提供了理論和指導(dǎo)意義。
【關(guān)鍵詞】:妊娠糖尿病 宮內(nèi)生長發(fā)育遲緩 脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 VitE 氧化應(yīng)激 炎癥因子
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R714
【目錄】:
- 英文縮略詞5-6
- 中文摘要6-9
- 英文摘要9-12
- 1 前言12-13
- 2 材料與方法13-22
- 3 結(jié)果22-38
- 3.1 維生素E對GDM孕鼠及胎鼠一般狀況的影響22-28
- 3.2 維生素E對GDM孕鼠血清脂質(zhì)過氧化e笥跋
本文編號:357317
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