本文關(guān)鍵詞：中國河北地區(qū)漢族女性苗勒氏管發(fā)育異常與TBX6基因突變的相關(guān)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:苗勒氏管發(fā)育異常(Müllerian Ducts Anomalies,MDA)是一類罕見的先天性女性生殖道缺失或嚴(yán)重畸形的疾病,主要是由于在胚胎時期因各種原因,將來發(fā)育成為子宮、宮頸、輸卵管和陰道上部的苗勒氏管單側(cè)或雙側(cè)發(fā)育停滯、發(fā)育不良、融合不全或吸收異常,從而導(dǎo)致了一系列女性生殖器官缺失或畸形,如先天性無子宮無陰道(Mayer-Rokitansky-KüsterHauser syndrome,MRKH綜合征)、雙子宮雙宮頸、單角子宮、縱隔子宮、陰道縱隔、陰道閉鎖等。苗勒氏管發(fā)育異常可導(dǎo)致患者閉經(jīng)、性生活困難、不良妊娠結(jié)局等,極度影響了患者的身心健康。迄今為止先天性苗勒氏管發(fā)育異常的發(fā)病原因尚不完全明確,多數(shù)學(xué)者認(rèn)為是多基因多因素聯(lián)合作用所致。目前已發(fā)現(xiàn)若干候選基因與苗勒氏管發(fā)育異常有關(guān)。候選基因之一TBX6基因,屬于T-box基因家族,對胚胎發(fā)育和器官形成的正常調(diào)控起著重要作用。本研究旨在通過篩查中國河北地區(qū)漢族女性苗勒氏管發(fā)育異常是否存在TBX6基因的突變來探討兩者的相關(guān)性。方法:1臨床資料收集:病例組:2013年3月至2014年11月期間,于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院就診或隨訪的,經(jīng)婦科檢查及輔助檢查中B超、宮腔鏡、腹腔鏡或子宮輸卵管造影術(shù)至少兩項后,由兩名婦科主任醫(yī)師診斷明確的97例苗勒氏管發(fā)育異�；颊�,對照組為110例同時期因輸卵管妊娠入院手術(shù)治療但排除生殖系統(tǒng)發(fā)育異常的女性,至少有一次正常妊娠,無其他任何基礎(chǔ)疾病及各種系統(tǒng)發(fā)育畸形,無生殖系統(tǒng)發(fā)育異常家族史。病例組及對照組成員均來自中國河北省地區(qū)且分布相似,均為漢族,其核型均正常(46,XX),第二性征均發(fā)育正常,均排除性腺發(fā)育異常及先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥。病例組包括MRKH綜合征患者32例、始基子宮合并無陰道患者3例、雙子宮雙宮頸合并完全性陰道縱隔患者1例、雙子宮雙/單宮頸不合并陰道縱隔患者4例、縱隔子宮(完全或不完全)伴陰道縱隔患者12例,縱隔子宮(完全或不完全)不伴陰道縱隔患者11例,雙角子宮患者4例,單角子宮合并/不合并殘角子宮患者16例,弓形子宮患者2例,陰道斜隔綜合征(表現(xiàn)為雙子宮雙宮頸,陰道斜隔完全或不完全地閉鎖一側(cè)陰道,斜隔同側(cè)的腎臟缺如,oblique vaginal septum syndrome,OVSS)患者6例,陰道上段閉鎖合并/不合并宮頸發(fā)育不良伴有功能內(nèi)膜子宮患者4例,陰道橫隔患者2例。獲知情同意后抽取病例組及對照組成員的外周靜脈血編號凍存。2提取全基因組DNA、擴(kuò)增及測序:提取病例組及對照組外周靜脈血中全基因組DNA,通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)對TBX6基因的9個外顯子及外顯子-內(nèi)含子邊界分別進(jìn)行擴(kuò)增,通過瓊脂糖凝膠電泳與DNA Marker比對確定為目的片段后進(jìn)行純化,采用Sanger測序法進(jìn)行DNA序列檢測。3測序結(jié)果分析統(tǒng)計:以美國國立生物技術(shù)信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)數(shù)據(jù)庫中正常TBX6基因序列為標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)用Mutation Surveyor軟件進(jìn)行序列分析比對,應(yīng)用軟件SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計分析,對檢測到的錯義突變應(yīng)用電腦軟件SIFT(Sorting Intolerant from Tolerant)及Poly Phen2(Polymorphism Phenotyping v2)進(jìn)行突變位點功能預(yù)測。計量資料以中位數(shù)表示,頻數(shù)資料比較采用卡方檢驗,P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1病例組與對照組成員的來源地區(qū)分布無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.755,P0.05)。2統(tǒng)計臨床病例資料顯示,病例組的苗勒氏管發(fā)育異常合并其他系統(tǒng)畸形患者共24例(24/97,24.74%),其中合并兩個及以上系統(tǒng)畸形的患者為6例(6/97,6.19%)。病例組中所出現(xiàn)的合并畸形包括先天性脊柱側(cè)彎5例(5/97,5.15%),先天性脊柱椎體發(fā)育不良1例(1/97,1.03%),脊柱裂1例(1/97,1.03%),先天性肋骨發(fā)育異常4例(4/97,4.12%),先天性四肢畸形/多指(趾)/少指(趾)3例(3/97,3.09%),單腎缺如12例(12/97,12.37%),腎異位2例(2/97,2.06%),先天性膀胱頸狹窄1例(1/97,1.03%),先天性心臟病2例(2/97,2.06%),先天性肛門閉鎖1例(1/97,1.03%),先天性梅克爾憩室1例(1/97,1.03%),先天性腹股溝斜疝2例(2/97,2.06%)。在合并的所有畸形類型中骨骼系統(tǒng)畸形占40.00%(14/35),泌尿系統(tǒng)畸形占42.86%(15/35),心臟畸形占5.71%(2/35),消化系統(tǒng)畸形占5.71%(2/35),其他畸形占5.71%(2/35)。3病例組及對照組中均于TBX6基因第4外顯子發(fā)現(xiàn)突變c.484GA,為單核苷酸多態(tài)性數(shù)據(jù)庫(database of Single Nucleotide Polymorphisms,db SNP)中已知的SNP(rs56098093)。3.1突變基因型(GA+AA)的頻率病例組(9/97,9.3%)高于對照組(3/110,2.7%),有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.044,P0.05)。該多態(tài)位點的最小等位基因頻率(Minor Allele Frequency,MAF)病例組(10/194,5.2%)高于對照組(3/220,1.4%),有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.027,P0.05)。3.2 c.484GA是錯義突變,導(dǎo)致氨基酸序列第162位的甘氨酸(Gly)被絲氨酸(Ser)替代,即p.Gly162Ser,點突變對蛋白功能影響預(yù)測軟件SIFT預(yù)測分?jǐn)?shù)為0,Poly Phen2預(yù)測分?jǐn)?shù)為1。3.3病例組中雜合突變(基因型為GA)患者為8例,包括4例MRKH綜合征、1例始基子宮無陰道、1例單角子宮合并殘角子宮、1例縱隔子宮合并陰道縱隔,1例陰道斜隔綜合征,除此之外,在病例組中發(fā)現(xiàn)1例MRKH綜合征患者為純合突變(基因型AA),但對照組中未發(fā)現(xiàn)純合突變。3.4該位點于MRKH綜合征患者的突變率(5/32,15.6%)與其他類型MDA患者的突變率(4/65,6.2%)無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.151,P0.05)。3.5病例組所有突變患者中有4例合并其他系統(tǒng)發(fā)育異常,合并其他系統(tǒng)畸形的MDA患者的突變率(4/24,16.7%)與未合并其他系統(tǒng)畸形的MDA患者的突變率(5/73,6.8%)無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.219,P0.05)。4病例組及對照組中均于TBX6基因第9外顯子發(fā)現(xiàn)突變c.1227GA,為db SNP中已知的SNP(rs2289292),突變基因型(GA+AA)頻率病例組(61/97,66.5%)與對照組(71/110,64.5%)無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.804,P0.05);其MAF病例組(71/194,36.6%)與對照組(87/220,39.5%)無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.538,P0.05);此為同義突變,不引起氨基酸改變(p.Pro409=)。5在對照組中進(jìn)行兩個檢測到的多態(tài)位點rs56098093及rs2289292的基因型頻率進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡檢驗,P值分別為0.99、0.89,符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律(P0.05)。結(jié)論:1本研究中病例組及對照組成員的來源地區(qū)分布相似,對照組成員來自遺傳穩(wěn)定的群體,因此本研究中兩組進(jìn)行基因比較具有參考意義。2中國河北地區(qū)漢族女性苗勒氏管發(fā)育異常表現(xiàn)多樣,可合并多種其他系統(tǒng)畸形,其中以骨骼系統(tǒng)畸形及泌尿系統(tǒng)畸形多見。3位于TBX6基因4號外顯子中的SNP位點rs56098093極可能影響基因表達(dá)及蛋白功能,是有害突變。該多態(tài)性位點可能與中國河北地區(qū)漢族女性的苗勒氏管發(fā)育異常有關(guān),但與MDA是否為MRKH綜合征或其他類型無關(guān),與是否合并其他系統(tǒng)畸形無關(guān)。4位于TBX6基因9號外顯子中的SNP位點rs2289292可能與中國河北地區(qū)漢族女性的苗勒氏管發(fā)育異常無關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：苗勒氏管發(fā)育異常 MRKH綜合征 TBX6基因 生殖道畸形 基因突變 基因測序 單核苷酸多態(tài)性
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R711.1
【目錄】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-13
• 英文縮寫13-14
• 前言14
• 材料與方法14-25
• 結(jié)果25-27
• 附圖27-28
• 附表28-33
• 討論33-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 綜述 先天性苗勒氏管發(fā)育異常遺傳因素的研究進(jìn)展45-67
• 參考文獻(xiàn)57-67
• 致謝67-68
• 個人簡歷68

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 洪添吾,張文彬;腹膜后苗勒氏管源性囊腫1例報告[J];中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2000年01期

2 郭正聲,陳瑞珠;中期妊娠伴苗勒氏管癌1例[J];中國腫瘤臨床;2002年04期

3 張祥盛;;苗勒氏管保存綜合癥(附一例報告)[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1986年01期

4 周榮祥;劉明廷;候成玉;;巨大苗勒氏管源性囊腫一例報告[J];天津醫(yī)藥;1986年08期

5 周為民,金遵禹;腹膜后巨大苗勒氏管囊腺腫1例報告[J];江蘇醫(yī)藥;1994年02期

6 錢開宇;余哠;王少剛;葉章群;;苗勒氏管源性囊腫3例診治報告并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2011年05期

7 黃安培;崔成虎;;雌雄雞胚苗勒氏管腺苷酸環(huán)化酶活性的比較研究[J];川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1989年02期

8 喬新民;腹膜后巨大苗勒氏管源性囊腫1例報告[J];北京醫(yī)學(xué);1993年06期

9 周紅薇，方國玲;左腹膜后苗勒氏管源性囊腫一例[J];河南腫瘤學(xué)雜志;1996年04期

10 白叔坤,黃永芝;苗勒氏管綜合征1例報告[J];男性學(xué)雜志;1998年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 朱波;楊國奮;梅卓賢;;女性苗勒氏管腫瘤41例臨床研究[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會論文集[C];2000年

2 侯英;孫榮國;;苗勒氏管永存綜合征(附4例報告)[A];中華醫(yī)學(xué)會第八次全國小兒外科學(xué)術(shù)會論文集[C];2010年

  本文關(guān)鍵詞：中國河北地區(qū)漢族女性苗勒氏管發(fā)育異常與TBX6基因突變的相關(guān)性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：355967