發(fā)布時(shí)間：2021-12-19 07:12

　　背景:盆腔器官脫垂（pelvic organ prolapse,POP）是指盆腔器官脫出于陰道內(nèi)或陰道外,嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。POP是一種多病因疾病,如陰道分娩次數(shù)、年齡、體重指數(shù)等均被認(rèn)為與POP的發(fā)生相關(guān)�；蛉毕輰�(dǎo)致盆底細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)及功能異常是女性POP發(fā)生發(fā)展的重要分子基礎(chǔ)。膠原纖維和彈力纖維作為細(xì)胞外基質(zhì)的重要組成部分,以筋膜、韌帶等形式給予盆底組織抗拉伸強(qiáng)度,在維持盆底器官正常位置和功能中發(fā)揮重要作用。盆底韌帶和筋膜主要細(xì)胞是成纖維細(xì)胞。微小RNA（microRNA,miRNA）為長度約19-22個(gè)核苷酸的非編碼RNA,在轉(zhuǎn)錄后調(diào)控基因表達(dá)。miR-200b已被確認(rèn)參與多種纖維化疾病,如肺纖維化、腎臟纖維化和心臟纖維化等。目的:探討microRNA-200b在體外原代及傳代培養(yǎng)的盆腔器官脫垂患者子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞中的表達(dá),進(jìn)而為盆腔器官脫垂的發(fā)病機(jī)制和未來的治療提供可行的理論基礎(chǔ)與方法指導(dǎo)。方法:1.收集因盆腔器官脫垂（根據(jù)盆腔脫垂定量分期法II期或以上）行子宮切除術(shù)患者的子宮旁骶韌帶標(biāo)本10例作為實(shí)驗(yàn)組,收集無盆腔器官脫垂行子宮切除術(shù)患者子宮旁骶韌帶標(biāo)本10例作為... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組人子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞生長狀態(tài)（倒置相差顯微鏡×100）1

結(jié)果9結(jié)果1成纖維細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組種植同數(shù)量細(xì)胞培養(yǎng)15天后，觀察貼壁的人子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞多呈長梭形，彼此連接密集排列，呈旋渦狀或放射狀排列，境界清楚，胞體較大，胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，多呈橢圓形，與正常子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞相比，盆腔器官脫垂子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞數(shù)量較少，較稀疏。(結(jié)果如圖1所示)圖1對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組人子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞生長狀態(tài)（倒置相差顯微鏡×100）12細(xì)胞的免疫組化鑒定波形蛋白（Vimentin）染色結(jié)果示，倒置相差顯微鏡下觀察，圍繞細(xì)胞核周圍呈現(xiàn)棕黃色顆粒狀，定位于胞質(zhì)內(nèi)，細(xì)胞核不染色，呈藍(lán)色，證明為成纖維細(xì)胞。（結(jié)果如圖2所示）圖2人子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞免疫組化染色（倒置相差顯微鏡×400）21圖A為正常子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞，圖B為盆腔器官脫垂子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞。2圖A為正常子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞，圖B為盆腔器官脫垂子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞。ABAB

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文103細(xì)胞的免疫熒光鑒定由于成纖維細(xì)胞高表達(dá)Vimentin，我們?cè)诩す夤簿劢癸@微鏡下觀察結(jié)果顯示，在成纖維細(xì)胞的胞漿中，可見Vimentin陽性的細(xì)胞發(fā)出彌漫性強(qiáng)綠色熒光，證明我們所培養(yǎng)的細(xì)胞為成纖維細(xì)胞，再通過DAPI染細(xì)胞核可以計(jì)算總的細(xì)胞數(shù)。（結(jié)果如圖3所示）圖3人子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞免疫熒光染色（激光共聚焦顯微鏡×400）34實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相關(guān)特征比較我們對(duì)實(shí)驗(yàn)組及正常對(duì)照組在年齡、體重指數(shù)、盆腔器官脫垂家族史人數(shù)比例、絕經(jīng)期人數(shù)比例及正常自然分娩情況之間采用相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均>0.05）,說明這20例樣本組間匹配良好，具有可比性。結(jié)果如下表6所示。表6實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組患者相關(guān)臨床特征比較相關(guān)特征實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組P（n=10）（n=10）年齡51.40±3.8149.30±3.500.215體重指數(shù)24.85±1.7824.09±1.880.362盆腔器官脫垂家族史（人數(shù)（%））3（30.00）1（10.0）0.582絕經(jīng)期（人數(shù)（%））5（50.00）3（30.00）0.650正常自然分娩數(shù)1.70±0.671.30±0.650.2025兩組患者miR-200b基因表達(dá)量比較我們獲得的溶解曲線為單峰曲線，記錄兩組實(shí)驗(yàn)樣本miR-200b與U6對(duì)應(yīng)的Ct值，進(jìn)行計(jì)算，使用2-△△Ct來表示miR-200b基因在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組中的表達(dá)差異，2-△△Ct〉1，表示miRNA的表達(dá)水平上調(diào)，反之，2-△△Ct〈1，表示miRNA的表達(dá)水平下調(diào)。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，盆腔器官脫垂患者子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞與非盆腔器官脫垂患者子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞相比，2-△△Ct〉1，表示表達(dá)水平上調(diào)，且P〈0.01，3圖A正常子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞，圖B為盆腔器官脫垂子宮旁骶韌帶成纖維細(xì)胞。AB


本文編號(hào)：3543990