促排卵周期未成熟卵母細胞體外成熟的發(fā)育潛能研究及其線粒體膜電位檢測
本文關(guān)鍵詞:促排卵周期未成熟卵母細胞體外成熟的發(fā)育潛能研究及其線粒體膜電位檢測,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:第一部分 促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母細胞體外培養(yǎng)中的應用目的通過對不孕癥患者促排卵治療周期獲得的未成熟卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)研究,評價FSH/HCG在促排卵周期未成熟卵母細胞體外培養(yǎng)過程中的應用價值。方法收集控制性超促排卵周期行ICSI過程中得到的MI期和GV期卵母細胞,分別隨機分為加FSH/HCG培養(yǎng)組和不加FSH/HCG培養(yǎng)組,培養(yǎng)24小時~28小時后成熟卵母細胞進行ICSI授精,并觀察胚胎發(fā)育情況,記錄成熟率、受精率,卵裂率和優(yōu)胚率。結(jié)果對于MI期卵母細胞,是否使用FSH/HCG不影響其24小時成熟率、受精率、分裂率和優(yōu)胚率(p0.05)。對于GV期卵母細胞,培養(yǎng)液中加入FSH/HCG顯著提高優(yōu)質(zhì)胚胎率(31.3%VS4.2%,p0.05),但兩組的成熟率,受精率和卵裂率沒有顯著差異(P0.05)。結(jié)論控制性超促排卵中獲得的未成熟卵母細胞進一步體外培養(yǎng)可以自然成熟,在GV期卵母細胞培養(yǎng)過程中加入FSH/HCG能夠改善體外培養(yǎng)結(jié)果。第二部分線粒體膜電位檢測在評價體外成熟卵母細胞發(fā)育潛能中的應用目的通過激光共聚焦熒光顯微鏡觀察不同獲取時期、不同培養(yǎng)時間的體外成熟卵母細胞的線粒體膜電位情況,評估線粒體膜電位檢測對體外成熟卵母細胞發(fā)育潛能的應用價值。方法收集常規(guī)促排卵周期行ICSI過程剩余的未成熟卵母細胞(MI和GV),隨機分為兩組,分別于24小時后和48小時后通過激光共聚焦熒光顯微鏡觀察成熟后經(jīng)JC-1(5,5',6,6'-tetrachloro-1,1',3,3'-tetraethylbenzimidazolcarbocy anine iodide)染色的MII期卵母細胞的線粒體膜電位,其紅色熒光主要呈三種狀態(tài)分布即卵母細胞近皮質(zhì)的周邊分布、胞質(zhì)內(nèi)的點狀分布、極少觀測到。結(jié)果24小時成熟卵母細胞與48小時成熟卵母細胞,雖然隨著時間的延長,周邊分布的比利大大降低,但與其他分布結(jié)果相比沒有顯著性差異(P0.05)。對于GV期卵母細胞,D1天與D2天成熟的卵母細胞的線粒體膜電位的熒光分布沒有顯著性差異(P0.05)。對于MI期卵母細胞,D2天相對于D1天成熟的卵母細胞,線粒體膜電位周邊分布更少,但與D1天成熟卵母細胞相比沒有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論 線粒體膜電位的檢測僅可以部分的反應體外成熟的卵母細胞的活性和發(fā)育潛能,我們觀察到,延遲成熟的卵母細胞較早成熟的卵母細胞的線粒體膜電位更低,反映了卵母細胞代謝能力的下降,可以在一定程度上預示著其發(fā)育潛能的降低。
【關(guān)鍵詞】:未成熟卵母細胞 FSH LH 體外成熟 ICSI 未成熟卵母細胞 體外成熟 ICSI 激光共聚焦顯微鏡 JC-1
【學位授予單位】:山東大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R714.8
【目錄】:
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 符號說明10-11
- 研究一 促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母細胞體外培養(yǎng)中的應用11-20
- 1.1 前言11
- 1.2 資料方法11-16
- 1.3 結(jié)果16-17
- 1.4 討論17-19
- 1.5 結(jié)論19-20
- 研究二 線粒體膜電位檢測在評價體外成熟卵母細胞發(fā)育潛能中的應用20-30
- 2.1 前言20-22
- 2.2 資料方法22-26
- 2.3 結(jié)果26-27
- 2.4 討論27-29
- 2.5 結(jié)論29-30
- 附表(圖)30-35
- 參考文獻35-38
- 致謝38-39
- 攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄39-40
- 學位論文評閱及答辯情況表40
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本文關(guān)鍵詞:促排卵周期未成熟卵母細胞體外成熟的發(fā)育潛能研究及其線粒體膜電位檢測,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:349903
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