目的:（1）探討單用Buformin對人宮頸癌細胞的增殖及侵襲的抑制作用及其機制。（2）探討單用Buformin對人宮頸癌細胞葡萄糖攝取及ATP產(chǎn)生的影響。（3）探討B(tài)uformin聯(lián)合臨床一線宮頸癌化療藥對人宮頸癌細胞的協(xié)同抑制作用。（4）探討單用Buformin及聯(lián)合化療藥紫杉醇對裸鼠人宮頸癌細胞移植瘤的增殖抑制作用。方法:（1）CCK-8法及克隆形成實驗檢測遞增濃度的Buformin對人宮頸癌細胞Hela、Siha、C33A和HCC94增殖能力的影響,繪制生長曲線,計算半數(shù)抑制濃度IC50值;（2）Transwell細胞體外侵襲實驗檢測Buformin對人宮頸癌細胞Siha和C33A侵襲的影響,并檢測侵襲相關(guān)蛋白MMP9的表達情況;（3）流式細胞分選技術(shù)檢測Buformin對人宮頸癌細胞Siha、C33A和HCC94的凋亡及細胞周期的影響;（4）分別檢測Buformin對人宮頸癌細胞Siha、C33A和HCC94細胞內(nèi)葡萄糖攝取、LDH活性、乳酸產(chǎn)生及ATP生成情況的影響;（5）Western-blot檢測Buformin處理后對人宮頸癌細胞內(nèi)AMPK磷酸化激活情況及AMPK/m... 

【文章來源】：江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

AMPK/mTOR通路示意圖

第二章 Buformin 對宮頸癌細胞的抑制作用100、500、1000、2000μM。經(jīng)過 72 小時 Buformin 處理，根據(jù) CC胞增殖曲線圖，如圖 2-1，隨著 Buformin 濃度的遞增，細胞活性逐到抑制。計算各細胞的半數(shù)抑制濃度 IC50，可得 C33A、Hcc94 和 S36.2μM、166.1μM 和 622.8μM；而對 Hela 細胞增殖的抑制不如其他50=1202μM。Hela 細胞為宮頸腺癌細胞，其余均為宮頸癌鱗癌細胞 對 Hela 細胞的增殖抑制作用稍弱于其他細胞株可能與細胞類型有上的病理類型為鱗癌。以下實驗選取敏感細胞株 C33A、Hcc94 和

圖 2-1 Buformin 抑制 Hela、Siha、C33A、HCC94 細胞增殖趨勢圖進一步檢測 Buformin 對單個宮頸癌細胞的增殖抑制能力，我們選用 Siha、C33A、HCC94 細胞進行細胞克隆形成能力實驗，根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果選取小于三者 IC50 的濃度（100μM）進行實驗處理。實驗結(jié)果顯示，與對照組相比,100μM Buformin 處理兩周，大幅減少了 C33A、Hcc94 和 SiHa 細胞的克隆集落形成數(shù)量，如圖 2-2，計算得 C33AHcc94 和 SiHa 細胞的克隆形成率分別為對照組的 40%、37%、56%（P=0.001, 0.001 和0.029）。


本文編號：3431789