目的探討Sam68基因?qū)θ俗訉m內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖的影響。方法建立Sam68穩(wěn)定干擾和過(guò)表達(dá)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株,Real-time PCR和Western blot驗(yàn)證干擾和過(guò)表達(dá)效率,MTT法、平板克隆法、軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)、BrdU法檢測(cè)沉默及過(guò)表達(dá)Sam68基因?qū)ψ訉m內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖活力的影響。結(jié)果利用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體成功構(gòu)建了Sam68 RNAi/HEC-1A、Sam68 RNAi/RL952以及Sam68 pc DNA-3/Ishikawa子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞模型。沉默Sam68基因可降低子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖,抑制細(xì)胞的集落形成能力,而過(guò)表達(dá)則效果相反。結(jié)論利用RNAi靶向沉默Sam68基因可有效抑制人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖,過(guò)表達(dá)則可促進(jìn)增殖。Sam68在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展中可能起到癌基因的作用。 

【文章來(lái)源】：廣東醫(yī)學(xué). 2020,41(20)

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.2 實(shí)時(shí)定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法分析
    1.3 子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染siRNA及過(guò)表達(dá)Sam68
    1.4 MTT法
    1.5 平板克隆實(shí)驗(yàn)
    1.6 軟瓊脂(soft agar)克隆形成實(shí)驗(yàn)
    1.7 BrdU細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中Sam68 mRNA及蛋白較正常子宮內(nèi)膜組織表達(dá)升高
    2.2 成功構(gòu)建Sam68
    2.3 敲除Sam68基因可抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖
    2.4 過(guò)表達(dá)Sam68基因可促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖
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