目的探討Sam68基因對人子宮內膜癌細胞增殖的影響。方法建立Sam68穩(wěn)定干擾和過表達子宮內膜癌細胞株,Real-time PCR和Western blot驗證干擾和過表達效率,MTT法、平板克隆法、軟瓊脂克隆形成實驗、BrdU法檢測沉默及過表達Sam68基因對子宮內膜癌細胞增殖活力的影響。結果利用逆轉錄病毒載體成功構建了Sam68 RNAi/HEC-1A、Sam68 RNAi/RL952以及Sam68 pc DNA-3/Ishikawa子宮內膜癌細胞模型。沉默Sam68基因可降低子宮內膜癌細胞增殖,抑制細胞的集落形成能力,而過表達則效果相反。結論利用RNAi靶向沉默Sam68基因可有效抑制人子宮內膜癌細胞的增殖,過表達則可促進增殖。Sam68在子宮內膜癌的發(fā)生發(fā)展中可能起到癌基因的作用。 

【文章來源】：廣東醫(yī)學. 2020,41(20)

【文章頁數】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞培養(yǎng)
    1.2 實時定量PCR和蛋白質印跡法分析
    1.3 子宮內膜癌細胞轉染siRNA及過表達Sam68
    1.4 MTT法
    1.5 平板克隆實驗
    1.6 軟瓊脂(soft agar)克隆形成實驗
    1.7 BrdU細胞增殖實驗
    1.8 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 人子宮內膜癌細胞中Sam68 mRNA及蛋白較正常子宮內膜組織表達升高
    2.2 成功構建Sam68
    2.3 敲除Sam68基因可抑制子宮內膜癌細胞增殖
    2.4 過表達Sam68基因可促進子宮內膜癌細胞增殖
3 討論



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