本文關(guān)鍵詞：卵巢透明細(xì)胞癌PIK3CA基因突變與擴(kuò)增研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討卵巢透明細(xì)胞癌中PIK3CA基因的突變與擴(kuò)增情況。 方法：應(yīng)用DNA測(cè)序和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分析了51例卵巢透明細(xì)胞癌患者DNA，檢測(cè)PIK3CA基因外顯子9和外顯子20的突變與擴(kuò)增情況；對(duì)于新發(fā)現(xiàn)的PIK3CA突變，通過(guò)在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)外源性突變基因并檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Akt磷酸化水平，分析該突變的生物學(xué)意義。 結(jié)果：共發(fā)現(xiàn)9（9/51）例患者有PIK3CA基因的錯(cuò)義突變，其中6例為外顯子9E545A突變，2例為外顯子20H1047R突變，，另一例突變?yōu)樾掳l(fā)現(xiàn)的外顯子9T544P突變，該突變可導(dǎo)致細(xì)胞Akt磷酸化水平增加；在6（6/51）例卵巢透明細(xì)胞癌中檢測(cè)出了PIK3CA基因的擴(kuò)增陽(yáng)性，但PIK3CA基因的突變與擴(kuò)增之間無(wú)相關(guān)性。 結(jié)論：在卵巢透明細(xì)胞癌中PIK3CA基因突變和擴(kuò)增的頻率相對(duì)較低；PIK3CA基因的變異可能在卵巢透明細(xì)胞癌的一些亞型發(fā)揮作用。
【關(guān)鍵詞】：卵巢透明細(xì)胞癌 PIK3CA基因 突變 擴(kuò)增
【學(xué)位授予單位】：武漢科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.31;R440
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 引言8-10
• 1 實(shí)驗(yàn)材料與方法10-23
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料10-13
• 1.1.1 腫瘤標(biāo)本、細(xì)胞株及試劑10-11
• 1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備及儀器11
• 1.1.3 常用試劑的配制11-12
• 1.1.4 培養(yǎng)基配制12-13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法13-23
• 1.2.1 石蠟切片中提取 DNA13-14
• 1.2.2 擴(kuò)增外顯子 9 和 2014
• 1.2.3 PCR 產(chǎn)物純化及測(cè)序14-15
• 1.2.4 突變型 PIK3CA 質(zhì)粒的構(gòu)建15-18
• 1.2.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染18
• 1.2.6 Western Blot18-21
• 1.2.7 PIK3CA 擴(kuò)增水平的檢測(cè)21-22
• 1.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理22-23
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-30
• 2.1 病例基本資料23-24
• 2.2 OCCC 和正常卵巢組織病理切片24-25
• 2.3 OCCC 中 PIK3CA 基因突變分析25-27
• 2.4 定點(diǎn)突變載體構(gòu)建結(jié)果27-28
• 2.5 野生型和突變型 PIK3CA 基因?qū)?xì)胞 Akt 磷酸化的影響28-29
• 2.6 OCCC 中 PIK3CA 基因擴(kuò)增水平分析29-30
• 3 討論30-32
• 參考文獻(xiàn)32-36
• 致謝36-37
• 綜述37-49
• 參考文獻(xiàn)44-49
• 附錄 1 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文49-50
• 附錄 2 攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目50

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：337521