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卵巢透明細胞癌PIK3CA基因突變與擴增研究

發(fā)布時間:2017-04-30 20:21

  本文關(guān)鍵詞:卵巢透明細胞癌PIK3CA基因突變與擴增研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:探討卵巢透明細胞癌中PIK3CA基因的突變與擴增情況。 方法:應(yīng)用DNA測序和實時熒光定量PCR技術(shù)分析了51例卵巢透明細胞癌患者DNA,檢測PIK3CA基因外顯子9和外顯子20的突變與擴增情況;對于新發(fā)現(xiàn)的PIK3CA突變,通過在細胞內(nèi)表達外源性突變基因并檢測細胞內(nèi)Akt磷酸化水平,分析該突變的生物學(xué)意義。 結(jié)果:共發(fā)現(xiàn)9(9/51)例患者有PIK3CA基因的錯義突變,其中6例為外顯子9E545A突變,2例為外顯子20H1047R突變,,另一例突變?yōu)樾掳l(fā)現(xiàn)的外顯子9T544P突變,該突變可導(dǎo)致細胞Akt磷酸化水平增加;在6(6/51)例卵巢透明細胞癌中檢測出了PIK3CA基因的擴增陽性,但PIK3CA基因的突變與擴增之間無相關(guān)性。 結(jié)論:在卵巢透明細胞癌中PIK3CA基因突變和擴增的頻率相對較低;PIK3CA基因的變異可能在卵巢透明細胞癌的一些亞型發(fā)揮作用。
【關(guān)鍵詞】:卵巢透明細胞癌 PIK3CA基因 突變 擴增
【學(xué)位授予單位】:武漢科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R737.31;R440
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-8
  • 引言8-10
  • 1 實驗材料與方法10-23
  • 1.1 實驗材料10-13
  • 1.1.1 腫瘤標(biāo)本、細胞株及試劑10-11
  • 1.1.2 主要實驗設(shè)備及儀器11
  • 1.1.3 常用試劑的配制11-12
  • 1.1.4 培養(yǎng)基配制12-13
  • 1.2 實驗方法13-23
  • 1.2.1 石蠟切片中提取 DNA13-14
  • 1.2.2 擴增外顯子 9 和 2014
  • 1.2.3 PCR 產(chǎn)物純化及測序14-15
  • 1.2.4 突變型 PIK3CA 質(zhì)粒的構(gòu)建15-18
  • 1.2.5 細胞轉(zhuǎn)染18
  • 1.2.6 Western Blot18-21
  • 1.2.7 PIK3CA 擴增水平的檢測21-22
  • 1.2.8 統(tǒng)計學(xué)處理22-23
  • 2 實驗結(jié)果23-30
  • 2.1 病例基本資料23-24
  • 2.2 OCCC 和正常卵巢組織病理切片24-25
  • 2.3 OCCC 中 PIK3CA 基因突變分析25-27
  • 2.4 定點突變載體構(gòu)建結(jié)果27-28
  • 2.5 野生型和突變型 PIK3CA 基因?qū)毎?Akt 磷酸化的影響28-29
  • 2.6 OCCC 中 PIK3CA 基因擴增水平分析29-30
  • 3 討論30-32
  • 參考文獻32-36
  • 致謝36-37
  • 綜述37-49
  • 參考文獻44-49
  • 附錄 1 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文49-50
  • 附錄 2 攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項目50

【參考文獻】

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本文編號:337521

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