雌激素及雌激素誘導(dǎo)產(chǎn)生的VEGF、bFGF對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞PI3K/AKT通路影響的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-08-31 06:56
背景子宮內(nèi)膜癌(endometrial cancer, EC)是女性生殖道常見的惡性腫瘤之一,近年來發(fā)病率呈上升趨勢(shì),但其確切病因尚未明確。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為與內(nèi)源性和外源性的雌激素長期刺激子宮內(nèi)膜并缺乏孕激素拮抗密切相關(guān)。但雌激素如何調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖的作用機(jī)制尚不清楚。本課題研究表明1×10-6mol/L雌激素作用于子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞30分鐘后,血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(Basic Fibroblast Growth Factor,bFGF)mRNA及蛋白的表達(dá)均明顯增高。而新血管的形成和細(xì)胞對(duì)缺氧環(huán)境的適應(yīng)是腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵。同時(shí)腫瘤的形成涉及多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)節(jié),磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(Phosphatidy linositol-3kinase(P13K)-serine/threonine protein kinase B,PKBor AKT)通路是膜受體信號(hào)向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要途徑,調(diào)節(jié)著機(jī)體細(xì)胞的生長、分化、分裂、死亡以及細(xì)胞間功能同步化等多種過程。磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B能被多種...
【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:99 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
主要縮略詞
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 雌激素誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞產(chǎn)生的 VEGF、bFGF 對(duì) PI3K/AKT 通路的影響
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 細(xì)胞來源
1.1.2 主要試劑
1.1.3 主要儀器設(shè)備:
1.1.4 主要試劑及配制:
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與傳代
1.2.2 細(xì)胞分組及藥物處理
1.2.3 Real‐time PCR 檢測(cè) AKT、PI3K、VEGF、bFGF 基因 mRNA 的表達(dá)
1.2.4 Western Blot 檢測(cè) VEGF、bFGF、AKT、PI3K 蛋白的表達(dá)
1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:
2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 western blot 測(cè)定不同藥物濃度作用下 AKT 蛋白的表達(dá)
2.1.1 雌激素作用的濃度
2.1.2 雌激素作用不同時(shí)間
2.1.3 LY294002 作用不同濃度
2.1.4 LY294002 作用不同時(shí)間
2.1.5 RNA 質(zhì)檢
2.1.6 E2 及 LY294002 作用于子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì) AKT、PI3K、VEGF、bFGF 的影響
2.2
2.2.1 Bibf1120 的作用時(shí)間
2.2.2 Bibf1120 作用于子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì) AKT、PI3K、VEGF 的影響
2.3
2.3.1 Ponatinib 的作用時(shí)間
2.3.2 E2 及 Ponatinib 作用于子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì) AKT、PI3K、bFGF 的影響
3 討論
4 結(jié)論
第二章 子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞在雌激素及 LY294002、Bibf1120 及 Ponatinib 作用下其生物學(xué)功能的影響體外研究
1
1.1 材料
1.1.1 細(xì)胞來源
1.1.2 主要試劑
1.1.3 主要儀器設(shè)備:
1.1.4 主要試劑及配制:
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與傳代
1.2.2 細(xì)胞分組
1.2.3 MTT 測(cè)生長曲線:
1.2.4 細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)
1.2.5 細(xì)胞體外遷移能力的測(cè)定
1.2.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡的變化
1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 MTT 測(cè)生長曲線結(jié)果
2.2 細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3 細(xì)胞體外侵襲能力測(cè)定的結(jié)果
2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期的結(jié)果
2.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡的結(jié)果
3. 討論
4、結(jié)論
第三章 雌激素促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展(綜述)
全文小結(jié)
展望與不足
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雌激素誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞血管因子生成的作用[J]. 邱雁,陸媛媛,張潔清. 中國癌癥防治雜志. 2012(01)
[2]雌二醇對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞AKT通路中細(xì)胞因子的影響[J]. 丁蘭芳,王曉謙,陸媛媛,宋紅林,李力,張潔清. 中國腫瘤臨床. 2011(20)
[3]pAKT和VEGF在Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌的表達(dá)及其臨床意義[J]. 崔彬,姜漢國,肖靜穎. 實(shí)用癌癥雜志. 2009(03)
[4]PI3K-Akt信號(hào)通路與腫瘤細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 黃秀蘭,崔國輝,周克元. 癌癥. 2008(03)
[5]子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中細(xì)胞膜雌激素受體表達(dá)的初步研究[J]. 王志啟,王建六,魏麗惠,趙丹,高敏,郭瑞霞. 中華婦產(chǎn)科雜志. 2006(07)
[6]PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展[J]. 夏曙,于世英. 腫瘤. 2006(06)
[7]bFGF單克隆抗體對(duì)卵巢癌移植瘤血管生成的抑制作用[J]. 林衛(wèi),楊延林,彭芝蘭,黃仲英,王光林. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展. 2005(04)
[8]CD44v6、bcl-2和VEGF在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)及其意義[J]. 項(xiàng)達(dá)軍,薛文群,馮一中,陸以農(nóng),陳萍倩,王嘉園. 癌癥. 2003(06)
[9]子宮內(nèi)膜癌組織堿性成纖維細(xì)胞生長因子表達(dá)和微血管密度的臨床研究[J]. 白曉紅,糜若然. 中華婦產(chǎn)科雜志. 2000(06)
[10]女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤組織胞漿雌激素及孕激素受體的研究[J]. 韓守威,何斌,唐茜萍,劉珊玲,彭芝蘭,曹澤毅. 中華婦產(chǎn)科雜志. 1994(01)
本文編號(hào):3374429
【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:99 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
主要縮略詞
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 雌激素誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞產(chǎn)生的 VEGF、bFGF 對(duì) PI3K/AKT 通路的影響
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 細(xì)胞來源
1.1.2 主要試劑
1.1.3 主要儀器設(shè)備:
1.1.4 主要試劑及配制:
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與傳代
1.2.2 細(xì)胞分組及藥物處理
1.2.3 Real‐time PCR 檢測(cè) AKT、PI3K、VEGF、bFGF 基因 mRNA 的表達(dá)
1.2.4 Western Blot 檢測(cè) VEGF、bFGF、AKT、PI3K 蛋白的表達(dá)
1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:
2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 western blot 測(cè)定不同藥物濃度作用下 AKT 蛋白的表達(dá)
2.1.1 雌激素作用的濃度
2.1.2 雌激素作用不同時(shí)間
2.1.3 LY294002 作用不同濃度
2.1.4 LY294002 作用不同時(shí)間
2.1.5 RNA 質(zhì)檢
2.1.6 E2 及 LY294002 作用于子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì) AKT、PI3K、VEGF、bFGF 的影響
2.2
2.2.1 Bibf1120 的作用時(shí)間
2.2.2 Bibf1120 作用于子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì) AKT、PI3K、VEGF 的影響
2.3
2.3.1 Ponatinib 的作用時(shí)間
2.3.2 E2 及 Ponatinib 作用于子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì) AKT、PI3K、bFGF 的影響
3 討論
4 結(jié)論
第二章 子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞在雌激素及 LY294002、Bibf1120 及 Ponatinib 作用下其生物學(xué)功能的影響體外研究
1
1.1 材料
1.1.1 細(xì)胞來源
1.1.2 主要試劑
1.1.3 主要儀器設(shè)備:
1.1.4 主要試劑及配制:
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與傳代
1.2.2 細(xì)胞分組
1.2.3 MTT 測(cè)生長曲線:
1.2.4 細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)
1.2.5 細(xì)胞體外遷移能力的測(cè)定
1.2.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡的變化
1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 MTT 測(cè)生長曲線結(jié)果
2.2 細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3 細(xì)胞體外侵襲能力測(cè)定的結(jié)果
2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期的結(jié)果
2.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡的結(jié)果
3. 討論
4、結(jié)論
第三章 雌激素促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展(綜述)
全文小結(jié)
展望與不足
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雌激素誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞血管因子生成的作用[J]. 邱雁,陸媛媛,張潔清. 中國癌癥防治雜志. 2012(01)
[2]雌二醇對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞AKT通路中細(xì)胞因子的影響[J]. 丁蘭芳,王曉謙,陸媛媛,宋紅林,李力,張潔清. 中國腫瘤臨床. 2011(20)
[3]pAKT和VEGF在Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌的表達(dá)及其臨床意義[J]. 崔彬,姜漢國,肖靜穎. 實(shí)用癌癥雜志. 2009(03)
[4]PI3K-Akt信號(hào)通路與腫瘤細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 黃秀蘭,崔國輝,周克元. 癌癥. 2008(03)
[5]子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中細(xì)胞膜雌激素受體表達(dá)的初步研究[J]. 王志啟,王建六,魏麗惠,趙丹,高敏,郭瑞霞. 中華婦產(chǎn)科雜志. 2006(07)
[6]PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展[J]. 夏曙,于世英. 腫瘤. 2006(06)
[7]bFGF單克隆抗體對(duì)卵巢癌移植瘤血管生成的抑制作用[J]. 林衛(wèi),楊延林,彭芝蘭,黃仲英,王光林. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展. 2005(04)
[8]CD44v6、bcl-2和VEGF在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)及其意義[J]. 項(xiàng)達(dá)軍,薛文群,馮一中,陸以農(nóng),陳萍倩,王嘉園. 癌癥. 2003(06)
[9]子宮內(nèi)膜癌組織堿性成纖維細(xì)胞生長因子表達(dá)和微血管密度的臨床研究[J]. 白曉紅,糜若然. 中華婦產(chǎn)科雜志. 2000(06)
[10]女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤組織胞漿雌激素及孕激素受體的研究[J]. 韓守威,何斌,唐茜萍,劉珊玲,彭芝蘭,曹澤毅. 中華婦產(chǎn)科雜志. 1994(01)
本文編號(hào):3374429
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