第一部分超重或肥胖患者卵泡液和顆粒細胞內(nèi)氧化應(yīng)激、凋亡以及Chemerin/CMKLR1分子水平的檢測目的:通過收集接受IVF/ICSI的超重或肥胖女性（超重組）以及BMI在正常范圍（對照組）的卵泡液和顆粒細胞檢測兩組氧化應(yīng)激、凋亡以及chemerin/CMKLR1分子水平的變化。方法:采用流式細胞術(shù)的方法檢測超重組和對照組顆粒細胞內(nèi)活性氧分子（ROS）的水平,RT-PCR檢測兩組顆粒細胞中抗氧化酶SOD1、SOD2、CAT和Gpx的轉(zhuǎn)錄水平;RT-PCR和Western Blot檢測兩組顆粒細胞的凋亡水平;ELISA檢測兩組卵泡液的chemerin含量,同時RT-PCR和Western Blot檢測兩組顆粒細胞chemerin及其受體CMKLR1的表達差異。結(jié)果:（1）與對照組相比,超重組的女性顆粒細胞中ROS水平升高,SOD2轉(zhuǎn)錄水平明顯下調(diào),Gpx轉(zhuǎn)錄水平明顯上升;（2）與對照組相比,超重組的女性顆粒細胞中促凋亡因子Bax/抗凋亡因子Bcl2的m RNA比例明顯上升,活化的caspase-3蛋白水平明顯上升;（3）與對照組相比,超重組的女性卵泡液中chemerin水平明顯升高,同... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：132 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

流式細胞術(shù)檢測超重組和對照組顆粒細胞ROS水平

超重組和對照組顆粒細胞凋亡水平的比較我們通過RT-PCR檢測凋亡相關(guān)基因Bax和Bcl2的mRNA水平，通過Wester凋亡執(zhí)行蛋白活化的 caspase-3 蛋白水平比較超重組和對照組顆粒細胞的凋結(jié)果發(fā)現(xiàn)超重組女性顆粒細胞中促凋亡基因 Bax 的轉(zhuǎn)錄水平較對照組明顯上超重組抗凋亡基因 Bcl2 表達沒有明顯下降，但 Bax/Bcl2 mRNA 的比值明顯升超重組女性顆粒細胞的線粒體凋亡通路 Bax/Bcl2 激活（圖 3）。同時實驗結(jié)化的 caspase-3 蛋白水平明顯升高（圖 4）。圖 2 RT-PCR 檢測超重組和對照組顆粒細胞抗氧化酶水平ABCD 圖分別為對照組和超重組顆粒細胞 SOD1、SOD2、CAT 和 Gpx mRN相對表達量，其中超重組 n=15，對照組 n=12，B、D 圖中*表示 P＜0.0

圖 3 RT-PCR 檢測超重組和對照組顆粒細胞凋亡相關(guān)蛋白轉(zhuǎn)錄組水平從左到右分別為對照組和超重組顆粒細胞 Bax、Bcl2 和 Bax/Bcl2 的 mRNA 的相對表達量，其中超重組 n=15，對照組 n=12， **表示 P＜0.01。圖 4 Western Blot 檢測超重組和對照組顆粒細胞活化的 caspase-3 水平


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