目的:全氟辛酸（PFOA）是一種化學(xué)合成物,是環(huán)境中的持續(xù)污染物。由于其耐水且不易分解,近來廣泛應(yīng)用于手工業(yè)品制造,并發(fā)現(xiàn)其廣泛存在于環(huán)境包括飲用水中。PFOA與多種疾病有關(guān),包括多種腫瘤相關(guān)疾病。然而,PFOA暴露是否與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)及其分子機(jī)制現(xiàn)尚無研究報道。上皮間質(zhì)化（EMT）促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖及侵襲。細(xì)胞表面分子標(biāo)記物如E-cadherin的下調(diào)是腫瘤細(xì)胞發(fā)生EMT并侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟。本研究探討了PFOA促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)子宮內(nèi)膜癌Ishikawa及ECC-1細(xì)胞（RPMI-1640）,MTT及Transwell實(shí)驗(yàn)方法檢測50nMPFOA,ERK1/2抑制劑 U0126（10μM）+PFOA,mTOR通路抑制劑rapamycin（濃度為250nM）+PFOA分別作用不同時間后對細(xì)胞增殖及侵襲作用的影響;并采用western blot,免疫熒光,RT-PCR等方法探究PFOA促進(jìn)細(xì)胞侵襲能力增強(qiáng)的機(jī)制;將Ishikawa細(xì)胞種植于6周齡裸鼠,隨機(jī)分為對照組,PFOA實(shí)驗(yàn)組,PFOA+ rapamycin實(shí)驗(yàn)組,從而檢測移植瘤的大小;w... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１：?ＰＦＯＡ促進(jìn)人Ｉｓｈｉｋａｗａ子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的遷移及侵襲．Ａ．分別用０，１，５，１０，５０，??１００，１５０?ｎＭ濃度的ＰＦＯＡ處理細(xì)胞４８小時后ＭＴＴ法評估細(xì)胞增殖

記物Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ及間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物Ｖｉｍｅｎｔｉｎ的表達(dá)。正如我們所想，實(shí)驗(yàn)顯??示，與對照組相比，邱０Ａ組Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ表達(dá)在ｍＲＮＡ及蛋白水平均顯著下調(diào)（如??圖２Ａ，２Ｂ所示）。而且，與對照組相比，免疫巧光實(shí)驗(yàn)顯示Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ表達(dá)顯??著下降（如圖２Ｃ所示）。此外，盡管ＰＦＯＡ組間質(zhì)上皮細(xì)胞標(biāo)記物Ｖｉｍｅｎｔｉｎ在??ｍＲＮＡ及蛋白水平均捏度上升，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Ｗ上結(jié)果均顯示在人子宮內(nèi)膜??癌細(xì)胞中，ＰＦＯＡ作用后可能會促進(jìn)ＥＭＴ發(fā)生。??？?＊??２８??

?南京醫(yī)科大學(xué)博－上學(xué)位論文??同時ＰＦＯＡ并未改變ＲＰ％的總體水平（如圖３Ａ所示）；這表明ＰＦＯＡ激活了ｍＴＯＲ??通路的下游啟動子ＲＰＳ６。經(jīng)文獻(xiàn)查詢發(fā)現(xiàn)：ＥＭＴ現(xiàn)象中ＰＤＫ／ＡＫＴ及ＥＲＫ均可??能激活參與調(diào)節(jié)ＲＰ％的表達(dá)［４７，氣因此，為檢驗(yàn)是否ＰＦＯＡ激活了?Ｉｓｈｉｋａｗａ細(xì)胞??中的這兩種信號通路，我們檢測了ＡＫＴ及ＥＲＫ１／２的磯酸化水平。結(jié)果顯示；??ＰＦＯＡ處理３，６，或２４小時后，并未觀察到ＡＫＴ或ＥＲＫ１／２礎(chǔ)酸化水平改變（如??圖３Ａ所示）。于是，我們縮短的ＰＦＯＡ作用的時間，進(jìn)一步檢測ＡＫＴ或ＥＲＫ１／２磯??酸化水平改變。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ＰＦＯＡ作用Ｉｓｈｉｋａｗａ細(xì)胞僅僅１５分鐘時，ＥＲＫ１／２的??磯酸化尤其是ＥＲＫ２的稱酸化就被激活；而在ＰＦＯＡ刺激細(xì)胞１小時左右磯酸化??水平則逐漸下降與對照組一致（如圖３Ｂ所示）。即短暫暴露于ＰＦＯＡ后，Ｉｓｈｉｋａｗａ??細(xì)胞中ＥＲＫ１／２被激活，其磯酸化水平短暫性升高。相反，我們觀察到在ＰＦＯＡ處??理后的２４小時內(nèi)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3240888