目的:本課題旨在探討NOX1在卵巢癌系A(chǔ)2780和SK-OV-3細(xì)胞中對(duì)細(xì)胞上皮細(xì)胞-間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）過(guò)程的調(diào)控作用,為卵巢癌的篩查、診斷及臨床治療提供新的思路。方法:1利用細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù)在卵巢癌細(xì)胞中過(guò)表達(dá)NOX1蛋白;2利用shRNA基因沉默技術(shù)和慢病感染技術(shù)構(gòu)建穩(wěn)定敲低NOX1基因的卵巢癌細(xì)胞株;3利用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)NOX1基因敲低對(duì)細(xì)胞克隆形成能力的影響;4利用MTT法檢測(cè)NOX1基因敲低對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響;5利用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)NOX1基因敲低對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響;6利用Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)NOX1基因敲低對(duì)細(xì)胞遷移能力、侵襲能力的影響;7利用蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)表達(dá)NOX1蛋白和敲低NOX1基因?qū)?xì)胞EMT相關(guān)分子標(biāo)記物表達(dá)水平的影響。結(jié)果:1蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)表達(dá)NOX1蛋白對(duì)細(xì)胞EMT相關(guān)分子標(biāo)記物表達(dá)水平的影響結(jié)果顯示,與對(duì)照細(xì)胞株相比,在A2780細(xì)胞和SK-OV-3細(xì)胞中過(guò)表達(dá)NOX1蛋白后,將會(huì)降低細(xì)胞中E-cadherin蛋白表達(dá)水平,同時(shí)提高N-cadherin和V... 

【文章來(lái)源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁(yè)數(shù)】：87 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Westernblot檢測(cè)NOX1過(guò)表達(dá)對(duì)A2780細(xì)胞EMT相關(guān)標(biāo)記物E-cadherin、N-cadherin及Vimentin表達(dá)水平的影響

圖 2 western blot 檢測(cè) NOX1 過(guò)表達(dá)對(duì) SK-OV-3 細(xì)胞 EMT 相關(guān)標(biāo)記物E-cadherin、N-cadherin 及 Vimentin 表達(dá)水平的影響Figure 2 The protein expression of EMT-related markers inNOX1-overexpressing SK-OV-3 cellsVector：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染對(duì)照質(zhì)粒 pcDNA3.1-Vector；NOX1：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染 NOX1 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒 pcDNA3.1-NOX1；*：p<0.05；**：p<0.01；2 穩(wěn)定敲低 NOX1 基因卵巢癌細(xì)胞株的構(gòu)建為了進(jìn)一步研究 NOX1 對(duì)卵巢細(xì)胞 EMT 的影響，本研究通過(guò)慢病毒感染構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株的方法，分別構(gòu)建了穩(wěn)定敲低 NOX1 基因

2780 細(xì)胞和 SK-OV-3 細(xì)胞，以及相應(yīng)的對(duì)照細(xì)胞株，rn blot 法檢測(cè) NOX1 敲低效率。結(jié)果顯示，與對(duì)照細(xì)胞株0 細(xì)胞感染慢病毒 shNOX1 1#和 shNOX1 2#后，都成功1 基因的表達(dá)水平；與對(duì)照細(xì)胞株相比，SK-OV-3 細(xì)胞感NOX1 1#后，也成功敲低了 NOX1 基因的表達(dá)水平（圖 續(xù)實(shí)驗(yàn)中，所用 NOX1 敲低細(xì)胞株都為 shNOX1 1#慢病

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Relationship between expression of NADPH oxidase 2 and invasion and prognosis of human gastric cancer[J]. Peng Wang,Qiao Shi,Wen-Hong Deng,Jia Yu,Teng Zuo,Fang-Chao Mei,Wei-Xing Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2015(20)



本文編號(hào)：3227196