目的:本課題旨在探討NOX1在卵巢癌系A(chǔ)2780和SK-OV-3細胞中對細胞上皮細胞-間充質(zhì)細胞轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）過程的調(diào)控作用,為卵巢癌的篩查、診斷及臨床治療提供新的思路。方法:1利用細胞瞬時轉(zhuǎn)染技術(shù)在卵巢癌細胞中過表達NOX1蛋白;2利用shRNA基因沉默技術(shù)和慢病感染技術(shù)構(gòu)建穩(wěn)定敲低NOX1基因的卵巢癌細胞株;3利用平板克隆形成實驗檢測NOX1基因敲低對細胞克隆形成能力的影響;4利用MTT法檢測NOX1基因敲低對細胞增殖能力的影響;5利用劃痕實驗檢測NOX1基因敲低對細胞遷移能力的影響;6利用Transwell實驗檢測NOX1基因敲低對細胞遷移能力、侵襲能力的影響;7利用蛋白免疫印跡實驗檢測過表達NOX1蛋白和敲低NOX1基因?qū)毎鸈MT相關(guān)分子標(biāo)記物表達水平的影響。結(jié)果:1蛋白免疫印跡實驗檢測過表達NOX1蛋白對細胞EMT相關(guān)分子標(biāo)記物表達水平的影響結(jié)果顯示,與對照細胞株相比,在A2780細胞和SK-OV-3細胞中過表達NOX1蛋白后,將會降低細胞中E-cadherin蛋白表達水平,同時提高N-cadherin和V... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Westernblot檢測NOX1過表達對A2780細胞EMT相關(guān)標(biāo)記物E-cadherin、N-cadherin及Vimentin表達水平的影響

圖 2 western blot 檢測 NOX1 過表達對 SK-OV-3 細胞 EMT 相關(guān)標(biāo)記物E-cadherin、N-cadherin 及 Vimentin 表達水平的影響Figure 2 The protein expression of EMT-related markers inNOX1-overexpressing SK-OV-3 cellsVector：瞬時轉(zhuǎn)染對照質(zhì)粒 pcDNA3.1-Vector；NOX1：瞬時轉(zhuǎn)染 NOX1 過表達質(zhì)粒 pcDNA3.1-NOX1；*：p<0.05；**：p<0.01；2 穩(wěn)定敲低 NOX1 基因卵巢癌細胞株的構(gòu)建為了進一步研究 NOX1 對卵巢細胞 EMT 的影響，本研究通過慢病毒感染構(gòu)建穩(wěn)定細胞株的方法，分別構(gòu)建了穩(wěn)定敲低 NOX1 基因

2780 細胞和 SK-OV-3 細胞，以及相應(yīng)的對照細胞株，rn blot 法檢測 NOX1 敲低效率。結(jié)果顯示，與對照細胞株0 細胞感染慢病毒 shNOX1 1#和 shNOX1 2#后，都成功1 基因的表達水平；與對照細胞株相比，SK-OV-3 細胞感NOX1 1#后，也成功敲低了 NOX1 基因的表達水平（圖 續(xù)實驗中，所用 NOX1 敲低細胞株都為 shNOX1 1#慢病

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Relationship between expression of NADPH oxidase 2 and invasion and prognosis of human gastric cancer[J]. Peng Wang,Qiao Shi,Wen-Hong Deng,Jia Yu,Teng Zuo,Fang-Chao Mei,Wei-Xing Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2015(20)



本文編號：3227196