宮頸癌是全球女性生殖系統(tǒng)腫瘤中最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。在發(fā)達(dá)國(guó)家中,宮頸鱗癌不僅是發(fā)病率最高的婦科生殖系統(tǒng)腫瘤,死亡率也是高居第二位,僅次于卵巢癌患者的死亡率。至今為止,宮頸癌轉(zhuǎn)移的機(jī)制仍然未完全清楚。所以尋找有關(guān)影響宮頸癌侵襲和轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物,研究其侵襲和轉(zhuǎn)移機(jī)制,是目前宮頸癌研究方向的熱點(diǎn)。Mfn2蛋白是由人類(lèi)1號(hào)染色體短臂上Mfn2基因編碼的線(xiàn)粒體蛋白,包含19個(gè)外顯子,可以編碼含有757個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。Mfn2分布于人類(lèi)各組織器官細(xì)胞的線(xiàn)粒體中,包括女性生殖道,宮頸細(xì)胞等等,可以通過(guò)調(diào)控線(xiàn)粒體融合強(qiáng)度,維持和穩(wěn)定機(jī)體局部微環(huán)境狀態(tài)。根據(jù)不同類(lèi)型的腫瘤及腫瘤病理分型,Mfn2扮演著不同的作用,可以促進(jìn)或抑制惡性腫瘤的發(fā)生。而且Mfn2也與一些細(xì)胞的自我凋亡和自噬的相關(guān)信號(hào)通路有關(guān)。目前尚未發(fā)現(xiàn)關(guān)于Mfn2在宮頸惡性腫瘤中的表達(dá)及相關(guān)作用的研究。因此,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)以下三部分對(duì)Mfn2在宮頸癌中表達(dá)及對(duì)其增殖,遷移和侵襲的作用及其潛在的分子機(jī)制進(jìn)行初步探討。第一部分檢測(cè)Mfn2在宮頸癌組織和宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)情況目的:探討Mfn2在宮頸癌組織和宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)情況及與臨床病理參數(shù)... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

檢測(cè)Mfn2在宮頸癌組和細(xì)胞株中表達(dá)情況

圖 2.（A）Mfn2 在不同宮頸癌細(xì)胞株的蛋白表達(dá)水平。（B）Mfn2 在不同宮頸癌細(xì)胞株中的mRNA 的表達(dá)水平。Figure 2. (A) Mfn2 protein expression levels in different cervical cancer cell lines. (B) Mfn2mRNA expression in different cervical cancer cell lines.2.3 Mfn2 在宮頸癌組織和臨近正常組織中的表達(dá)情況。我們通過(guò)免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)組織芯片中宮頸癌組織中 Mfn2 的表達(dá)情況。結(jié)果顯示：在 70 例芯片中，有 49 例宮頸鱗癌，6 例宮頸腺癌，15 例癌旁宮頸組織，免疫組化結(jié)果示（圖 3）：在宮頸鱗癌和腺癌組織中 Mfn2 的表達(dá)水平明顯高于癌旁宮頸組織（P<0.05）,宮頸鱗癌和腺癌之間 Mfn2 的表達(dá)陽(yáng)性率無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與患者年齡和腫瘤病理類(lèi)型無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與腫瘤病理分期相關(guān)，隨著期別的增高，Mfn2 的表達(dá)水平相應(yīng)上調(diào)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）（表 1）。表 1.Mfn2 和宮頸癌臨床病理參數(shù) 間的聯(lián)系

圖 3.（A）免疫熒光檢測(cè) LV3-Mfn2 慢病毒轉(zhuǎn)染效率。（B）Westeren blotting 檢測(cè) LV3-Mfn2對(duì)宮頸癌細(xì)胞株 Mfn2 表達(dá)水平的影響。Figure 3. (A) LV3-Mfn2 lentivirus transfection efficiency was detected by Immunofluorescence.(B) The effect of LV3-Mfn2 on the expression of Mfn2 in cervical cancer cell line was detectedby western blotting.2.1.2 沉默 Mfn2 的表達(dá)對(duì)宮頸癌細(xì)胞株的增殖轉(zhuǎn)染 LV3-Mfn2 慢病毒過(guò)后，通過(guò) CCK-8 實(shí)驗(yàn)和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)宮頸癌細(xì)胞株增殖能力的變化。我們用 CCK-8 試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖能力，結(jié)果如圖 4 所示，與 LV3-NC 組和空白組相比，LV3-Mfn2 組細(xì)胞的增殖能力出現(xiàn)下降

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3225755