目的:卵巢早衰是當(dāng)今女性不孕的主要原因之一。由于原始卵泡儲備較少且成熟障礙,導(dǎo)致自然受孕率極低,因此如何激活殘余的原始卵泡成為治療的關(guān)鍵。2013年日本學(xué)者通過片段化卵巢皮質(zhì)體外激活劑共培養(yǎng)激活休眠的原始卵泡獲得一例妊娠,2016年我國學(xué)者僅通過片段化皮質(zhì)移植也成功獲得妊娠。由于體外激活劑安全性未知,且卵巢皮質(zhì)移植后沒有快速的血管吻合和血供建立,早期處于一種缺血缺氧狀態(tài),引起大量卵泡丟失等問題,該項(xiàng)技術(shù)仍處于探索階段。本實(shí)驗(yàn)通過在體刺激早衰小鼠卵巢,檢測處理前后各組卵泡數(shù)目及前后激素變化,探究卵巢早衰患者輔助生殖技術(shù)的新方法及其運(yùn)用的可行性。材料與方法:本研究采取環(huán)磷酰胺構(gòu)建早衰小鼠模型,將全部小鼠分為6組,空白對照組、模型對照組、實(shí)驗(yàn)組A、實(shí)驗(yàn)組B、老年對照組、老年實(shí)驗(yàn)組。取眶后靜脈血備用后實(shí)驗(yàn)組針刺雙側(cè)卵巢各25次,深度約1mm,對照組僅需探查見卵巢即可關(guān)腹。除實(shí)驗(yàn)組B于術(shù)后第10d促排卵,第13d處死外,其余各組于術(shù)后第5d給予促排卵,第8d處死。取雙側(cè)卵巢組織及靜脈血,檢測處理前后激素水平變化及各組小鼠卵巢組織HE染色觀察各級卵泡數(shù)目。剩余造模小鼠于干預(yù)后1h取卵巢組織行免疫組... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組小鼠卵巢組織HE染色，200注：A：空白對照組；B：造模對照組；C：實(shí)驗(yàn)組A；D：實(shí)驗(yàn)組B；E：老年對照組；F：★

中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文14各組小鼠卵泡計(jì)數(shù)：與空白對照相比，模型對照組、老年對照組原始卵泡、生長卵泡數(shù)目下降（P<0.05），閉鎖卵泡數(shù)目增多差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與模型對照組相比，實(shí)驗(yàn)組A、實(shí)驗(yàn)組B及老年實(shí)驗(yàn)組生長卵泡數(shù)目增多，閉鎖卵泡數(shù)目減少，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），原始卵泡之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與老年實(shí)驗(yàn)組相比，實(shí)驗(yàn)組A、實(shí)驗(yàn)組B生長卵泡數(shù)目增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），閉鎖卵泡及原始卵泡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），實(shí)驗(yàn)組A、實(shí)驗(yàn)組B之間相互比較，各級卵泡數(shù)目均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表5、圖3。表5各組小鼠卵泡計(jì)數(shù)（x±s）組別n原始卵泡生長卵泡閉鎖卵泡空白對照組622.60±1.6746.40±7.406.40±1.14模型對照組617.20±1.92△27.00±4.69△10.20±0.84△實(shí)驗(yàn)組A1217.40±1.1440.20±4.14*8.00±1.58*實(shí)驗(yàn)組B1216.60±1.5843.20±4.82*7.20±1.60*老年對照組616.40±1.14△23.40±2.88△9.60±1.82△老年實(shí)驗(yàn)組615.80±0.8433.40±1.14*7.00±1.58*注：*與模型對照組和老年對照組相比，P<0.05；△與空白對照組相比，P<0.05。圖3各組小鼠卵泡計(jì)數(shù)比較3.4干預(yù)后YAP蛋白表達(dá)對干預(yù)1h后的卵巢內(nèi)YAP蛋白進(jìn)行免疫組化檢測，結(jié)果顯示干預(yù)1h后卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞YAP蛋白細(xì)胞核內(nèi)增加，刺激后1h卵巢YAP蛋白較未處理組增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果如圖4、圖5。

中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文15圖4免疫組化顯示YAP蛋白定位變化400圖5兩組YAP蛋白定量注：A：未干預(yù)組；B：干預(yù)組，箭頭指向YAP蛋白定位顆粒細(xì)胞核內(nèi)


本文編號：3225603