本文關(guān)鍵詞：ALDH1作為宮頸癌干細胞標志物的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究宮頸癌中ALDH1作為CCSCs標志物的可能性,以及SP與ALDH1聯(lián)合篩選CCSCs的可行性。研究方法1.利用流式分選技術(shù)獲得宮頸癌Si Ha細胞株及宮頸癌原代細胞的ALDH1high和ALDH1low細胞。2.采用無血清懸浮培養(yǎng)實驗觀察ALDH1high和ALDH1low細胞的自我更新能力。3.采用軟瓊脂克隆實驗驗證ALDH1high和ALDH1low細胞的增殖能力。4.采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(Real-Time PCR)技術(shù)檢測宮頸癌原代細胞ALDH1high和ALDH1low細胞中相關(guān)干性基因表達情況。5.利用流式分選技術(shù)將宮頸癌原代細胞進行SP及ALDH1聯(lián)合篩選,以判定兩者分選出的細胞亞群間的相互關(guān)系。結(jié)果1.經(jīng)流式分選技術(shù)檢測,宮頸癌Si Ha細胞株中ALDH1high細胞比例為(0.77±0.25)%(n=6),宮頸癌原代細胞中ALDH1high細胞比例為(3.13±0.85)%(n=6)。2.無血清懸浮培養(yǎng)實驗結(jié)果顯示,Si Ha細胞株中ALDH1high細胞的成球率為(12.91±3.94)%,明顯高于ALDH1low細胞的成球率(5.83±0.96)%,(n=4,P0.05);宮頸癌原代細胞中ALDH1high細胞的成球率為(22.92±2.84)%,也明顯高于ALDH1low細胞的成球率(8.33±4.90)%,(n=4,P0.05)。3.軟瓊脂克隆形成實驗結(jié)果顯示,Si Ha細胞株中ALDH1high細胞的克隆形成數(shù)為(26.17±7.63)/200 cells,明顯高于ALDH1low細胞的克隆形成數(shù)(12.83±2.56)/200 cells,(n=6,P0.05);宮頸癌原代細胞中ALDH1high細胞的克隆形成數(shù)(55.00±8.67)/200 cells,也明顯高于ALDH1low細胞的克隆形成數(shù)(23.67±3.93)/200 cells,(n=6,P0.05)。4.Real-Time PCR檢測宮頸癌原代細胞中ALDH1high細胞的CD24和CD44表達量分別是ALDH1low細胞的(2.23±0.33)倍和(1.87±0.12)倍(n=3,P0.05);而ALDH1high細胞的Nanog及Oct4的表達分別是ALDH1low細胞的(1.41±0.27)倍和(1.49±0.20)倍,(n=3,P0.05)。5.宮頸癌原代細胞的SP細胞中ALDH1high細胞的比例為0.75%,而NSP細胞中ALDH1high細胞比例為5.87%,SP和ALDH1high兩個細胞亞群不重疊。結(jié)論1.Si Ha細胞株及宮頸癌原代細胞中ALDH1high細胞亞群自我更新及增殖能力均高于ALDH1low細胞亞群;2.Si Ha細胞株及宮頸癌原代細胞中ALDH1high細胞亞群中干性基因表達高于ALDH1low細胞亞群;3.ALDH1可富集CCSCs,但分離純度不夠,不能單獨作為CCSCs分選的標志物;4.SP和ALDH1不能作為聯(lián)合篩選CCSCs的方法。
【關(guān)鍵詞】：ALDH1 腫瘤干細胞 宮頸癌 腫瘤干細胞標志物 SP
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 前言4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-12
• 英文縮略詞12-13
• 第1章 引言13-15
• 第2章 綜述15-22
• 2.1 宮頸癌干細胞標志物15-19
• 2.1.1 細胞角質(zhì)素類15-16
• 2.1.2 ABCG216-17
• 2.1.3 ALDH117
• 2.1.4 轉(zhuǎn)錄因子類17-18
• 2.1.5 細胞黏附分子類18-19
• 2.2 宮頸癌干細胞的分離方法19-20
• 2.2.1 側(cè)群細胞分選法19
• 2.2.2 懸浮球培養(yǎng)法19-20
• 2.2.3 免疫學分選法20
• 2.3 結(jié)語20-22
• 第3章 材料與方法22-28
• 3.1 材料22-24
• 3.1.1 細胞株及耗材22
• 3.1.2 主要試劑22-23
• 3.1.3 主要儀器23
• 3.1.4 主要試劑配制23-24
• 3.2 實驗方法24-28
• 3.2.1 Si Ha細胞株及宮頸癌原代細胞的ALDH1流式分選24
• 3.2.2 無血清懸浮培養(yǎng)實驗24-25
• 3.2.3 軟瓊脂克隆形成實驗25
• 3.2.4 Real-Time PCR技術(shù)檢測干性基因25-27
• 3.2.5 SP細胞中檢測ALDH1high比例27
• 3.2.6 統(tǒng)計分析27-28
• 第4章 結(jié)果28-36
• 4.1 Si Ha細胞株及宮頸癌原代細胞中ALDH1high細胞比例28
• 4.2 ALDH1high自我更新能力強于ALDH1low細胞28-30
• 4.3 ALDH1high細胞增殖能力強于ALDH1low細胞30-32
• 4.4 原代細胞ALDH1high和ALDH1low細胞干性基因比較32-34
• 4.5 宮頸癌原代細胞中SP細胞的ALDH1high細胞比例34-36
• 第5章 討論36-40
• 5.1 ALDH1亞群細胞的分選及其自我更新及增殖能力研究36-37
• 5.2 ALDH1high和ALDH1low細胞干性基因表達37-39
• 5.3 SP和ALDH1聯(lián)合篩選CCSCs39-40
• 第6章 結(jié)論40-41
• 參考文獻41-48
• 作者簡介48-49
• 致謝49

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 鄒愛梅;吳愛兵;黃維甄;張金標;謝劍明;李榮;羅榮城;;肺癌A549細胞株中ALDH1~+細胞的生物學功能研究[J];中國腫瘤臨床;2011年14期

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本文編號：322115