本文關(guān)鍵詞：ALDH1作為宮頸癌干細(xì)胞標(biāo)志物的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究宮頸癌中ALDH1作為CCSCs標(biāo)志物的可能性,以及SP與ALDH1聯(lián)合篩選CCSCs的可行性。研究方法1.利用流式分選技術(shù)獲得宮頸癌Si Ha細(xì)胞株及宮頸癌原代細(xì)胞的ALDH1high和ALDH1low細(xì)胞。2.采用無(wú)血清懸浮培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)觀察ALDH1high和ALDH1low細(xì)胞的自我更新能力。3.采用軟瓊脂克隆實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證ALDH1high和ALDH1low細(xì)胞的增殖能力。4.采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-Time PCR)技術(shù)檢測(cè)宮頸癌原代細(xì)胞ALDH1high和ALDH1low細(xì)胞中相關(guān)干性基因表達(dá)情況。5.利用流式分選技術(shù)將宮頸癌原代細(xì)胞進(jìn)行SP及ALDH1聯(lián)合篩選,以判定兩者分選出的細(xì)胞亞群間的相互關(guān)系。結(jié)果1.經(jīng)流式分選技術(shù)檢測(cè),宮頸癌Si Ha細(xì)胞株中ALDH1high細(xì)胞比例為(0.77±0.25)%(n=6),宮頸癌原代細(xì)胞中ALDH1high細(xì)胞比例為(3.13±0.85)%(n=6)。2.無(wú)血清懸浮培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,Si Ha細(xì)胞株中ALDH1high細(xì)胞的成球率為(12.91±3.94)%,明顯高于ALDH1low細(xì)胞的成球率(5.83±0.96)%,(n=4,P0.05);宮頸癌原代細(xì)胞中ALDH1high細(xì)胞的成球率為(22.92±2.84)%,也明顯高于ALDH1low細(xì)胞的成球率(8.33±4.90)%,(n=4,P0.05)。3.軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,Si Ha細(xì)胞株中ALDH1high細(xì)胞的克隆形成數(shù)為(26.17±7.63)/200 cells,明顯高于ALDH1low細(xì)胞的克隆形成數(shù)(12.83±2.56)/200 cells,(n=6,P0.05);宮頸癌原代細(xì)胞中ALDH1high細(xì)胞的克隆形成數(shù)(55.00±8.67)/200 cells,也明顯高于ALDH1low細(xì)胞的克隆形成數(shù)(23.67±3.93)/200 cells,(n=6,P0.05)。4.Real-Time PCR檢測(cè)宮頸癌原代細(xì)胞中ALDH1high細(xì)胞的CD24和CD44表達(dá)量分別是ALDH1low細(xì)胞的(2.23±0.33)倍和(1.87±0.12)倍(n=3,P0.05);而ALDH1high細(xì)胞的Nanog及Oct4的表達(dá)分別是ALDH1low細(xì)胞的(1.41±0.27)倍和(1.49±0.20)倍,(n=3,P0.05)。5.宮頸癌原代細(xì)胞的SP細(xì)胞中ALDH1high細(xì)胞的比例為0.75%,而NSP細(xì)胞中ALDH1high細(xì)胞比例為5.87%,SP和ALDH1high兩個(gè)細(xì)胞亞群不重疊。結(jié)論1.Si Ha細(xì)胞株及宮頸癌原代細(xì)胞中ALDH1high細(xì)胞亞群自我更新及增殖能力均高于ALDH1low細(xì)胞亞群;2.Si Ha細(xì)胞株及宮頸癌原代細(xì)胞中ALDH1high細(xì)胞亞群中干性基因表達(dá)高于ALDH1low細(xì)胞亞群;3.ALDH1可富集CCSCs,但分離純度不夠,不能單獨(dú)作為CCSCs分選的標(biāo)志物;4.SP和ALDH1不能作為聯(lián)合篩選CCSCs的方法。
【關(guān)鍵詞】：ALDH1 腫瘤干細(xì)胞 宮頸癌 腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物 SP
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 前言4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-12
• 英文縮略詞12-13
• 第1章 引言13-15
• 第2章 綜述15-22
• 2.1 宮頸癌干細(xì)胞標(biāo)志物15-19
• 2.1.1 細(xì)胞角質(zhì)素類15-16
• 2.1.2 ABCG216-17
• 2.1.3 ALDH117
• 2.1.4 轉(zhuǎn)錄因子類17-18
• 2.1.5 細(xì)胞黏附分子類18-19
• 2.2 宮頸癌干細(xì)胞的分離方法19-20
• 2.2.1 側(cè)群細(xì)胞分選法19
• 2.2.2 懸浮球培養(yǎng)法19-20
• 2.2.3 免疫學(xué)分選法20
• 2.3 結(jié)語(yǔ)20-22
• 第3章 材料與方法22-28
• 3.1 材料22-24
• 3.1.1 細(xì)胞株及耗材22
• 3.1.2 主要試劑22-23
• 3.1.3 主要儀器23
• 3.1.4 主要試劑配制23-24
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法24-28
• 3.2.1 Si Ha細(xì)胞株及宮頸癌原代細(xì)胞的ALDH1流式分選24
• 3.2.2 無(wú)血清懸浮培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)24-25
• 3.2.3 軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)25
• 3.2.4 Real-Time PCR技術(shù)檢測(cè)干性基因25-27
• 3.2.5 SP細(xì)胞中檢測(cè)ALDH1high比例27
• 3.2.6 統(tǒng)計(jì)分析27-28
• 第4章 結(jié)果28-36
• 4.1 Si Ha細(xì)胞株及宮頸癌原代細(xì)胞中ALDH1high細(xì)胞比例28
• 4.2 ALDH1high自我更新能力強(qiáng)于ALDH1low細(xì)胞28-30
• 4.3 ALDH1high細(xì)胞增殖能力強(qiáng)于ALDH1low細(xì)胞30-32
• 4.4 原代細(xì)胞ALDH1high和ALDH1low細(xì)胞干性基因比較32-34
• 4.5 宮頸癌原代細(xì)胞中SP細(xì)胞的ALDH1high細(xì)胞比例34-36
• 第5章 討論36-40
• 5.1 ALDH1亞群細(xì)胞的分選及其自我更新及增殖能力研究36-37
• 5.2 ALDH1high和ALDH1low細(xì)胞干性基因表達(dá)37-39
• 5.3 SP和ALDH1聯(lián)合篩選CCSCs39-40
• 第6章 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-48
• 作者簡(jiǎn)介48-49
• 致謝49

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 鄒愛(ài)梅;吳愛(ài)兵;黃維甄;張金標(biāo);謝劍明;李榮;羅榮城;;肺癌A549細(xì)胞株中ALDH1~+細(xì)胞的生物學(xué)功能研究[J];中國(guó)腫瘤臨床;2011年14期

2 Eman H.Abdelbary;Hayam E.Rashed;Eman I.Ismail;Mohamed Abdelgawad;;大腸癌中腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD133,ALDH1和核β-catenin的預(yù)后價(jià)值(英文)[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2014年08期

3 許立國(guó);李惠翔;;乳腺癌組織中ALDH1、CXCR4及ABCG2與其分子亞型的關(guān)系[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2013年05期

4 ;[J];;年期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 張金金;ALDH1作為宮頸癌干細(xì)胞標(biāo)志物的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2016年

2 薛金慧;ALDH1在乳腺癌原發(fā)灶及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)及其與浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究[D];鄭州大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：ALDH1作為宮頸癌干細(xì)胞標(biāo)志物的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：322115