目的：從基因和蛋白的水平探討PI3K/Akt信號(hào)通路與人上皮性卵巢癌順鉑耐藥性的關(guān)系及其耐藥性可能的發(fā)生機(jī)制。為尋找逆轉(zhuǎn)卵巢癌化療耐藥的有效治療手段提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：1、人上皮性卵巢癌細(xì)胞SKOV3細(xì)胞培養(yǎng)于含10%FBS、含100U/ml雙抗的RPMI1640培養(yǎng)液，耐順鉑人上皮性卵巢癌SKOV3/DDP細(xì)胞培養(yǎng)于含0.375ug/mlDDP、10%FBS的RPMI1640（含100U/ml雙抗）培養(yǎng)液，兩種細(xì)胞均置于37℃，5%CO2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。對SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，繪制兩種細(xì)胞的細(xì)胞生長曲線。確定SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞的對數(shù)生長期為培養(yǎng)后的3-5天，取對數(shù)生長期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。2、四甲基偶氮唑鹽（MTT）比色法檢測SKOV3與SKOV3/DDP細(xì)胞的生長情況。3、實(shí)時(shí)定量PCR（Quantative Real-time PCR）法（簡稱Q-PCR法）檢測SKOV3與SKOV3/DDP細(xì)胞中AKT與PI3K基因的含量。4、蛋白免疫印跡（Western-blotting）法檢測SKOV3與SKOV3/DDP細(xì)胞中AKT、p-AKT和... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 實(shí)驗(yàn)對象與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)對象
        2.1.1 細(xì)胞株
        2.1.2 相關(guān)試劑及耗材
        2.1.3 相關(guān)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 試劑配制
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.3 繪制 SKOV3 與 SKOV3/DDP 細(xì)胞生長曲線
        2.2.4 MTT 法檢測 SKOV3 及 SKOV3/DDP 細(xì)胞生長
        2.2.5 Quantative Real-time PCR 法檢測 SKOV3 及 SKOV3/DDP 細(xì)胞中PI3K 與 Akt 基因的含量
        2.2.6 Western blot 檢測 SKOV3 及 SKOV3/DDP 細(xì)胞中 PI3K,Akt 及 p-Akt 蛋白的表達(dá)水平
        2.2.7 統(tǒng)計(jì)分析
第3章 結(jié)果
    3.1 SKOV3 及 SKOV3/DDP 細(xì)胞生長情況
        3.1.1 SKOV3 與 SKOV3/DDP 細(xì)胞生長曲線
        3.1.2. SKOV3 與 SKOV3/DDP 細(xì)胞生長情況
    3.2 SKOV3 及 SKOV3/DDP 細(xì)胞中 PI3K 與 Akt 基因的含量
        3.2.1 SKOV3 與 SKOV3/DDP 細(xì)胞的總 RNA 濃度
        3.2.2 分析和觀察 PI3K 與 Akt 基因 PCR 擴(kuò)增曲線
        3.2.3 SKOV3 及 SKOV3/DDP 細(xì)胞中 PI3K 基因的含量
        3.2.4 SKOV3 及 SKOV3/DDP 細(xì)胞中 Akt 基因的含量
    3.3 SKOV3 及 SKOV3/DDP 細(xì)胞中 PI3K,Akt 與 p-Akt 蛋白的表達(dá)水平
        3.3.1 SKOV3 及 SKOV3/DDP 細(xì)胞中 PI3K 蛋白的表達(dá)水平
        3.3.2 SKOV3 及 SKOV3/DDP 細(xì)胞中 Akt 與 p-Akt 蛋白的表達(dá)水平
第4章 討論
    4.1 SKOV3 與 SKOV3/DDP 細(xì)胞的生長特性
    4.2 PI3K/Akt 信號(hào)通路與上皮性卵巢癌
    4.3 PI3K/Akt 信號(hào)通路與卵巢癌順鉑耐藥性
        4.3.1 PI3K 與卵巢癌順鉑耐藥性
        4.3.2 Akt，p-Akt 與卵巢癌順鉑耐藥性
    4.4 PI3K/Akt 信號(hào)通路與卵巢癌順鉑耐藥機(jī)制
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成就
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3173526