目的:本研究旨在探究TFF3過表達(dá)對(duì)宮頸腺癌Hela細(xì)胞功能的影響,并探究其通過激活PI3K/Akt/Twist1信號(hào)通路進(jìn)一步引發(fā)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）參與宮頸腺癌的發(fā)生發(fā)展的可能機(jī)理。方法:以宮頸腺癌細(xì)胞系Hela為研究對(duì)象,構(gòu)建TFF3重組慢病毒載體,將其轉(zhuǎn)入Hela細(xì)胞并收集熒光表達(dá)豐富的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組（TFF3組）,將空載病毒轉(zhuǎn)入Hela細(xì)胞并收集熒光表達(dá)豐富的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞作為對(duì)照組（NC組）,應(yīng)用PI3K/Akt通路抑制劑LY294002處理TFF3過表達(dá)的Hela細(xì)胞作為LY294002組,應(yīng)用LY294002的溶劑DMSO處理TFF3過表達(dá)的Hela細(xì)胞作為DMSO組。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)TFF3過表達(dá)組和慢病毒陰性對(duì)照組細(xì)胞中TFF3 mRNA的水平,利用CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TFF3過表達(dá)對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響,利用細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TFF3過表達(dá)對(duì)細(xì)胞遷移和侵襲功能的影響,利用Western Blot法檢測(cè)TFF3過表達(dá)及過表達(dá)基礎(chǔ)上的通路抑制對(duì)PI3K/Akt/Twist1信號(hào)通路蛋白及EMT相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。應(yīng)用SPSS17.0... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料和方法
    1 儀器、試劑和耗材
    2 宮頸腺癌細(xì)胞系的選取、培養(yǎng)
    3 TFF3過表達(dá)慢病毒的構(gòu)建
    4 TFF3慢病毒感染Hela細(xì)胞
    5 實(shí)驗(yàn)處理因素及分組
    6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
    7 CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力
    8 細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力
    9 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力
    10 Wesrern Blot法檢測(cè)PI3K/Akt通路及EMT相關(guān)蛋白表達(dá)情況
    11 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    1 TFF3 過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)的Hela細(xì)胞株的篩選及獲得
    2 TFF3 過表達(dá)組與慢病毒陰性對(duì)照組Hela細(xì)胞TFF3 mRNA水平
    3 TFF3 過表達(dá)促進(jìn)Hela細(xì)胞增殖
    4 TFF3 過表達(dá)增強(qiáng)Hela細(xì)胞遷移能力
    5 TFF3 過表達(dá)增強(qiáng)Hela細(xì)胞侵襲能力
    6 TFF3 過表達(dá)對(duì)PI3K/Akt通路及EMT相關(guān)蛋白表達(dá)量的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述部分參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]TGF-β1誘導(dǎo)子宮頸腺癌Hela細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化mRNA和microRNA表達(dá)譜的研究[D]. 刁利梅.西南醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]葉酸受體α對(duì)宮頸癌細(xì)胞ERK信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用[D]. 康慧杰.山西醫(yī)科大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3167788