目的:女性卵泡隨著年齡的增加不斷被消耗,由卵泡耗竭引起的卵巢衰老是女性不可回避的生殖健康問題。雌性生殖干細(xì)胞具備分化成卵母細(xì)胞的能力并且能不斷地進(jìn)行自我更新,故而其可補(bǔ)充原始卵泡池,以延緩卵巢衰老。原花青素是公認(rèn)的天然抗氧化劑,對機(jī)體有抗衰老、抗炎癥等作用。本文通過細(xì)胞實驗探究原花青素是否能促進(jìn)雌性生殖干細(xì)胞增殖及其機(jī)制,通過動物實驗探究原花青素是否能延緩卵巢衰老。方法:在細(xì)胞實驗中,分離提取出小鼠雌性生殖干細(xì)胞并使用RT-PCR、免疫熒光染色、堿性磷酸酶染色鑒定其性能,通過細(xì)胞增殖結(jié)果篩選出原花青素最佳的給藥時間和濃度后,分為正常培養(yǎng)組（Control）和原花青素給藥組（PAC,10 mg/L）分別培養(yǎng)48 h后,測定其生殖干細(xì)胞標(biāo)志物MVH、Oct4和SIRT1、p53、p21的基因和蛋白質(zhì)表達(dá)量并探究其之間的關(guān)系;在動物實驗中,通過對小鼠腹腔注射CY/BUS構(gòu)建病理性卵巢衰老模型后,將其分為低劑量組（Treatment-low,100 mg/kg/d）、中劑量組（Treatment-mid,200mg/kg/d）、高劑量組（Treatment-high,400 mg/kg/d）,... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
    1.1 概述
    1.2 雌性生殖干細(xì)胞與卵巢功能
    1.3 SIRT1對卵巢功能的調(diào)節(jié)作用
    1.4 原花青素的生物學(xué)特性及對SIRT1 的作用
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要實驗試劑
        2.1.3 主要實驗儀器
        2.1.4 實驗藥物的配置
    2.2 實驗方法
        2.2.1 雌性生殖干細(xì)胞的分離提取及培養(yǎng)
        2.2.2 雌性生殖干細(xì)胞鑒定
        2.2.3 CCK-8細(xì)胞增殖測定
        2.2.4 實時熒光定量PCR
        2.2.5 Western blot
        2.2.6 實驗動物分組
        2.2.7 卵巢指數(shù)
        2.2.8 組織包埋及切片
        2.2.9 HE染色
        2.2.10 小鼠外周血中E2、AMH的測定
        2.2.11 數(shù)據(jù)處理與分析
第3章 結(jié)果與分析
    3.1 雌性生殖干細(xì)胞的鑒定
    3.2 原花青素對雌性生殖干細(xì)胞增殖的影響
        3.2.1 原花青素促進(jìn)雌性生殖干細(xì)胞增殖
        3.2.2 原花青素對雌性生殖干細(xì)胞標(biāo)志物MVH、Oct4 mRNA和蛋白的影響
        3.2.3 原花青素對SIRT1-p53-p21 mRNA和蛋白的影響
    3.3 原花青素對卵巢功能的影響
        3.3.1 原花青素對小鼠卵巢指數(shù)的影響
        3.3.2 原花青素對小鼠外周血中E2、AMH激素水平的影響
        3.3.3 原花青素對小鼠卵泡數(shù)的影響
第4章 討論
    4.1 原花青素促進(jìn)雌性生殖干細(xì)胞增殖
    4.2 原花青素拯救衰老卵巢的功能
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3162493