宮頸癌威脅著許多女性的身體健康,在大部分國家的女性惡性腫瘤中,宮頸癌的死亡率均排在前五,雖然適齡女性可以接種疫苗來預防大部分宮頸癌的發(fā)生,但是注射了疫苗不代表就不會患宮頸癌,近些年來世界上新增的宮頸癌患者以及因宮頸癌死亡的女性還很多,因此尋找生產(chǎn)成本低、療效佳、毒副作用相對較小的抗宮頸癌藥物具有極大的現(xiàn)實意義。馬杜霉素是一種聚醚類離子載體藥物,與其同屬聚醚類離子載體藥物的鹽霉素已被證實具有抗癌活性,因此推測其也可能具有抗癌活性。本研究以人宮頸癌HeLa細胞作為研究對象,選取馬杜霉素作為供試藥物,探究其是否有抗癌活性,并初步探究其與癌細胞的作用機理。其中,MTT法、臺盼藍計數(shù)法以及集落形成實驗應用于探究馬杜霉素對細胞增殖的影響;熒光相差顯微鏡可以觀察藥物處理后HeLa細胞及細胞核形態(tài)的變化;瓊脂糖凝膠電泳法檢測DNA斷裂;LDH釋放檢測細胞膜通透性;活性氧試劑盒檢測ROS含量變化;流式細胞儀用于檢測馬杜霉素對細胞周期和凋亡的影響;caspase活性檢測試劑盒檢測馬杜霉素對凋亡相關caspase酶活性的影響;Western Blot應用于分析細胞凋亡與自噬相關蛋白表達量的變化。細胞增殖實驗... 

【文章來源】：曲阜師范大學山東省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

015年全球部分國家70歲以下癌癥患者數(shù)量分布[10]

第一部分前言6中容易出現(xiàn)拌料不勻的情況，日積月累的飼喂還會出現(xiàn)毒素的累積損傷心肌細胞，所以已停止應用于養(yǎng)殖業(yè)[45,46]。圖1.2馬杜霉素的銨鹽形式分子結構圖[46]馬杜霉素是一種聚醚類離子載體藥物，相關研究表明，聚醚類離子載體擬環(huán)結構中的聚醚骨架能夠與金屬陽離子形成絡合物，改變陽離子遷移的機理并促進它們跨細胞膜的運輸，從而產(chǎn)生顯著的抗癌活性[44,47]。例如，同屬聚醚類離子載體藥物的鹽霉素不易耐藥且可以降低癌細胞對其他抗癌藥物的耐藥性[48,49]；莫能菌素可誘導多種癌癥的凋亡及自噬等[50-53]。然而，到目前為止，國內外尚未有馬杜霉素可以抗癌的報道，但馬杜霉素可誘導部分心肌細胞和成肌細胞的凋亡和自噬，其中涉及到的許多通路可能同樣適用于癌細胞[46,54-56]。由于馬杜霉素是一種單糖苷離子載體藥物，所以與已知的鹽霉素、莫能菌素結構上又有區(qū)別，可能會具有一些新的特性。并且作為一種曾經(jīng)被添加至禽類和哺乳類動物飼料中的抗生素，雖有一定心肌毒性但其毒性相對可控，生產(chǎn)體系成熟，價格相對較低，有進一步研究的價值。因此，可以嘗試使用馬杜霉素在體外處理HeLa細胞，探究其是否有抗腫瘤的作用，并研究其與癌細胞作用的相關機理。1.4主要研究內容及意義本研究選取HeLa細胞為研究對象，馬杜霉素為供試藥物，通過檢測HeLa細胞的增殖抑制率，觀察細胞形態(tài)及相關指標變化和相關酶和蛋白的變化，驗證馬杜霉素具有抗宮頸癌活性的假設并初步探究馬杜霉素與宮頸癌細胞的作用機制。希望可以為抗宮頸癌的藥物治療方面貢獻一份自己的力量，為馬杜霉素這種舊時的抗球蟲藥物的應用提供一種新的可能性，為其成為一種高效且生產(chǎn)成本相對較低的抗癌新藥提供一定的思路及初步理論依據(jù)。

第三部分結果與討論18后續(xù)探究。圖3.1細胞抑制率檢測(n=6)Figure3.1Cellinhibitionratedetection(2)臺盼藍法計數(shù)活細胞數(shù)量圖3.2細胞數(shù)目變化(*P<0.05，**P<0.01(n=6))Figure3.2Changesincellnumbers(*P<0.05,**P<0.01(n=6))

【參考文獻】：
期刊論文
[1]非小細胞肺癌放射治療進展[J]. 焦萬青,胡萬寧,孫國貴,賈敬好,遲玉玉,陳思遠.  世界最新醫(yī)學信息文摘. 2019(20)
[2]細胞自噬與凋亡的交互作用[J]. 付晶晶,段君凱,李紅.  生命的化學. 2014(05)
[3]活性氧調控的細胞凋亡信號[J]. 魏燕,辛曉燕.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2011(02)
[4]細胞焦亡:一種新的細胞死亡方式[J]. 林靜,李大主.  國際免疫學雜志. 2011 (03)

博士論文
[1]馬度米星銨致H9c2心肌細胞和C2C12骨骼肌細胞毒性作用機制研究[D]. 陳新.南京農(nóng)業(yè)大學 2015

碩士論文
[1]莫能菌素對A549細胞作用機制的初步研究[D]. 郭容甜.曲阜師范大學 2018
[2]鹽霉素對人宮頸癌Hela細胞體外增殖和凋亡的影響[D]. 羅鈺.南華大學 2016



本文編號：3129497