宮頸癌威脅著許多女性的身體健康,在大部分國家的女性惡性腫瘤中,宮頸癌的死亡率均排在前五,雖然適齡女性可以接種疫苗來預(yù)防大部分宮頸癌的發(fā)生,但是注射了疫苗不代表就不會患宮頸癌,近些年來世界上新增的宮頸癌患者以及因?qū)m頸癌死亡的女性還很多,因此尋找生產(chǎn)成本低、療效佳、毒副作用相對較小的抗宮頸癌藥物具有極大的現(xiàn)實意義。馬杜霉素是一種聚醚類離子載體藥物,與其同屬聚醚類離子載體藥物的鹽霉素已被證實具有抗癌活性,因此推測其也可能具有抗癌活性。本研究以人宮頸癌HeLa細(xì)胞作為研究對象,選取馬杜霉素作為供試藥物,探究其是否有抗癌活性,并初步探究其與癌細(xì)胞的作用機(jī)理。其中,MTT法、臺盼藍(lán)計數(shù)法以及集落形成實驗應(yīng)用于探究馬杜霉素對細(xì)胞增殖的影響;熒光相差顯微鏡可以觀察藥物處理后HeLa細(xì)胞及細(xì)胞核形態(tài)的變化;瓊脂糖凝膠電泳法檢測DNA斷裂;LDH釋放檢測細(xì)胞膜通透性;活性氧試劑盒檢測ROS含量變化;流式細(xì)胞儀用于檢測馬杜霉素對細(xì)胞周期和凋亡的影響;caspase活性檢測試劑盒檢測馬杜霉素對凋亡相關(guān)caspase酶活性的影響;Western Blot應(yīng)用于分析細(xì)胞凋亡與自噬相關(guān)蛋白表達(dá)量的變化。細(xì)胞增殖實驗... 

【文章來源】：曲阜師范大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

015年全球部分國家70歲以下癌癥患者數(shù)量分布[10]

第一部分前言6中容易出現(xiàn)拌料不勻的情況，日積月累的飼喂還會出現(xiàn)毒素的累積損傷心肌細(xì)胞，所以已停止應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)[45,46]。圖1.2馬杜霉素的銨鹽形式分子結(jié)構(gòu)圖[46]馬杜霉素是一種聚醚類離子載體藥物，相關(guān)研究表明，聚醚類離子載體擬環(huán)結(jié)構(gòu)中的聚醚骨架能夠與金屬陽離子形成絡(luò)合物，改變陽離子遷移的機(jī)理并促進(jìn)它們跨細(xì)胞膜的運輸，從而產(chǎn)生顯著的抗癌活性[44,47]。例如，同屬聚醚類離子載體藥物的鹽霉素不易耐藥且可以降低癌細(xì)胞對其他抗癌藥物的耐藥性[48,49]；莫能菌素可誘導(dǎo)多種癌癥的凋亡及自噬等[50-53]。然而，到目前為止，國內(nèi)外尚未有馬杜霉素可以抗癌的報道，但馬杜霉素可誘導(dǎo)部分心肌細(xì)胞和成肌細(xì)胞的凋亡和自噬，其中涉及到的許多通路可能同樣適用于癌細(xì)胞[46,54-56]。由于馬杜霉素是一種單糖苷離子載體藥物，所以與已知的鹽霉素、莫能菌素結(jié)構(gòu)上又有區(qū)別，可能會具有一些新的特性。并且作為一種曾經(jīng)被添加至禽類和哺乳類動物飼料中的抗生素，雖有一定心肌毒性但其毒性相對可控，生產(chǎn)體系成熟，價格相對較低，有進(jìn)一步研究的價值。因此，可以嘗試使用馬杜霉素在體外處理HeLa細(xì)胞，探究其是否有抗腫瘤的作用，并研究其與癌細(xì)胞作用的相關(guān)機(jī)理。1.4主要研究內(nèi)容及意義本研究選取HeLa細(xì)胞為研究對象，馬杜霉素為供試藥物，通過檢測HeLa細(xì)胞的增殖抑制率，觀察細(xì)胞形態(tài)及相關(guān)指標(biāo)變化和相關(guān)酶和蛋白的變化，驗證馬杜霉素具有抗宮頸癌活性的假設(shè)并初步探究馬杜霉素與宮頸癌細(xì)胞的作用機(jī)制。希望可以為抗宮頸癌的藥物治療方面貢獻(xiàn)一份自己的力量，為馬杜霉素這種舊時的抗球蟲藥物的應(yīng)用提供一種新的可能性，為其成為一種高效且生產(chǎn)成本相對較低的抗癌新藥提供一定的思路及初步理論依據(jù)。

第三部分結(jié)果與討論18后續(xù)探究。圖3.1細(xì)胞抑制率檢測(n=6)Figure3.1Cellinhibitionratedetection(2)臺盼藍(lán)法計數(shù)活細(xì)胞數(shù)量圖3.2細(xì)胞數(shù)目變化(*P<0.05，**P<0.01(n=6))Figure3.2Changesincellnumbers(*P<0.05,**P<0.01(n=6))

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]非小細(xì)胞肺癌放射治療進(jìn)展[J]. 焦萬青,胡萬寧,孫國貴,賈敬好,遲玉玉,陳思遠(yuǎn).  世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2019(20)
[2]細(xì)胞自噬與凋亡的交互作用[J]. 付晶晶,段君凱,李紅.  生命的化學(xué). 2014(05)
[3]活性氧調(diào)控的細(xì)胞凋亡信號[J]. 魏燕,辛?xí)匝?  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2011(02)
[4]細(xì)胞焦亡:一種新的細(xì)胞死亡方式[J]. 林靜,李大主.  國際免疫學(xué)雜志. 2011 (03)

博士論文
[1]馬度米星銨致H9c2心肌細(xì)胞和C2C12骨骼肌細(xì)胞毒性作用機(jī)制研究[D]. 陳新.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015

碩士論文
[1]莫能菌素對A549細(xì)胞作用機(jī)制的初步研究[D]. 郭容甜.曲阜師范大學(xué) 2018
[2]鹽霉素對人宮頸癌Hela細(xì)胞體外增殖和凋亡的影響[D]. 羅鈺.南華大學(xué) 2016



本文編號：3129497