本文關(guān)鍵詞：促排卵對小鼠卵巢印跡基因H19DMR區(qū)甲基化狀態(tài)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：與傳統(tǒng)的遺傳定律不同,表觀遺傳學(xué)在不改變基因堿基序列的情況下,改變了基因的表達(dá)。而引起基因表達(dá)發(fā)生改變的影響被稱為表觀遺傳修飾。DNA甲基化與基因組印跡(Genomic Imprinting)均屬于表觀遺傳學(xué)的范疇之列。某些基因表現(xiàn)為不表達(dá)或表達(dá)極弱,而另一等位基因呈親源依賴性的單等位基因表達(dá),稱為基因組印跡,仿佛這些基因帶有某種可識別的印跡,是不同親本來源的一對等位基因。因此具有這一現(xiàn)象的基因就稱為印跡基因(Imprinted Gene)。表觀遺傳機(jī)制主要是指在基因印跡擦除、重建或維持過程中出現(xiàn)DNA甲基化/組蛋白修飾改變,然而DNA序列并沒有發(fā)生改變,只造成印跡基因表達(dá)的異常。在配子形成和胚胎的構(gòu)建及生長發(fā)育的過程中,基因印跡可出現(xiàn)表觀遺傳學(xué)變化,進(jìn)行印跡擦除和重建,在體細(xì)胞分裂過程中維持。這一機(jī)制中任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)錯誤都有可能引起胚胎發(fā)育缺陷,甚至造成胚胎的死亡。目前關(guān)于ART子代印跡疾病的報(bào)道,主要提示表觀遺傳改變引起的異常所致。然而,由ART技術(shù)引起子代出現(xiàn)印跡疾病,其發(fā)生機(jī)制尚未明確,目前主要認(rèn)為可能與父母自身的生育能力、促排卵、體外受精、卵細(xì)胞漿單精子注射等多種因素有關(guān)。H19基因是目前研究較多的印跡基因,位于小鼠7號染色體末端區(qū)域,人染色體11p15.5。人類H19基因總長3 489 bp,不翻譯成蛋白質(zhì),只表達(dá)RNA。很多研究發(fā)現(xiàn)H19基因印跡的改變與輔助生殖技術(shù)子代的安全性相關(guān)。目的:本實(shí)驗(yàn)主要研究促排卵對小鼠卵巢印跡基因H19差異性甲基化區(qū)域(DMR)甲基化狀態(tài)的影響。方法:將實(shí)驗(yàn)分為兩組,分別為實(shí)驗(yàn)組和對照組。所有實(shí)驗(yàn)小鼠均為清潔系初情期雌性昆明系小白鼠,每組20只。實(shí)驗(yàn)組小鼠使用孕馬血清促性腺刺激素(PMSG)促排卵,對照組小鼠在情動周期腹腔注射生理鹽水。對獲得的所有小鼠卵巢組織提取全基因組DNA,經(jīng)亞硫酸鹽變性修飾,使得非甲基化狀態(tài)的堿基C轉(zhuǎn)變成堿基U,然而甲基化的堿基C不變,經(jīng)PCR擴(kuò)增出目的片段,然后進(jìn)行克隆測序分析印跡基因H19 DMR區(qū)甲基化狀態(tài)的改變情況。結(jié)果:經(jīng)亞硫酸鹽變性修飾及克隆測序分析,對照組小鼠卵巢基因組DNA中H19 DMR區(qū)高甲基化比例為50.31%±7.98%,實(shí)驗(yàn)組小鼠卵巢基因組DNA中H19DMR區(qū)高甲基化比例為30.94%±8.72%。實(shí)驗(yàn)組與對照組相比,存在明顯的甲基化丟失(P0.05)。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)研究提示,促排卵可引起了小鼠卵巢印跡基因H19 DMR區(qū)的甲基化丟失。
【關(guān)鍵詞】：小鼠 卵巢 印跡基因 H19 促排卵
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R711.6
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-9
• 摘要9-11
• ABSTRACT11-13
• 前言13-16
• 內(nèi)容與方法16-25
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料16-17
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法17-24
• 3. 統(tǒng)計(jì)分析24-25
• 結(jié)果25-29
• 討論29-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 綜述44-61
• 綜述參考文獻(xiàn)53-61
• 作者簡介及讀研期間主要科研成果61-63
• 致謝63

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  本文關(guān)鍵詞：促排卵對小鼠卵巢印跡基因H19DMR區(qū)甲基化狀態(tài)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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