本文關(guān)鍵詞：B淋巴細胞瘤-2基因、腫瘤壞死因子基因單核苷酸多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis, EM),簡稱內(nèi)異癥,是因子宮內(nèi)膜組織(腺體或間質(zhì))出現(xiàn)在子宮體以外的部位而引起的一種以持續(xù)加重的盆腔粘連、痛經(jīng)、不孕等為臨床表現(xiàn)的病癥。內(nèi)異癥之異位內(nèi)膜可侵犯全身各個部位,但主要侵犯部位集中在盆腔,特別是卵巢、宮骶韌帶最為常見。流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)內(nèi)異癥在人群中的發(fā)病率在10-15%之間,其高發(fā)人群是育齡期婦女,其中25-45歲者占76%。雖然內(nèi)異癥形態(tài)學上是一種良性疾病,但是其臨床行為卻有惡性腫瘤的特征,比如種植、侵襲和遠處轉(zhuǎn)移等。內(nèi)異癥的發(fā)病原因和發(fā)病機制在近些年來已得到廣泛的研究,但是此類研究至今尚未完全明確其病因、病機。目前,關(guān)于內(nèi)異癥發(fā)病機制的學說主要關(guān)注于以下幾個方面：異位種植學說、體腔上皮化生學說、誘導學說、免疫及炎癥因素、遺傳因素等,但上述任一學說都不能全面解釋內(nèi)異癥的發(fā)病機制。研究表明內(nèi)異癥是一種基因與環(huán)境相互作用引起的疾病。內(nèi)異癥一級親屬的發(fā)病風險是無家族史者的7倍,單卵雙胎姐妹中一人患內(nèi)異癥時另一人患病的幾率達75%。單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism, SNP)是指由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性,它是人類可遺傳的變異中最常見的一種。已有研究表明內(nèi)異癥與細胞因子及炎癥因子、類固醇合成酶及其受體、雌激素受體、粘附分子和基質(zhì)酶等基因單核苷酸多態(tài)性相關(guān)。雖然內(nèi)異癥雖是一種良性疾病,但它卻有惡性腫瘤的特征。相關(guān)研究表明,異位內(nèi)膜的凋亡受阻和炎癥反應(yīng)是內(nèi)異癥發(fā)病的一個重要因素。B淋巴細胞瘤-2(Bcl-2)基因具有抑制細胞凋亡的作用,同時有研究表明Bcl-2基因多態(tài)性可能與甲狀腺癌、咽喉癌、慢性淋巴細胞白血病、卵巢早衰等遺傳易感性有關(guān)。同時KORMAZ D等研究發(fā)現(xiàn)Bcl-2蛋白在內(nèi)異癥患者異位內(nèi)膜組織的表達要高于正常內(nèi)膜組織。目前國內(nèi)外對Bcl-2基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)性的研究并不多見,為此,我們利用等位基因特異性PCR (AS-PCR)聯(lián)合DNA測序的方法對302位內(nèi)異癥患者(病例組)和337位未患內(nèi)異癥婦女的Bcl-2基因rs1088477A/G和rs2279115A/C單核苷酸多態(tài)性進行基因分型,并以此闡述Bcl-2基因單核苷酸多態(tài)性與內(nèi)異癥的相關(guān)性。盆腔炎癥狀態(tài)和免疫調(diào)節(jié)異常在內(nèi)異癥的發(fā)生、發(fā)展中占有重要作用,腫瘤壞死因子(TNF)和白細胞介素(IL)等細胞因子與內(nèi)異癥的發(fā)生、發(fā)展亦有密切的關(guān)聯(lián)性。研究表明內(nèi)異癥患者腹腔液中的TNF濃度明顯高于健康婦女,而且活動期內(nèi)異癥患者腹腔液中TNF濃度要明顯高于非活動期者,同時中、重型內(nèi)異癥患者腹腔液中TNF濃度最高。近年來,許多研究關(guān)注于TNF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥的相關(guān)性,但各研究結(jié)果不盡相同。為了更準確的闡述TNF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥的相關(guān)性,我們利用循證醫(yī)學的方法對搜集到的8例相關(guān)研究(其中包括1221位內(nèi)異癥患者和1376位健康婦女)進行meta分析,試圖通過meta分析闡釋TNF基因多態(tài)性(TNF-α-238G/A、TNF-α-308G/A、TNF-α-857C/T、TNF-α-863C/A、 TNF-α-1031T/C、TNF-β+252G/A)與內(nèi)異癥的相關(guān)性。研究目的探討B(tài)淋巴細胞瘤-2(Bcl-2)基因、腫瘤壞死因子(TNF)基因單核苷酸多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥遺傳易感性的關(guān)系。研究對象與方法1.研究對象1.1 Bcl-2基因分型實驗對象302例子宮內(nèi)膜異位癥患者來自2008年10月至2009年11月在南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院、珠江醫(yī)院及佛山市第一人民醫(yī)院經(jīng)手術(shù)(經(jīng)腹或腹腔鏡)及病理檢查確診的內(nèi)異癥或子宮腺肌病患者。337例對照組婦女來自同期因異位妊娠、剖宮產(chǎn)在珠江醫(yī)院實施手術(shù)且術(shù)中證實無內(nèi)異癥灶的婦女。病例組和對照組婦女的年齡[(34.3±6.9)、(33.7±5.5)歲,P=0.222]、身高[(155.3±3.9)cm、(155.7±2.5)cm,P=0.119]、體重[(61.3±4.9)kg、(60.7±3.5)kg,P=0.073]、吸煙史(均無吸煙史)差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。各研究實驗對象均來自中國南方漢族人群,且彼此無血緣關(guān)系；所有研究對象家簇中無內(nèi)異癥遺傳史,且各研究對象均獲知情同意。1.2 TNF基因多態(tài)性相關(guān)研究的meta分析對象根據(jù)文獻納入和剔除標準,閱讀和篩選相關(guān)國內(nèi)外文獻,我們篩選出8篇相關(guān)研究文獻。2.研究方法2.1 Bcl-2基因分型的實驗方法2.1.1血標本采集分別留取病例組和對照組婦女術(shù)后第三日外周血2m1,檸檬酸鈉抗凝后保存于-20攝氏度的冰箱中。2.1.2外周血標本DNA提取根據(jù)OMEGA公司的E-Z 96TM Blood DNA kit試劑盒相關(guān)說明書提取外周血白細胞基因組DNA。2.1.3 Bcl-2基因單核苷酸多態(tài)性基因分型利用等位基因特異性PCR聯(lián)合DNA測序的方法確定各研究對象Bcl-2基因多態(tài)性位點(rs1088477A/G和rs2279115A/C)的基因型。2.2 TNF基因多態(tài)性研究的meta分析方法通過檢索Pubmed數(shù)據(jù)庫、EMBase數(shù)據(jù)庫、Google Scholar數(shù)據(jù)庫、萬方數(shù)據(jù)庫、中國知網(wǎng)(CNKI)數(shù)據(jù)庫,檢索的中文關(guān)鍵詞為“內(nèi)異癥、基因多態(tài)性、基因、腫瘤壞死因子、多態(tài)性”；檢索的英文關(guān)鍵詞為"("TNF" OR "Tumor Necrosis Factor") AND ("Endometriosis" OR"Endometrioses" OR "Adenomyosis") AND ("Genetic polymorphism" OR "Single nucleotide polymorphism" OR "SNP" OR "Mutant" OR "Gene variation" OR "Gene mutation")."參照meta分析研究預設(shè)的文獻納入及剔除標準,并對檢索到的文獻進行文獻質(zhì)量評估,最終提取出8篇相關(guān)文獻,然后利用STATA12.0 (Stata Corp, College Station, TX, USA)軟件進行meta分析。2.3統(tǒng)計分析2.3.1 Bcl-2基因多態(tài)性與內(nèi)異癥相關(guān)性的統(tǒng)計分析直接計算兩組人群各基因型頻率以及等位基因頻率。對照組人群基因型分布是否符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律用卡方檢驗來驗證。而兩組間各基因型頻率的比較用Logistic回歸分析,OR值表示相對危險度,95%CI表示95%可信區(qū)間。統(tǒng)計運算采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件,取雙側(cè)P0.05為有統(tǒng)計學意義。利用病例對照研究方法,并通過OR值、95%可信區(qū)間、P值來判斷Bcl-2基因多態(tài)性與內(nèi)異癥的相關(guān)性。2.3.2 TNF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥相關(guān)性的統(tǒng)計分析TNF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥相關(guān)性研究的meta分析采用STATA12.0軟件。首先,通過STATA12.0軟件對各研究間的異質(zhì)性進行檢驗(Cochrane檢驗),計算出I2值(I2值大于或等于50%時提示異質(zhì)性較大,反之異質(zhì)性較小)；其次,根據(jù)各研究間的異質(zhì)性大小選擇相應(yīng)的效應(yīng)模式(異質(zhì)性大時采用隨機效應(yīng)模式,反之采用固定效應(yīng)模式),同時根據(jù)所選取的效應(yīng)模式計算出效應(yīng)量；再次,可以通過不同的遺傳模型進行相關(guān)性分析(如顯性模型、隱形模型、共顯性模型、超顯性模型)；最后,通過Begg's檢驗和Egger's檢驗分析發(fā)表偏倚,根據(jù)OR值、95%可信區(qū)間、P值判斷TNF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥的相關(guān)性。結(jié)果1. Bcl-2基因多態(tài)性與內(nèi)異癥相關(guān)性研究結(jié)果1.1病例組和對照組研究隊形年齡分布病例組人群平均年齡為34.3±6.9歲,對照組人群平均年齡為33.7±5.5歲,兩組年齡分布差異無統(tǒng)計學意義(P=0.222)。1.2 SNP分型結(jié)果 所選取的對照組和病例組中國南方漢族婦女中Bcl-2基因rs1088477A/G和rs2279115A/C位點成多態(tài)性分布,且對照組rs1088477A/G和rs2279115A/C位點基因分布頻率符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律(P值分別為0.16和0.11),因此納入的研究對象具有人群代表性。1.3統(tǒng)計分析結(jié)果對于多態(tài)性位點rs1088477A/G而言：病例組和對照組等位基因A、G的分布分別為5.0%、95.0%和4.9%、95.1%,基因型AA、AG、GG的分布分別為0.6%、8.6%、90.8%和1.3%、7.3%、91.4%。病例組和對照組等位基因及基因型分布均不存在統(tǒng)計學意義(P值均大于0.05)。對于多態(tài)性位點rs2279115A/C而言：病例組和對照組等位基因A、C的分布分別為46.9%、53.1%和44.5%、55.5%,基因型AA、AC、C的分布分別為25.8%、42.1%、32.1%和22.0%、45.1%、32.9%。病例組和對照組等位基因及基因型分布均不存在統(tǒng)計學意義(P值均大于0.05)。2.TNF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥相關(guān)性研究的meta分析結(jié)果Meta分析結(jié)果提示多態(tài)性位點TNF-α-308G/A、TNF-α-857C/T、TNF-α-863C/A、TNF-β+252G/A基因多態(tài)性與內(nèi)異癥遺傳易感性無關(guān)(P值均大于0.05)。而多態(tài)性位點TNF-α-1031T/C基因多態(tài)性與內(nèi)異癥易感性有關(guān),相對于C堿基言T堿基增加了內(nèi)異癥的患病風險(T vs. C:OR=1.057; 95% CI,0.771-1.449; P=0.012);相對于攜帶C堿基的基因型而言,TT基因型增加了內(nèi)異癥的易感性(‘TT vs.C-carriers: OR=1.139; 95% CI,0.814-1.593; P=0.029)結(jié)論1.Bcl-2基因多態(tài)性(rs1088477A/G和rs2279115A/C)與內(nèi)異癥易感性無關(guān)。2.TNF基因多態(tài)性位點TNF-α-308G/A、TNF-α-857C/T、TNF-α-863C/A、 TNF-β+252G/A多態(tài)性亦與內(nèi)異癥易感性無關(guān),而多態(tài)性位點TNF-α-1031T/C的T堿基可能增加了內(nèi)異癥的易感性。
【關(guān)鍵詞】：子宮內(nèi)膜異位癥 單核苷酸多態(tài)性 B淋巴細胞瘤-2基因 腫瘤壞死因子基因meta分析
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R711.71
【目錄】：

• 摘要3-9
• ABSTRACT9-17
• 第1章 Bcl-2基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)性的研究17-39
• 前言17-24
• 對象與方法24-32
• 結(jié)果32-36
• 討論36-39
• 第2章 腫瘤壞死因子基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)性研究的meta分析39-55
• 前言39-42
• 對象和方法42-45
• 結(jié)果45-52
• 討論52-55
• 參考文獻55-64
• 附錄64-66
• 綜述66-81
• 參考文獻76-81
• 成果81-82
• 致謝82-83

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 魯澤春;李亞里;;子宮內(nèi)膜的“鳳凰涅i謾敝貳毖躚≡裼胱庸諛ひ煳恢⒌牟∫蜃槌跆絒J];醫(yī)學爭鳴;2015年02期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 黃飛翔;Paxillin在子宮內(nèi)膜異位癥在位子宮內(nèi)膜的表達及黃芩素對其表達的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學;2013年

2 魯澤春;缺氧在子宮內(nèi)膜異位癥中的致病作用及機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 楊頁多;HNF-1β與鐵在子宮內(nèi)膜異位癥與卵巢癌發(fā)生關(guān)系中的作用[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

2 趙路陽;全外顯子測序技術(shù)探尋卵巢子宮內(nèi)膜異位癥致病基因的研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2014年

  本文關(guān)鍵詞：B淋巴細胞瘤-2基因、腫瘤壞死因子基因單核苷酸多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：306605